微酸性電解水對(duì)大腸桿菌在育雛雞場(chǎng)消毒通道中地試驗(yàn)地地研究

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1、實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案微酸性電解水對(duì)大腸桿菌在育雛雞場(chǎng)消毒通道中的試驗(yàn)研究趙麗杰2臧一天1李保明1李星爍1曹薇1胡經(jīng)理2趙再嶺2劉純21.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部設(shè)施農(nóng)業(yè)工程重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室,北京100083;2.華裕農(nóng)業(yè)科技有限公司,邯鄲0571531.引言近年來(lái),隨著中國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展及畜禽生產(chǎn)規(guī)模化集約化程度的逐漸增高,疫病已成為限制畜禽產(chǎn)業(yè)利潤(rùn)增長(zhǎng)的主要因素;而人們對(duì)養(yǎng)殖生產(chǎn)中抗生素減少的需求和食品安全的擔(dān)憂(yōu)亦日益增加,在這種情況下,聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織(FoodandAgricultureOrganization,F(xiàn)AO)認(rèn)為施行生物安全以控制動(dòng)物疫病的發(fā)生是一種經(jīng)證明減少疫病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的重要性和

2、可行性措施[1],Hsu及Wanaratana等[2-3]人分別將生物安全在內(nèi)容上分為隔離、清洗及消毒三大部分,其中,消毒是減少疫病傳入及控制疫病傳播的重要因素之一。目前,畜禽養(yǎng)殖過(guò)程中通常使用一些化學(xué)消毒劑滅活病原微生物達(dá)到消毒作用,但這些化學(xué)制劑往往會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重的化學(xué)殘留及環(huán)境污染,而一些物理消毒方法如紫外線(xiàn)、高壓蒸汽和空間電場(chǎng)等雖沒(méi)有化學(xué)殘留等問(wèn)題,但其適用范圍極其狹窄[4],隨著人們對(duì)畜禽產(chǎn)品質(zhì)量要求的提高在畜禽生產(chǎn)中亟需一種健康高效環(huán)保的綠色消毒劑。酸性電解水(acidicelectrolyzedwater,AEW),亦稱(chēng)高氧化還原電位水,是一種新型殺菌消毒劑,大量研究表明

3、酸性電解水對(duì)各種細(xì)菌、病毒具有瞬時(shí)、廣譜、無(wú)殘留的高效殺菌作用[5-7]。然而,由于其強(qiáng)酸性(pH<2.7)、對(duì)金屬腐蝕精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案性大,限制了其應(yīng)用[8],特別是在畜禽養(yǎng)殖中的應(yīng)用[9]。微酸性電解水(slightlyacidiclelectrolyzedwater,SAEW)的pH值(6.0~7.0)較高且腐蝕性小、并亦具有與酸洗電解水同樣的高效殺菌作用,且其他化學(xué)消毒劑相比,微酸性電解水使用成本低,是一種廉價(jià)、安全的綠色消毒劑[10-11]。大腸桿菌(Escherichiacoli)病是一種對(duì)養(yǎng)雞業(yè)危害巨大的頻發(fā)性疾病,人員或物品在進(jìn)入雞場(chǎng)時(shí)會(huì)有很大機(jī)率帶入并傳播大腸

4、桿菌,而通過(guò)微酸性電解水在人員或物品進(jìn)入通道時(shí)消毒可有效控制并降低大腸桿菌病在雞場(chǎng)的傳播風(fēng)險(xiǎn)。因此,本文首先研究了微酸性電解水對(duì)大腸桿菌菌懸液的殺菌效果,并隨后模擬試驗(yàn)研究了微酸性電解水在消毒通道中對(duì)大腸桿菌在衣物表面的殺菌效果,并同時(shí)對(duì)比了其與其他消毒劑(戊二醛、季銨鹽類(lèi))的殺菌效果。1.材料與方法2.1試驗(yàn)地點(diǎn)和儀器設(shè)備試驗(yàn)于2014年10月-11月在河北某育雛場(chǎng)消毒通道中進(jìn)行,該消毒通道長(zhǎng)×寬×高為6.5m×1m×3m,東西走向,南墻約2米處安裝兩臺(tái)噴霧器,其距前門(mén)入口處各1.6m和2.6m,該噴霧器噴霧啟動(dòng)及時(shí)間受人員消毒控制器(公司)控制,其所噴霧滴大小約為70-80μm

5、。2.2試驗(yàn)方法2.2.1細(xì)菌培養(yǎng)將冷凍干燥的大腸桿菌(ATCC25922)接種到胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基上37℃恒溫培養(yǎng)24h活化,隨后離心機(jī)4℃、4000轉(zhuǎn)離心15分鐘并棄上清,將精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案細(xì)菌沉淀用0.1%的蛋白胨水清洗兩次,重新制成10ml含菌數(shù)約為108~109cfu/mL的菌懸液備用。2.2.2消毒劑的制備采用微酸性電解水連續(xù)式無(wú)隔膜電解水機(jī)(睿安德環(huán)保設(shè)備有限公司)通入Nacl溶液和稀鹽酸電解制取PH值約為6.25-6.50,ORP為589-897mv的不同有效氯濃度的電解水,在菌懸液殺菌實(shí)驗(yàn)中,為達(dá)到所需有效氯濃度,分別將制取的有效氯濃度為10mg/l的電解水

6、進(jìn)行不同濃度的稀釋以達(dá)到所取的有效氯濃度,其中,有效氯濃度的測(cè)試采用有效氯測(cè)定儀(RC-2Z,竺原理化工業(yè)株式會(huì)社,日本),PH值及ORP分別采用PH計(jì)及ORP計(jì)(賽多利斯股份公司,德國(guó))。將戊二醛及季銨鹽類(lèi)消毒劑則采用原液與自來(lái)水混合至1%濃度的比例以備用。2.2.3微酸性電解水對(duì)大腸桿菌菌懸液的殺菌實(shí)驗(yàn)分別測(cè)定不同有效氯濃度及不同時(shí)間下微酸性電解水對(duì)大腸桿菌的殺菌效果,即在無(wú)菌試管中加入0.5mL試用菌懸液,再用移液槍取4.5mL的有效氯濃度分別為2mg/l、4mg/l、6mg/l、8mg/l、10mg/l的微酸性電解水注入無(wú)菌試管中,迅速混合并立即計(jì)時(shí),待試驗(yàn)菌與電解水相互作

7、用至預(yù)定時(shí)間(1min、1.5min、2min、2.5min、3min),吸取0.5mL混合液加入4.5mL中和劑(Na2S2O3)中混合均勻,停止殺菌,進(jìn)行系列梯度稀釋?zhuān)x擇3個(gè)合適的稀釋度,吸取0.1mL稀釋液,進(jìn)行涂布平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)。每組重復(fù)三次,取平均值。2.2.4微酸性電解水在消毒通道中的殺菌實(shí)驗(yàn)研究將制取的260mg/l的微酸性電解水及1%濃度的戊二醛及季銨鹽類(lèi)消毒劑分別放置在消毒通道內(nèi)自動(dòng)噴霧器下的入水桶中,入水通每次放入不同消毒劑前皆進(jìn)行清洗,在放入后亦

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