資源描述：
《hplc色譜峰峰型異常問題》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、HPLC色譜峰峰型異常問題高效液相色譜法(HighPerformanceLiquidChromatographyHPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝冇固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域屮重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。?
2、…1.色譜圖中未出峰系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解;泵未輸液或流動(dòng)相使用不正確；檢測(cè)器設(shè)置不正確；針對(duì)以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整即可。2.一個(gè)峰或兒個(gè)峰是負(fù)峰流動(dòng)相吸收本底高;進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣;樣品組分的吸收低于流動(dòng)相。3.所有峰均為負(fù)峰信號(hào)電纜接反或檢測(cè)器輸出極性設(shè)置顛倒;光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡。4.所有峰均為寬峰系統(tǒng)未達(dá)到平衡；溶解樣品的溶劑極性比流動(dòng)相差很多；色譜柱尺寸及類型選擇不正確；色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低；溫度變化造成的影響。5.所出峰比預(yù)想的小樣品黏度過大;進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差;檢測(cè)器設(shè)置不
3、正確?定量環(huán)休積不正確；檢測(cè)池污染；檢測(cè)器燈出現(xiàn)問題。6.出現(xiàn)雙峰或肩峰進(jìn)樣量過大;樣品濃度過高；保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞；保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;柱塌陷或形成短通道。7?前伸峰進(jìn)樣量或樣品濃度高，溶解樣品的溶劑較流動(dòng)相極性強(qiáng);保護(hù)柱或色譜柱污染或失效。①柱溫低：升高柱溫;②樣品溶劑選擇不恰當(dāng)：使用流動(dòng)相作為樣品溶劑;③樣品過載：降低樣品含量;④色譜柱損壞：更換柱子。&拖尾峰柱超載，降低樣品量;增加柱直徑采用較高容量的同定相;峰干擾，對(duì)樣品進(jìn)行清潔過濾;調(diào)整流動(dòng)相;硅輕基作用，加入三乙胺，用堿致鈍化柱
4、增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相pH值;柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效，更換燒結(jié)不銹鋼;加在線過濾器，對(duì)樣品進(jìn)行過濾；死體積或柱外體積過人，將連接點(diǎn)降至最低;盡可能使用內(nèi)徑較細(xì)的連接管;柱效卜?降，更換柱了;采用保護(hù)柱，對(duì)柱了進(jìn)行再生。9.出現(xiàn)平頭峰檢測(cè)器設(shè)置不正確；進(jìn)樣體積太人或樣品濃度太高。10.出現(xiàn)鬼峰進(jìn)樣閥殘余峰，可能為上次樣品的殘余。在每次進(jìn)完樣后用充足的吋間來(lái)平衡和清洗系統(tǒng);樣品中存在未知物，改進(jìn)樣品的預(yù)處理;流動(dòng)相污染，更換新流動(dòng)相，盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用，隔夜的流動(dòng)相再次使用時(shí)要過濾;盡可能使用IIPLC級(jí)
5、試劑;流路屮冇小的氣泡，打開Purge閥，加大流速排除。11.峰分叉①保護(hù)柱或分析柱污染：取卜?保護(hù)柱再進(jìn)行分析，如果必耍更換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞,拆下來(lái)清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染，運(yùn)用適當(dāng)?shù)脑倥４胧Ｈ绻麊栴}仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。②樣品溶劑不溶于流動(dòng)相改變樣品溶劑，如果可能采取流動(dòng)相作為樣品溶劑。12.峰變形樣品過載，減少樣品載量。13.早出的峰變形樣品溶劑選擇不恰當(dāng)①減少進(jìn)樣體積②運(yùn)用低極性樣品溶劑14.早出的峰拖尾程度大于晚出的峰柱外效應(yīng)①調(diào)整
6、系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路）②使用小體積的流通池15.酸性或堿性化合物的峰拖尾緩沖不合適①使用濃度50?100m.l的緩沖液②使用Pka等于流動(dòng)相pH值的緩沖液9.額外的峰(1)樣品中有其他組分：止?，F(xiàn)象；(2)前一次進(jìn)樣的洗脫峰：①增加運(yùn)行時(shí)間或梯度斜率②提高流速；(3)空位或鬼峰：①檢查流動(dòng)相是否純凈②使用流動(dòng)相作為樣品溶劑③減少進(jìn)樣體積a
