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《尿液腦脊液蛋白測(cè)定sop_ucfp臨床意義》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線(xiàn)閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、1檢測(cè)原理在反應(yīng)過(guò)程中,焦酚紅與鑰酸鈉結(jié)合生成在470nni處有最大吸光度的紅色化合物。樣本中的蛋白與此化合物在酸溶液中反應(yīng),生成藍(lán)紫色的化合物,在600nm處吸光度最大。600nm處的吸光度與樣木屮的蛋白濃度成止比。焦酚紅-鉗酸鹽+蛋白PR-MO-Protein復(fù)合物(在600nm處吸收)2標(biāo)本采集與處理2.1采血方法腦脊液,隨即尿或24h未加防腐劑的尿液。2.2標(biāo)本保存標(biāo)本在不加添加劑時(shí)存儲(chǔ)于4°C下,可至少在三天內(nèi)保持穩(wěn)定。2.3注意事項(xiàng)腦脊液標(biāo)本應(yīng)避免溶血。尿液標(biāo)本檢測(cè)前應(yīng)充分混勻。3試劑和設(shè)備3.1試劑采用西門(mén)子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品(上海
2、)有限公司提供的試劑盒。3.1.1試劑組成試劑船1?5孔為溶于甲醇的焦酚紅0.20mM,鉗酸鈉0.35mM,穩(wěn)定劑和表面活性劑,液體;7?8孔為NaOIIO.5N,液體。3.1.2試劑準(zhǔn)備直接使用。3.1.3試劑保存試劑2?8°C保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。3.2質(zhì)控品美國(guó)BIORAD液體多項(xiàng)質(zhì)控殆。3.3校準(zhǔn)品西門(mén)子校準(zhǔn)品。3.4儀器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)。4操作程序4.1檢測(cè)過(guò)程流程簽收樣品?離心一上機(jī)檢測(cè)一審核報(bào)告一簽發(fā)報(bào)告一標(biāo)本保存。4.2樣品簽收嚴(yán)格按照標(biāo)本接收程序簽收標(biāo)本。3.
3、3標(biāo)本處理以2500?3000i7min,離心6-10min,分離血清上機(jī)測(cè)定。如不能及時(shí)檢測(cè),分離血清于2-8£保存。4.4標(biāo)本檢測(cè)3.4.1手工編排測(cè)試項(xiàng)目:樣品按編號(hào)裝入樣品架,主屏幕按FkENTERDATA,在Position處輸入樣品所在樣品架字母及所在位置號(hào),按enter,在PatientName處選擇性輸入病人名字,按enter,在SampleNo處輸入樣品號(hào),按enter,在Tests處使用檢驗(yàn)鍵或檢驗(yàn)組合鍵選擇相應(yīng)項(xiàng)目,根據(jù)需要選擇相應(yīng)的按鍵改變Mode(按F7:MEXTMODE選擇樣品管類(lèi)型)、Priority(按F4:
4、NEXTPRIORITY選擇樣品的處理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLUID選擇標(biāo)本類(lèi)型)。2.4.2雙向條形碼標(biāo)本分離血清后直接運(yùn)行儀器。2.4.3運(yùn)行:輸入完畢后按F3:LOADLIST,確認(rèn)樣品已經(jīng)裝載在樣本盤(pán)上,按Run鍵,儀器開(kāi)始進(jìn)行樣品檢測(cè)。2.4.4檢驗(yàn)后標(biāo)本保存標(biāo)本檢驗(yàn)完成后用采血管原蓋蓋緊,保存于標(biāo)本冷藏庫(kù)內(nèi),按口期放好,保存期為7天。5校準(zhǔn)程序3.1校準(zhǔn)品準(zhǔn)備和儲(chǔ)存直接使用,2?8°C保存。3.2校準(zhǔn)條件在室內(nèi)質(zhì)控失控、更換試劑批號(hào)、更換儀器主要配件或進(jìn)行大保養(yǎng)后均需校準(zhǔn)。無(wú)特殊情況校準(zhǔn)周期為3個(gè)月。3.3校準(zhǔn)程
5、序主屏幕按F5:PROCESSCTRL-F1:CALIBRATION,按enter->F2:SET-UP&RUN,按項(xiàng)目鍵選擇所需要校準(zhǔn)的項(xiàng)目名稱(chēng)METHOD,選中相應(yīng)試劑批號(hào)LOT,輸入操作者姓名0perator>校準(zhǔn)液貨號(hào)CalibratorProduct和批號(hào)Lot,以及最低值校準(zhǔn)液在樣品架上的位置StartatPosition,最后把校準(zhǔn)液各個(gè)水平的值按照由低到高的順序輸?shù)綄?duì)應(yīng)位置,按F4:ASSIGNCUPS指定樣品杯,校準(zhǔn)液按順序排列在樣品架上,按F7:LOAD/RUN-F4:RUN或“RUN”運(yùn)行鍵運(yùn)行校準(zhǔn)程序。6質(zhì)量控制程序
6、2.1質(zhì)控品準(zhǔn)備和儲(chǔ)存質(zhì)控品為液體,可以直接使用。原包裝質(zhì)控品-10?-70°C可保存到瓶身有效期,未開(kāi)啟2?8°C可保存90d,開(kāi)啟后2?8°C可保存30do6.2質(zhì)控水平和分析批長(zhǎng)度每24小至少進(jìn)行一批,每批2個(gè)濃度水平。2.3質(zhì)控操作程序與4.4標(biāo)本檢測(cè)步驟相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY將ROUTINE修改成QC狀態(tài)。7性能參數(shù)木法線(xiàn)性范圍為6~250mg/dL,對(duì)于超過(guò)測(cè)定線(xiàn)性范圍的結(jié)果,用凈化水對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋?zhuān)斎胂♂屢蜃雍笤僦匦聶z測(cè)。8生物參考區(qū)間尿液:<11.9mg/dL<149.1mg/天腦脊液:15~45mg
7、/dL9臨床意義測(cè)定腦脊液總蛋白主要用于檢查血/腦屏障對(duì)血漿蛋白質(zhì)的通透性增加或檢查鞘內(nèi)分泌免疫球蛋白增加。腦脊液總蛋白升高常見(jiàn)于腦組織和腦脊髓膜疾患,如化膿性腦脊髓膜炎、結(jié)核性腦脊髓膜炎、梅毒性屮樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、脊髓灰質(zhì)炎、腦出血等。尿液總蛋白升高常見(jiàn)于腎小球滲透性過(guò)高、腎小管重吸收不全和蛋白分泌異常等疾病,如腎功能衰竭、腎病綜合癥、多發(fā)性骨髓瘤等。10參考文獻(xiàn)11]西門(mén)子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品(上海)有限公司尿液/腦脊液蛋白(UCFP)測(cè)定試劑說(shuō)明書(shū)。[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜?全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版?南京:東南大學(xué)出版社,2006:34
8、2?344。編寫(xiě):審核:批準(zhǔn):