卡托普利抑制大鼠脈絡(luò)膜新生血管實驗的研究

卡托普利抑制大鼠脈絡(luò)膜新生血管實驗的研究

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1、重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文卡托普利抑制大鼠脈絡(luò)膜新生血管的實驗研究姓名:周佳麗申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):眼科學(xué)指導(dǎo)教師:周希瑗20070501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文英文縮寫英文名稱ACEACEI符號說明中文名稱An#otensinconvertingentayme血管緊張素轉(zhuǎn)化酶Angiotensinconverting%myme血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑inhibitorAge-relateclmaculardegeneration年齡相關(guān)性黃斑變性Choroidalneovascularizati

2、onEndothelin-1脈絡(luò)膜新生血管內(nèi)皮素一l熒光素血管造影Hemotoxylinandeosin蘇木素,伊紅染色Matrixmetalloproteinases基質(zhì)金屬蛋白酶Oxygen-inducedretinopamy高氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變光動力療法Retinalpigmentepithelium視網(wǎng)膜色素上皮E嘰伊Ti$sucinhibitorsofmatrixTTTVE(訊metalloproteinasesTranspupiUcrythermotherapyVescularendteli

3、algrowthfactor鏈霉菌抗生物素蛋白一過氧化物酶連接法基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑經(jīng)瞳孔透熱療法血管內(nèi)皮生長因子伽刪叭吼

4、i}~咂唧

5、

6、;e暑重慶醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果.據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得重慶醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料,與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意.申請學(xué)位論文與

7、資料若有不實之處,本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。學(xué)位論文作者簽名:2虱』垂豳日期:塑2:±蘭f學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解重慶醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定,即:研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬重慶醫(yī)科大學(xué).本人保證畢業(yè)高校后,發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為重慶醫(yī)科大學(xué).學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱.學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外),可以采用影印、縮印或其他手段保存論文.‘論文作者簽名:!亟!查塑指導(dǎo)教師簽名:日期

8、:!Z:生三f重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文卡托普利抑制脈絡(luò)膜新生血管的實驗研究摘要目的:探討應(yīng)用氬綠激光誘導(dǎo)建立Long-Evants大鼠脈絡(luò)膜新生血管(CNV)動物模型的可行性,觀察MMP.2和VEGF在大鼠視網(wǎng)膜上的表達(dá)情況,探討卡托普利對脈絡(luò)膜新生血管(心Ⅳ)的影響及其作用機(jī)制。方法:選取健康成年Long-Evants大鼠,用氬綠激光光凝大鼠視網(wǎng)膜誘導(dǎo)實驗性脈絡(luò)膜新生血管動物模型。于光凝后3天,5天,7天,14天,21天,28天行眼底FFA+眼底拼圖照相后用4%多聚甲醛全身灌流固定,取出眼球制

9、作標(biāo)本切片,將部分切片進(jìn)行蘇木素,伊紅(臟)染色光鏡下觀察脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)變化,觀察CNV形成情況,判定該動物模型是否成功可靠;部分切片進(jìn)行免疫熒光及免疫組化實驗使用,以觀察MMP-2及VEGF的表達(dá)規(guī)律。造模成功后,將第二批健康成年大鼠隨機(jī)分為空白組(A組)和實驗組,后者又分為脈絡(luò)膜新生血管對照組(B組),卡托普利灌喂組(C組),生理鹽水灌喂組(D組)。實驗組大鼠于光凝后3天,5天,7天,14天,21天,28天行眼底FFA+眼底拼圖照相后用4%多聚甲醛全身灌流固定,取出眼球制作標(biāo)本切片。將各組切

10、片進(jìn)行蘇木素/伊紅(HE)染色光鏡下觀察脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)變化,免疫熒光方法檢測RPE層MMP-2表達(dá)的變化,免疫組織化學(xué)方法檢測視網(wǎng)膜組織中VEGF表達(dá)的變化。2重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文結(jié)果:1.造模結(jié)果:1.1眼底FFA+拼圖照相觀察:光凝后3天光凝斑部位視網(wǎng)膜水腫,表現(xiàn)為熒光著色,光凝后7天,光凝斑處開始出現(xiàn)熒光素滲漏,提示CNV出現(xiàn),第21天達(dá)到高峰。1.2HE染色光鏡下觀察:大鼠光凝后3天脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜出現(xiàn)水腫,細(xì)胞排列紊亂等變化。光凝后7天,可見大量成纖維細(xì)胞和少量CNV形成,隨著病

11、程延長病變加重。CNV形成21天達(dá)高峰。2.MMP-2及VEGF的表達(dá)規(guī)律:2.1免疫熒光檢測MMP.2:于光凝后3天在光凝處的RPE層檢測到MM口一2熒光著色的陽性表達(dá),光凝后5天其表達(dá)達(dá)高峰然后逐漸減少。MMP.2在未被激光損傷的視網(wǎng)膜組織不表達(dá)或有很弱表達(dá)。2.2免疫組織化學(xué)檢測VEGF:于光凝后14天,VEGF蛋白在視網(wǎng)膜上有較明顯的陽性表達(dá),隨著病程延長其表達(dá)增強(qiáng),于第21天達(dá)高峰。VEGF在未被激光損傷的視網(wǎng)膜組織只有很弱表達(dá)。3.卡托普利干

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