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《NYT551-2002-產(chǎn)蛋下降綜合征診斷技術(shù).pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、ICS11.220s41中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T551一2002產(chǎn)蛋下降綜合征診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforeggdropsyndrome2002一08一27發(fā)布2002一12一01實施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布NY/T551-2002前言產(chǎn)蛋下降綜合征(eggdropsyndrome，簡稱EDS)是一種使母雞產(chǎn)蛋減少、蛋質(zhì)下降，由腺病毒引起的病毒性傳染病，已成為產(chǎn)蛋損失的主要原因。我國農(nóng)業(yè)部把該病列為二類動物疫病。本標(biāo)準(zhǔn)包括臨床診斷、病毒分離和紅細胞凝集抑制試驗三種診斷技術(shù)。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物檢
2、疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:天津出人境檢驗檢疫局、哈爾濱獸醫(yī)研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:曹燮政、唐秀英、柯忠哲、米保國、韓惠珠。NY/T551-2002產(chǎn)蛋下降綜合征診斷技術(shù)1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了產(chǎn)蛋下降綜合征的診斷技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于雞的產(chǎn)蛋下降綜合征的診斷和檢疫，對其他禽類本病的檢疫可以參照執(zhí)行。2臨床診斷2.1通過詢問工作人員和查閱獸醫(yī)記錄，調(diào)查被檢雞群在過去一年內(nèi)是否出現(xiàn)過產(chǎn)蛋下降綜合征的癥狀，是否有產(chǎn)蛋下降綜合征病例接觸史，是否進行過相關(guān)的免疫接種，了解雞群的來源及上代種群的疫病史，周圍1km范圍內(nèi)是否發(fā)生過產(chǎn)蛋下降綜合征，是否有水禽場或野生水禽棲息地。2.2臨床檢
3、查時要查閱雞群生產(chǎn)記錄和進行現(xiàn)場觀察，重點注意下列情況:a)雞群產(chǎn)蛋率下降1500^'6000;b)雞蛋破損率5%^-20%;c)雞蛋中有較多的畸形蛋、軟殼蛋、無殼蛋、薄殼蛋、砂殼蛋，時有水樣蛋清，棕色蛋雞生產(chǎn)淺色蛋、白殼蛋;d)如不同品種雞同時感染，產(chǎn)棕色蛋的品種減產(chǎn)甚于產(chǎn)白色蛋的品種;e)精神、采食、排泄及運動無明顯異常。3實驗室檢驗3.1病毒分離和鑒定3.1.1試荊11.1.1pH7.20.01mol/L磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)，配制方法見附錄A(規(guī)范性附錄)。3.1.1.2產(chǎn)蛋下降綜合征抗原(EDS_76)o3.1.1.3EDS__陽性血清。3.1.2樣品的采集和處理酌情
4、選擇下列一種或數(shù)種:a)采撲殺雞的輸卵管和子宮的翻膜、卵巢，加滅菌石英砂研磨，加PBS制成1，5混懸液后凍融3次，3000r/min離心20min，取上清液，加人青霉素(使最終濃度為1000IU/mL),鏈霉素(使最終濃度為1000pg/mL),37℃作用1heb)采減產(chǎn)雞的咽喉部、泄殖腔拭子，浸人5mLPBS中充分測擠后棄去拭子。將浸出液凍融2次，3000r/min離心20min，取上清液加人青霉素(使最終濃度為3000IU/mL),鏈霉素(使最終濃度為3000fag/mI,),37℃作用1h,c)采劣質(zhì)蛋清，加等量PBS和青霉素〔使最終濃度為1000IU/mL),鏈霉素(使最終濃
5、度為1000pg/mL),37℃作用1h,d)采減產(chǎn)雞抗凝血20ml,,2000r/min離心10min，棄上清液，吸取上層灰白色的白細胞層，加PBS洗滌、離心2次，棄上清液，再用5ml,PBS懸浮白細胞，凍融3次，加青霉素(使最終濃度為1000IU/mL),鏈霉素(使最終濃度為1000pg/mL),37℃作用1h,離心，取上清液。3.1.3接種分離取孵育10d-12d來自產(chǎn)蛋下降綜合征紅細胞凝集抑制抗體陰性鴨場鴨胚50枚，絨毛尿囊腔接種NY/'r551-2002樣品(3.1.2)25枚，另25枚接種PBS，接種量均為。.2mL/枚。37'C孵育。棄48h內(nèi)死亡的鴨胚，收獲48h--
6、120h死亡和存活的鴨胚尿囊液。用1%雞紅細胞懸液(見3.2.2.4)測其血凝性(方法同3.2-4),若接種樣品的鴨胚尿囊液能凝集紅細胞，而接種PBS的鴨胚尿囊液不凝集紅細胞，則進行分離物鑒定(見3.1.4);若樣品接種鴨胚尿囊液不凝集紅細胞，則用尿囊液接種鴨胚盲傳，樣品連續(xù)盲傳三代仍不凝集紅細胞者可判為病毒分離陰性。3.1.4分離物的鑒定用陽性血清和被鑒定抗原按表1進行紅細胞凝集抑制試驗，方法同3.2.5(陽性血清被鑒定抗原抑制滴度應(yīng)與EDS-76對照抗原滴度相一致)。表中示例結(jié)果表示EDS_、病毒分離試驗陽性。衰1應(yīng)用紅細胞凝集抑制試臉鑒定分離物血清抗原分離毒株陽性血清EDS抗原
7、陽性血清分離毒株++EDS-76抗原++注:必要時進行新城疫、傳染性囊病、高致性禽流感的鑒別診斷。3.2紅細胞凝集抑制試驗3.2.1器材3.2.1.1微量反應(yīng)板:96孔，v形底，同一次試驗使用的反應(yīng)板孔底角度應(yīng)相同。3.2.1.2塑料采血管:內(nèi)徑2mm.長10cm,3.2.2試劑3-2.2-，抗原。3.2-2.2標(biāo)準(zhǔn)陽性血清。3.2-2.3阿氏液(Alsever)，配制方法見附錄A(規(guī)范性附錄)。3.2-2.41%雞紅細胞懸液:采不少于3只健康成年雞血液，
