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《真武湯對帕金森小鼠模型的治療作用設(shè)計實驗》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、真武湯對帕金森小鼠模型的治療作用設(shè)計實驗班級：中西醫(yī)1001姓名：徐沖學號：102304128真武湯對帕金森小鼠模型的治療作用設(shè)計實驗中西醫(yī)1001徐沖學號：102304128（一）設(shè)計思路：帕金森?。≒arkinson'sdisease,PD）是老年人常見的一種神經(jīng)退行性疾病。該病主要病理特征是中腦黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元變性壞死，其內(nèi)含的酪氨酸徑化酶顯著減少，使的多巴胺生成困難，從而使紋狀體分泌的多巴胺含量下降。臨床以肌強直，震顫和運動功能障礙為主要癥狀?，F(xiàn)在，MPTP（1-甲基4苯基-1,2,3,6-四氫卩比喘）是最重要和使用最廣泛的PD動物模型產(chǎn)生物⑴。它有著其他模型
2、所不具有的一些獨特優(yōu)勢，比如它能特異性地損毀多巴胺神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)，其誘導(dǎo)產(chǎn)生的癥狀與人類PD非常相似。建立帕金森小鼠模型，分成三組：一組為對照組，兩組為帕金森模型組。模型組一組不干涉，另一組注入真武湯。通過行為學實驗，結(jié)果經(jīng)過統(tǒng)計學處理，得出真武湯對帕金森小鼠模型是否有治療作用0（二）目的和原理目的:研究中藥湯劑對帕金森小鼠模型治療作用真武湯治療帕金森理論基礎(chǔ)：“太陽病，發(fā)汗，汗出不解，其人仍發(fā)熱,心下悸，頭眩，身^[run]動，振振欲摭地者，真武湯主之”[2]0其中,“身隅動，振振欲鏘地者”，也就是肌肉跳動與整個身體在振動屮的傾斜度。與帕金森的臨床表現(xiàn):靜止性震顫、運
3、動遲緩、肌強直和姿勢步態(tài)障礙極為相似。（三）實驗對象:C57BL小鼠，雄性，8周齡，體質(zhì)量20?22g,由揚大醫(yī)學院提供。（四）器材與藥品：藥品：1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫毗唳（MPTP）,二丙苯磺胺（Probenecid）,真武湯（茯苓三錢9g芍藥三錢9g白術(shù)二錢6g生姜三錢9g附了炮去皮，一枚，破八片9g。上五味，以水八升，煮取三升，去滓，溫服七合）器材：疲勞轉(zhuǎn)棒儀（Rotarod）注射器（20ml,5ml,1ml）（五）步驟與觀察：1?模型建立：小鼠54只（18只一組），隨機分為對照組與模型組1與模型組2o共進行10次MPTP注射，每次持續(xù)5周，對
4、照組每次在腹腔注射Probenecid（250mg/kg）,30niin后均在皮下注射生理鹽水。模型組1和模型組2每次則先腹腔注射Probenecid（劑量同對照組），30min后皮下注射MPTP,劑量為15mg/kg[3]o且模型組1皮下注射生理鹽水15mg/kg,模型組2皮下注射真武湯15mg/kgo最后一次給藥4周后開始行為學測定對照組模型組1模型組2注射Probenecid是是是30min后注射生理鹽水MPTP、生理鹽水各15mg/kgMPTP、真武湯各15mg/kg2?行為學實驗（Rotarod實驗）：參照lau等⑷的實驗方法，略加修改：最后一次MPTP注射
5、后過一周開始行為學實驗，以不同的轉(zhuǎn)棒旋轉(zhuǎn)速度下小鼠在轉(zhuǎn)棒上停留的時間來表征小鼠的行為學活性。共有9個遞增的旋轉(zhuǎn)速度(8,10,12,14,16,18,20,23,25rpm),每個速度的測量時間為150so以動物在轉(zhuǎn)棒上停留的時間對相應(yīng)的轉(zhuǎn)速作圖。對于每一只動物，其累計的運動活性得分都被計算和表達成曲線下的面積。每一周或者兩周進行一次行為學觀察，持續(xù)6周?。停留時間810121416182325對照組模型組1模型組23.采用SAS統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理，數(shù)據(jù)用均數(shù)土標準差表示，采用團體t檢驗分析(六)結(jié)果猜想：在各組屮，動物在轉(zhuǎn)棒上的行為學表現(xiàn)都是不均一的，但是，對
6、于單個動物來說，其行為學得分卻長達數(shù)周持續(xù)穩(wěn)定。實驗中每個組都使用了比較多的樣本，以減少組內(nèi)差異。在最后一次注射MPTP2周后進行的首次行為學測驗中，對照組與模型組1和2即有顯著差異。,并且這種差異在往后的6周5次測驗中一直保持穩(wěn)定。隨著轉(zhuǎn)速的增加，模型組小鼠在轉(zhuǎn)棒上停留的累積時間與對照組相比更短。但服川真武湯的模型組2比未服用真武湯的模型組1在轉(zhuǎn)棒上停留的累積時間要長。（七）討論：對于帕金森病的治療，有些學者從肝、從風論治；有些從肝腎不足、氣血虧虛的角度來滋補肝腎、補益氣血；也有學者從痰、熱、血瘀的角度。以上治法均取得一定的療效。而真武湯則從水治。此為陽虛水泛，陽虛
7、失于溫養(yǎng)，水氣浸漬四肢經(jīng)脈，故見肌肉顫抖。真武湯方由炮附子、芍藥、茯苓、口術(shù)、生姜組成。方中炮附子溫振少陰陽氣，腎陽復(fù)則下焦氣化啟動，自能蒸騰水邪，使水有所主;白術(shù)苦溫燥濕，健脾制水，使水有所制；茯苓淡滲利水，佐白術(shù)健脾,脾機運轉(zhuǎn)，則水濕下滲；生姜宣散水氣，助附了布陽；芍約活血脈、利小便。五味合用，共奏溫陽利水之功⑹。（八）結(jié)論：真武湯對帕金森小鼠模型有治療作用。參考文獻：1.vonBenlenu,Halbacho.ModelingneurodegenerativediseaseinvivorevivewNeurodegenerDis,2005,2:
