紫外可見吸收光譜法實(shí)驗(yàn)報告

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1、為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃紫外可見吸收光譜法實(shí)驗(yàn)報告　　實(shí)驗(yàn)一：紫外-可見吸收光譜　　一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹　?.熟悉和掌握紫外-可見吸收光譜的使用方法2.用紫外-可見吸收光譜測定某一位置樣品濃度3.定性判斷和分析溶液中所含物質(zhì)種類二、實(shí)驗(yàn)原理　　紫外吸收光譜的波長范圍在200~400，可見光吸收光譜的波長在400~800，兩者都屬于電子能譜，兩者都可以用朗伯比爾定律來描述　　A=εbc　　其中A為吸光度;ε為光被吸收的比例系數(shù)；c為吸光物質(zhì)的濃度,單位mol/L；b為吸收層厚度，單位cm有機(jī)化合物的紫外

2、-可見吸收光譜，是其分子中外層價電子躍遷的結(jié)果，其中包括有形成單鍵的σ電子、有形成雙鍵的π電子、有未成鍵的孤對n電子。外層電子吸收紫外或者可見輻射后，就從基態(tài)向激發(fā)態(tài)躍遷。主要有四種躍遷，所需能量ΔE大小順序?yàn)棣摇?>n→σ*>π→π>n→π*　　1、開機(jī)　　打開紫外-可見分光光度計(jì)開關(guān)→開電腦→軟件→聯(lián)接→M進(jìn)行調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)需要的參數(shù)：波長范圍700-365nm掃描速度高速；采樣間隔：2、甲基紫的測定校準(zhǔn)基線目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場安保新項(xiàng)目的正

3、常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　將空白樣品放到比色槽中，點(diǎn)擊“基線”鍵，進(jìn)行基線校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定分別將5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml、20ug/ml甲基紫溶液移入比色皿，放到比色槽中，點(diǎn)擊“開始”鍵，進(jìn)行掃描，保存測定試樣　　將試樣甲基紫溶液移入比色皿，放到比色槽中，點(diǎn)擊“開始”鍵，進(jìn)行掃描，保存3、甲基紅的測定校準(zhǔn)基線　　將空白樣品放到比色槽中，點(diǎn)擊“基線”鍵，進(jìn)行基線校準(zhǔn)測定試樣　　將試樣甲基紫溶液移入比色皿，放到比色槽中，點(diǎn)擊“開始”鍵，進(jìn)行掃描，保存四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果　　1.未知濃度的測定　　分別測定了5μg/ml，10μg/ml

4、，15μg/ml，20μg/ml和未知濃度的甲基紫溶液的紫外吸收光譜，紫外吸收譜圖如下：　　甲基紫在580nm是達(dá)到最大吸收見下表：　　各濃度在580nm的吸光度　　數(shù)據(jù)做成散點(diǎn)，結(jié)果顯示，能很好的擬合直線如下圖：　　由計(jì)算機(jī)計(jì)算的擬合直線的關(guān)系為A=-　　故帶入未知濃度的甲基紫溶液的吸光度得濃度為μg/ml-1　　2.化合物的定性分析　　已知甲基橙和甲基紫的結(jié)構(gòu)式如下圖所示：目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員

5、的業(yè)務(wù)技能及個人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　甲基橙　　甲基紅　　從圖中可知，甲基紫約在580nm左右達(dá)到吸光度的最大值，而甲基橙溶液在410那么時達(dá)到吸光度最大值，這是由于甲基紫和甲基橙的結(jié)構(gòu)不同造成的，由于甲基紫結(jié)構(gòu)高度共軛，形成大π鍵，故最強(qiáng)吸收峰要的波長要比甲基橙的大，同時由于高度共軛，吸光強(qiáng)度也有所增強(qiáng)?！　∫弧?shí)驗(yàn)?zāi)康摹　?、學(xué)會使用UV-2550型紫外-可見光分光光度計(jì)?！　?、掌握紫外—可見分光光度計(jì)的定量分析方法?！　?、學(xué)會利用紫外可見光譜技術(shù)進(jìn)行有機(jī)化合物特征和定量分析　　的方法。　　二、實(shí)驗(yàn)原理　　基于物質(zhì)對200-800nm光譜區(qū)輻射的吸收特性建立起來的分析測定方法稱

6、為紫外—可見吸收光譜法或紫外—可見分光光度法。紫外—可見吸收光譜是由分子外層電子能級躍遷產(chǎn)生，同時伴隨著分子的振動能級和轉(zhuǎn)動能級的躍遷，因此吸收光譜具有帶寬。紫外—可見吸收光譜的定量分析采用朗伯-比爾定律，被測物質(zhì)的紫外吸收的峰強(qiáng)與其濃度成正比，即：目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解，并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力，可提升其的專業(yè)水平，并確保其在這個行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展，保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展，特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃　　其中A是吸光度，I、I0分別為透過樣品后光的強(qiáng)度和測試光的強(qiáng)度，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為樣品厚度，

7、c為濃度?！　∽贤馕展庾V是由于分子中的電子躍遷產(chǎn)生的。按分子軌道理論，在有機(jī)化合物分子中這種吸收光譜取決于分子中成鍵電子的種類、電子分布情況，根據(jù)其性質(zhì)不同可分為3種電子：形成單鍵的σ電子；　　形成不飽和鍵的π電子；氧、氮、硫、鹵素等雜原子上的未成鍵的n電子?！　D1.基團(tuán)中的σ，π，n成鍵電子　　當(dāng)它們吸收一定能量ΔE后，將躍遷到較高的能級，占據(jù)反鍵軌道。分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)與這種特定的躍遷是有著密切關(guān)系的，使得分子軌道分為成鍵σ軌道、反鍵σ*軌道、成鍵π軌道、反鍵π*軌