資源描述:
《顯微復(fù)習(xí)地的題目最終答案詳解詳解全版》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案顯微技術(shù)包括哪些部分內(nèi)容?顯微技術(shù):利用光學(xué)系統(tǒng)或電子光學(xué)系統(tǒng)設(shè)備,觀察肉眼所不能分辨的微小物體形態(tài)結(jié)構(gòu)及其特性的技術(shù)。包括1各種顯微鏡的基本原理操作和應(yīng)用的技術(shù)2顯微鏡樣品的制備技術(shù)3觀察結(jié)果的記錄分析和處理的技術(shù)。固定時應(yīng)注意事項(xiàng)1注意固定材料本身的結(jié)構(gòu)性質(zhì),選用適合的固定液,固定時間根據(jù)材料特點(diǎn)增減2固定微小材料直接投入固定液中,對于較大材料先將其解剖成較小材料迅速投入固定液,完成殺生固定作用3固定體積較大材料時,會出現(xiàn)外部固定過度,而內(nèi)部未固定好,考慮選用滲透快的固定液(乙酸乙醇或苦味酸乙醛混合液),加
2、用超聲波發(fā)生器能達(dá)到迅速固定目的4對多毛的芽或根莖的固定時,先投入乙酸乙醇液浸泡數(shù)分鐘,然后再入納瓦申固定液或其他固定液完成固定。同時,要進(jìn)行抽氣,另可用超聲波發(fā)生器進(jìn)行固定抽氣5一般固定液多為酸性固定影像,鹽基性固定影像較少,除考慮影像外,還應(yīng)在脫水劑、滲入劑方面進(jìn)行觀察6固定劑的濃度不可忽視7固定材料的記錄:固定標(biāo)本瓶上必須貼上標(biāo)簽,用筆書寫以下內(nèi)容:編號,采集時間、地點(diǎn)、處理者的姓名簡寫,固定液的名稱,保存液的名稱等常用的染色劑類型根據(jù)來源:天然染料和人工染料根據(jù)化學(xué)性質(zhì):堿性染料酸性染料中興染料根據(jù)染色性能:核染料
3、細(xì)胞質(zhì)染料細(xì)胞壁染料組織化學(xué)染料熒光染料活體染料注意事項(xiàng)1應(yīng)根據(jù)觀察目的、樣品結(jié)構(gòu)、性質(zhì)選擇適當(dāng)?shù)娜旧椒?材料從某一溶液進(jìn)入染色液時,兩種溶液的濃度必須相同3酸性染料著色速度快于堿性染料,雙重染色時,先用堿性染料染色,再用酸性4染色寧可深,因?yàn)樗春兔撍畷诡伾儨\5用分色劑時,要在低倍顯微鏡下隨時觀察,分色適度即徹底洗凈6染色的時間不是一成不變,要根據(jù)染色劑的性質(zhì),配方,切片的厚薄,材料的結(jié)構(gòu)等在使用時靈活掌握常用的透明劑透明劑都是石蠟溶劑,不能與水混合例如:二甲苯氯仿冬青油浸蠟1浸蠟瓶放在溫箱中過夜時,材料不能太多2
4、浸蠟一般從低溫到高溫,從低濃度到高濃度,使石蠟慢慢滲入組織內(nèi),將透明劑替代出來包埋1注意安全防火防燙傷2包埋速度不能太慢以免石蠟?zāi)?包埋石蠟溫度不能太高以免損傷材料4蠟中出現(xiàn)氣泡可將鑷子燒熱燙去5未冷卻前不能將蠟盒移入水中6應(yīng)注意包埋材料的位置、方向,要有利于切割切片及研究7熔蠟時人不能離開,如果石蠟出現(xiàn)冒煙情況時,不要揭開蠟杯蓋,要及時切斷電源徒手切片方法制片過程。取樣—固定—水洗—切片—染色—脫水—透明—封藏1取材:用FAA固定或不固定2徒手切片的步驟a取一套小培養(yǎng)皿,皿內(nèi)盛有清水b切片c挑選好的切片3染色與保存a臨
5、時裝片:加1d1%番紅水溶液,短期保存則加1d10%的甘油使切片更透明,避免失水變干變黑b永久存片:染色滑走切片法制片過程特殊步驟過程1固定切片2固定樣品3調(diào)整材料的高度4調(diào)節(jié)切片的厚度5切片6每次切片結(jié)束后,要用軟布將切片機(jī)擦拭干凈,滑槽內(nèi)切下的碎屑也需清除,將切片刀取下擦干凈并滴注機(jī)油后放入刀盒保存特殊步驟:材料若太堅(jiān)硬,需經(jīng)過軟化處理壓片法制片過程1精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案取材和前處理:種子萌發(fā)后待初生根長到1cm長左右,切取根尖前端5mm置于裝有前處理液(秋水仙素、對二氯苯、a-溴代萘、8-羥基喹啉)的指形瓶中,處理3
6、~5h2固定:將材料固定于乙醇:乙酸(3:1)固定液0.5h以上3水洗:將材料用自來水浸泡、清洗20min以上,期間要換水4酶解:用纖維素酶和果膠酶各2.5%的混合酶液對材料酶解30min5水洗:用自來水短暫沖洗,洗去酶液6酸解:將材料用1mol/LHCl在60攝氏度水浴中酸解10min7水洗、壓片:棄去鹽酸,加清水于材料中,浸泡20min以上,卡寶品紅染色,壓片鏡檢倒置顯微鏡的特點(diǎn)1物鏡與照明系統(tǒng)顛倒2用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞,通常具有相差或DIC物鏡,有的還具有熒光裝置透射電鏡中樣品處理方法1加入物鏡光闌2提高樣品中某些部
7、分的原子序數(shù)Z3選用較低的加速電壓4暗場顯微法5適當(dāng)?shù)那衅穸认瀻Р恢?,成彎曲狀:主要原因是蠟塊切面的上下邊緣不平行,將蠟塊邊緣修片即可2切片縱裂:主要原因是刀有缺口或者劈刀時間太短,組織軟化不夠等??梢苿拥度形恢没蛘吲?、軟化組織(取下臺木,將蠟塊倒放在有水的培養(yǎng)皿中浸泡半天,使組織軟化)后再切片3材料破碎:主要原因是脫水不徹底,浸蠟不完全,石蠟沒有完全填充植物組織而形成空洞,須重做材料石蠟切片法的優(yōu)點(diǎn)1易操作2能把材料切均勻,極?。?~12mm)的切片3切下的單個蠟片可以連接形成蠟帶,有利于作連續(xù)切片,是其他制片法難以
8、達(dá)到的4可永久保存解離法制片的過程1解離:將被檢查的木質(zhì)部切成火柴梗粗細(xì),長約1~2cm的小條2水洗:尼龍紗網(wǎng)濾去酸液,換水浸泡數(shù)次至酸液除盡3保存:用玻璃棒搗散組織,轉(zhuǎn)入離心管離心,棄去上清液,加入50%乙醇保存4染色:取少量木質(zhì)部解離組織,置于1%番紅水溶液染5min5水洗:數(shù)次去浮色6粘片:用玻璃