生化實(shí)驗(yàn)報(bào)告儀器操作

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1、為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃生化實(shí)驗(yàn)報(bào)告儀器操作　　生化大實(shí)驗(yàn)　　實(shí)驗(yàn)報(bào)告　　姓名：　　學(xué)號(hào)：　　專業(yè)：　　班級(jí)：　　實(shí)驗(yàn)班級(jí)：　　單位：　　指導(dǎo)老師：　　實(shí)驗(yàn)1多酚氧化酶的分離提取　　一、實(shí)驗(yàn)原理：　　多酚氧化酶(PPO)能夠通過(guò)分子氧氧化酚或多酚形成對(duì)應(yīng)的醌，它是植物組織內(nèi)廣泛存在的一種含銅氧化酶，位于質(zhì)體、微體內(nèi)，可參與植物生長(zhǎng)、分化、種皮透性及植物抗性的調(diào)節(jié)，屬于末端氧化酶的一種?！　≈参锸艿綑C(jī)械損傷和病菌侵染后，PPO催化酚與O2氧化形成

2、為醌，使組織形成褐變，以便損傷恢復(fù)，防止或減少感染，提高抗病能力。醌類物質(zhì)對(duì)微生物有毒害作用，所以受傷組織一般這種酶的活性就會(huì)提高。另外，多酚氧化酶也可以與細(xì)胞內(nèi)其他底物氧化相偶聯(lián)，起到末端氧化酶的作用。目的-通過(guò)該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　蛋白質(zhì)在不同濃度的鹽溶液中的的溶解度不同，通過(guò)向溶液中加入適量的固體硫酸銨來(lái)調(diào)節(jié)粗提液的鹽

3、濃度從而可以將PPO蛋白從體系中析出，且大分子蛋白質(zhì)不能通過(guò)透析膜?！　《?shí)驗(yàn)?zāi)康模骸　⊥ㄟ^(guò)本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，學(xué)習(xí)和了解蛋白質(zhì)的提取、分離的基本原理和方法，掌握相關(guān)的儀器設(shè)備的正確使用的方法，以及蛋白質(zhì)的提取分離的系統(tǒng)技術(shù)?！　∪?、材料與試劑：　　1.材料：馬鈴薯　　2.試劑：磷酸緩沖液pH配制是配x10倍的濃縮液1000ml；固體硫酸銨；磷酸緩沖液pH　　3.設(shè)備：試管與試管架；燒杯、玻璃棒；移液管、滴管等；試劑瓶；透析袋；過(guò)濾紗布；植物組織勻漿機(jī)；pH計(jì)和pH試紙；高速冷凍離心機(jī)；　　四、操作步驟：　　1.兩小組共稱取200g土豆削

4、皮后切成小塊，加入300ml緩沖液A，兩者按1:1(W/V)比例勻漿1min；　　2.用兩層紗布將所得的漿液過(guò)濾；　　3.將勻漿濾液裝入200ml的離心管10000rpm離心5min；　　4.上清液兩組平分，每組150ml，加硫酸銨固體攪拌均勻后10000rpm離心5min；目的-通過(guò)該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　5.取上清液定容至

5、150ml，加入硫酸銨固體攪拌均勻后10000rpm離心8min，倒掉上清液得粗酶沉淀,用并加入10ml磷酸緩沖液B復(fù)溶沉淀3-5min；　　6.將所得溶液倒入透析袋中，用的KCl溶液透析至無(wú)硫酸銨根離子?！　∥?、結(jié)果和分析：　　實(shí)驗(yàn)所得的初酶液顏色為淺黃色，顏色淺，主要是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中特別是勻漿以前速度較快酚類被氧化的少，從而最大程度的保留了PPO的活性；經(jīng)過(guò)一個(gè)夜晚的透析，得到了澄清的略帶黃色的液體，這樣就為進(jìn)一步的柱層析提供了優(yōu)良材料?！　×?、討論與結(jié)論：　　1.本實(shí)驗(yàn)在勻漿階段應(yīng)盡量快速，防止酚類充分暴露在空氣中被氧化；　　2

6、．實(shí)驗(yàn)材料馬鈴薯在削皮前一定要清洗干凈；　　3.加入硫酸銨固體時(shí)一定要小心緩慢，同時(shí)伴有玻璃般的攪拌，在溶解蛋白的過(guò)程中避免溶液局部鹽離子濃度過(guò)大，使蛋白變性，并注意用量的計(jì)算，第二步加入的時(shí)候起點(diǎn)濃度是40%而不是0，否則會(huì)加入過(guò)量，影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果；　　4.透析時(shí)，提前檢查透析袋是否完整，避免透析時(shí)出現(xiàn)孔洞導(dǎo)致樣品丟失?！　?shí)驗(yàn)2胰酶分離提取及活性誘導(dǎo)目的-通過(guò)該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、

7、順利開(kāi)展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　一、實(shí)驗(yàn)原理：　　胰酶是醫(yī)藥、食品、飼料等工業(yè)上重要的酶制劑，胰酶的分離提取是普通生化實(shí)驗(yàn)的最主要、最經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)。　　提取胰酶的經(jīng)典方法，多采用硫酸銨分級(jí)沉淀，胰酶在75%飽和硫酸銨中沉淀，其它雜蛋白一般在10%硫酸銨飽和度下被沉淀除去。經(jīng)此多次提取，最后在pH硼酸緩沖液中得到結(jié)晶?！　∫让冈趐H時(shí)最為穩(wěn)定，可在低溫下儲(chǔ)存較長(zhǎng)時(shí)間而不失活；低于此pH酶易變性；高于pH時(shí)，酶易自溶而失活。因此提取制備胰酶的全部操作過(guò)程易在低pH和低溫下進(jìn)行。胰酶以無(wú)活性的酶原形式存在于動(dòng)

8、物的胰臟中?！　《?shí)驗(yàn)?zāi)康模骸　”緦?shí)驗(yàn)擬通過(guò)從豬胰臟中制備胰酶結(jié)晶實(shí)驗(yàn)，掌握酶的制備、一般分離、提取、純化和結(jié)晶的操作技術(shù)。同時(shí)為親和層析、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備樣品。　　三、材料與試劑：　　1.儀器：紫外光分光光度計(jì)、恒溫水浴、離心機(jī)、組織搗碎機(jī)、pH