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《論文撰寫模板5、正文》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、黑體二號居中,行間距21磅,段前后間距12、18磅第一章前言1.1發(fā)展生化“下游”技術(shù)的意義“第一?章”與“前言”及“前”與“言'Z間均加兩個空格,根據(jù)人標題字數(shù)多少適當調(diào)整現(xiàn)代生物技術(shù)的迅猛發(fā)展使當今世界發(fā)生了日新月異的變化。迄今為止,人們已經(jīng)能夠設(shè)計、制造、生產(chǎn)多種具有重要價值的蛋白質(zhì),如胰島素(insulin)、白細胞介素(interleukin)、干擾素(in[cron)、促紅細胞生長素(EPO)和腫瘤壞死因子(TNF)等。1.2,基因工程蛋白質(zhì)分離純化的原則加空格正文部分:宋體小四,行間距21磅,段前后間距為0必須考慮到產(chǎn)品的變性和活性恢
2、復等問題。如不同技術(shù)來改進分離工藝?!阏J為,要實現(xiàn)高純度和低成本必須做到以下幾點:生物產(chǎn)品有許多使生物高分子,果選取的條件合適,也可以通過基因工程蛋口質(zhì)分離純化的高效率、①使用溫和、高效的方法;②盡可能地減少操作步驟;③減少化學和生化試劑地使用。Prokopakis等提出了優(yōu)化分離純化步驟的基本規(guī)則,用以指導分離純化操作標題另起一行居右,黑體四號,行距21磅,段前后間距均為12磅的改進。具體規(guī)則如下:①選擇分離操作必須基于產(chǎn)品的物理化學性質(zhì)和生化性質(zhì);②高產(chǎn)量的雜蛋白必須要除去;③最高效率地利用ri標產(chǎn)物與雜質(zhì)間地理化性質(zhì)差異;④盡可能地將高效的
3、步驟放在前而;⑤把操作最困難的步驟放在最后山2]。'/體Timesnewroman?小四,右上角標1.3現(xiàn)有白細胞介素一13的分離純化方法1993年,Mckcnzic首次提出白細胞介素一13(IL-13)的名字,此后,人們逐漸發(fā)現(xiàn)了IL-13的許多生物學活性:刺激前髓樣細胞(TF—1)的增殖,直接誘導原始造血前體細胞(Lin'Sca-l4)的增殖及分化;……第二章實驗材料與方法2.1概述本論文主要從IL-13地分離純化入手,將傳統(tǒng)的細胞破碎和雙水相萃?。ㄟx擇PEG鹽系統(tǒng))用于IL-13的提純。2.2.實驗材料與方法標題另起一行,黑體小四號,行距21
4、磅,段前后間距均為6磅標題前空兩格“221”Z厲加一空格,下同②操作方法按事先計算,取-定量的PEG母液、鹽母液核細胞碎片固體(超聲波破碎,4000r/min離心收集),用NaOH或鹽酸調(diào)節(jié)pH值,加水至要求的濃度;(2-1)用公式編輯器,單倍行距,居中居右第三章實驗結(jié)果與討論3.1GST-IL-13的培養(yǎng)3.2GST-IL-13總含量的測定3.3化學破碎3.3.1pH的影響pH對蛋白質(zhì)禪放的影響見圖3.8。pH的作用主要是影響蛋白質(zhì)的電離平衡,從而影響到其融解性。JM109菌的細胞壁蛋口在微堿性師的融解性較高,同時這又很接近細胞本身的生長環(huán)境,故
5、蛋白質(zhì)不會發(fā)生結(jié)構(gòu)上的改變。從圖小也可以知道,pH以8.0左右為宜。鞍、硫酸鎂、硫酸鈉、磷酸鈉)構(gòu)成的雙水和體系,系統(tǒng)分析了蛋白質(zhì)、GST-IL—13和細胞碎片的分布規(guī)律。表3.4平均相對分了質(zhì)錄對雙水相萃取結(jié)果的比較表編號后空?格五號宋體居中,段前、后間距分別為0磅、6磅相組成ABCD蛋口收率/%64.369.568.741.2GST-1L-13/%5&178.471.51&9成相情況上清、下微濁戛卜?清上清、下濁上下相渾濁上下兩根線粗3/2磅,中間一根1/2磅A.PEG600(26%),硫酸釵(14%);B.PEG1540(25硫酸餒(1爲zC
6、.PEG600(25%),硫酸錢(8%);D.PEG1540(20%),硫酸錢(10%);表后空一行五號或更小字體;說明性文字在表下方,宋體五號第四章結(jié)論與展望4.1結(jié)論⑴通過正交實驗設(shè)計,對化學滲透法破碎JM109菌的齊影響因素進行了實驗研究和顯著性分析,確定了齊影響因素顯著性的大小,并對齊顯著因子進行了單獨實驗,確定處適宜的破碎條件為鹽酸弧7.0mol/L,TritonX-1000.5%,pH為8.0。⑵綜合比較了超聲波細胞……4.2對進一步研究的展望本實驗對基因工程菌JM109屮以包涵體形式存在的外源融合蛋白GST-IL-13進行了細胞破碎(
7、超聲波法、化學滲透法)、包涵體融解、雙水相萃取等方而的實驗研究,確定了最佳的細胞破碎、雙水相萃取的工藝路線和工藝條件,并取得較為滿意的結(jié)果,為下一步的研究工作奠定了良好基礎(chǔ)。進一步的研究工作主要包括:⑴口標產(chǎn)物GST-IL-13的進一步純化。⑵口標產(chǎn)物GST-IL-13的酶切和折疊復性實驗,盡可能地提高酶切效率和蛋口切割后的高級結(jié)構(gòu)的重建。⑶切割后的IL-13的活性檢測,以及影響性的相關(guān)因素研究。通過對GST-IL-13分離純化系統(tǒng)的研究,可為用基因工程菌大量生產(chǎn)基因工程藥物提供一個理論和方法上的借鑒。