人組織激肽釋放酶基因及其蛋白在胃癌組織中的表達(dá)的意義

人組織激肽釋放酶基因及其蛋白在胃癌組織中的表達(dá)的意義

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1、』,‘嬲嬲幽~一{上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2007級博士研究生學(xué)位論文人組織激肽釋放酶基因及其蛋白在胃癌組織中表達(dá)的意義CLINICALSIGNIFICANCEoFHUMANKAI.LIKREINGENEANDITSPRoTEINSEXPRESSIONINPATIENTSWITHGASTRICCANCER研究生姓名:沈志勇研究生學(xué)號:0077219140指導(dǎo)教師:曹暉教授學(xué)科、專業(yè):外科學(xué)(普通外科)研究方向:胃腸外科、胃癌基礎(chǔ)、I臨床研究申請學(xué)位:外科學(xué)博士學(xué)位(醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)位)論文提交日期:2010年3月關(guān)鍵詞:

2、人組織激肽釋放酶基因,胃癌細(xì)胞株,小RNA干擾細(xì)胞生長,粘附及侵襲能力2上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:日期:年月日本學(xué)位論文同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交

3、通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口,在一年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。(請?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“4”)學(xué)位論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:日期:年月日日期:年月日4上海交通大學(xué)學(xué)位論文答辯決議書研究生姓名沈志勇學(xué)號∞77219140導(dǎo)師姓名曹暉論文題目人組織激肽釋放酶基因及其蛋白在胃癌組織中表達(dá)的意義學(xué)科(專業(yè))外科學(xué)(黼㈣l囂惑I仁徽妻k答辯委員會(huì)成員姓名工作單位職稱,簽名/,、秦新裕復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院教授琶承

4、∥樊嘉復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院教授摯幾全志偉上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院教授緄。沈鋒第二軍醫(yī)大學(xué)附屬東方肝膽醫(yī)院教授’嬲韓天權(quán)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院教授覿?在I,’評語和決議:該研究通過檢測人組織激肽釋放酶基因(KLKs)成員KLKII、KLKl2基因及蛋白在胃癌腫瘤組織、癌旁組織、正常組織和外周血清中的表達(dá)和含量,并通過siRNA技術(shù)沉默KLKl2基因抑制胃癌細(xì)胞增殖和浸潤轉(zhuǎn)移能力,探討KLKII、KLKl2基因及其蛋白表達(dá)水平與胃癌的發(fā)生、發(fā)展的臨床意義。結(jié)果顯示:胃癌患者外周血KLKl2的含量升高

5、,胃癌患者腫瘤組織中KLKl2mRNA及相應(yīng)蛋白表達(dá)顯著升高,siRNA基因干擾可抑制胃癌細(xì)胞株KLKl2mRNA及其蛋白的表達(dá),抑制胃癌細(xì)胞株生長、粘附侵襲分子表達(dá)和粘附侵襲能力,對探索胃癌治療新方法具有重要的指導(dǎo)意義。該課題選題能夠結(jié)合臨床實(shí)際,具有一定的創(chuàng)新性。研究設(shè)計(jì)科學(xué)、目的明確、研究方法正確可靠、實(shí)驗(yàn)結(jié)果真實(shí)可信,論文寫作邏輯性較強(qiáng)、層次分明、文筆較流暢、結(jié)論可靠。該課題的研究結(jié)果對于胃癌的基礎(chǔ)研究和臨床工作有一定的指導(dǎo)意義。該生論文匯報(bào)流暢,答辯思路清晰,回答切題,從論文寫作與答辯反映出該生具有

6、較扎實(shí)的基礎(chǔ)理論知識(shí)和專業(yè)知識(shí),有一定的科研工作能力。經(jīng)答辯委員會(huì)討論,一致通過論文答辯,建議授予博士學(xué)位。毒虹產(chǎn),答辯委員會(huì)主席(簽名)珈,·年V月/弓日上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2007級博士學(xué)位論文人組織激肽釋放酶基因及其蛋白在胃癌組織中表達(dá)的意義摘要目的:研究并檢測人組織激肽釋放酶基因(humankallikreins.m江Ks)家族成員KLKll、KLKl2基因及其蛋白在胃癌患者腫瘤組織、癌旁組織、正常組織和外周血清中的含量和表達(dá)水平,在此基礎(chǔ)上通過siRNA技術(shù)沉默KLKl2基因從而抑制胃癌細(xì)胞增殖和浸潤

7、轉(zhuǎn)移能力,探討KLKl1、KLKl2基因及其蛋白表達(dá)水平與胃癌的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后關(guān)系的臨床意義,以期為胃癌的早期診斷、篩選、治療及術(shù)后預(yù)后評估尋找~種實(shí)用、可靠的新方法。方法:(1)收集上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院普外科2008年7月--2009年6月間50例接受胃癌根治術(shù)患者作為胃癌組,所有病例術(shù)前均未進(jìn)行過放療或化療等新輔助治療,且術(shù)后均經(jīng)病理學(xué)檢查得以證實(shí)。另收集同期50例接受非胃癌手術(shù)患者作為對照組。通過ELISA和免疫組化技術(shù)檢測胃癌患者外周血清中及組織內(nèi)KLKll、KLKl2的濃度和表達(dá)水平。(

8、2)收集50例行胃癌根治術(shù)患者術(shù)中的新鮮大體標(biāo)本,分別切取胃癌腫瘤組織、腫瘤旁3cm處組織和腫瘤旁>5cm以上的正常胃壁組織,應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR(quantitativerealtimePCR,qRT-PCR)和Westernblot技術(shù)分別檢測KLKl1和KLKl2mRNA及其蛋白的表達(dá)水平。(3)通過qRT-PCR上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2007級博士學(xué)位論文和Westernblot技術(shù)檢測不同病理分

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