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《膠質(zhì)瘤干細胞的培養(yǎng)和分化研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)四川大學學報(醫(yī)S學ci版)2006；37(1)JSiehuanUniv(MedScEdi)：14l一144_?，一?-●膠質(zhì)瘤干細胞的培養(yǎng)和分化研究*楊立業(yè)1，汪朝陽1，鄭佳坤1，溫建成2，李文玉1，黃曉平21．廣東省潮州市中心醫(yī)院神經(jīng)外科(潮州521021)；2．廣東省潮州市中心醫(yī)院病理科【摘要】目的探討人類膠質(zhì)瘤干細胞的體外培養(yǎng)、傳代和分化。方法采用機械方法從膠質(zhì)瘤組織中分離細胞，應用N2培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，堿性成纖維細胞生長因子和表皮生長因子刺激細胞擴增；應用免疫組織化學染色對培養(yǎng)的細胞及
2、其分化的細胞進行鑒定。結(jié)果從膠質(zhì)瘤組織當中成功培養(yǎng)出人類的膠質(zhì)瘤干細胞，培養(yǎng)條件下呈懸浮狀態(tài)生長，形成神經(jīng)球，絕大多數(shù)的細胞表達波形蛋白和巢蛋白兩種神經(jīng)干細胞的標志物；這種細胞可分化為神經(jīng)元和星型膠質(zhì)細胞。結(jié)論體外的培養(yǎng)條件下，可從膠質(zhì)瘤組織中培養(yǎng)出于細胞，能夠分化為神經(jīng)元和星型膠質(zhì)細胞，為膠質(zhì)瘤的深入研究奠定基礎(chǔ)?！娟P(guān)鍵詞】干細胞膠質(zhì)瘤細胞培養(yǎng)【中圈分類號】R35，R74Long-termCultureandDifferentiationofHumanGliomaStemCellsYANGLi-ye
3、，WANGChao—yang，ZHENGJia-kun，WENJian-cheng，LIWen-yu，HUANGXiao-ping．DepartmentofNeurosurgery，ChaozhouCentralHospital，Chaozhou521021，China[Abstract]ObjectiveToexplorethecultureandsubcultureconditionsforgliomastemcells(GSCs)andtoinvestigatethedifferentiatio
4、npotentialofGSCs．MethodsThecellsfromhumangliomaweremechanicallydissociated．CellswereculturedinN2orB27mediumwithbasicfibroblastgrowthfactor(bFGF)andepidermalgrowthfactor(EGF)，andtheywereidentifiedbyimmunocytochemistry．ResultsGliomastemcellsfromhumangliom
5、ahavebeensuccessfullycultured．Theyformedtypicalneurospheresinsuspension，andtheycouldbeculturedandpassagedsteadilyinvitro．Themajoritiesofthecellsexpressedvimentinandnestin，whichwerethemarkersforneuralstemcells．Theycoulddifferentiateintoneuronsandastrocyt
6、es，andexpressglialfibrillaryacidicproteinandbetailjtubulinrespectively．ConclusionHumangliomastemceilscouldbeculturedfromgliomasinvitro，andtheycoulddifferentiateintoneuronsandastrocytes，thusprovidingabasisforfurtherstudies．[Keywords]StemcellGliomaCellcul
7、ture膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)最常見的腫瘤，病因不清，切除后容易復發(fā)，放射治療和化療效果不理想。近年來從成年動物的腦組織中可以培養(yǎng)出神經(jīng)于細胞[1]，越來越多的事實支持膠質(zhì)瘤起源于中樞神經(jīng)內(nèi)存在的內(nèi)生性集落細胞，這種細胞可能就是神經(jīng)干細胞，但尚未找到直接證據(jù)。神經(jīng)干細胞、正常膠質(zhì)細胞和膠質(zhì)瘸細胞三者之間是否可以轉(zhuǎn)化，以及如何轉(zhuǎn)化的機制，這方面的研究對膠質(zhì)瘤發(fā)病機制的闡明和治療都有明確的理論和實際意義。我們從人類的膠質(zhì)瘤組織中培養(yǎng)出類似神經(jīng)干細胞的前體細胞，并能夠分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細胞。現(xiàn)報道如下。1材料和方
8、法1．1材料B27和N2添加劑、DMEM／F12培養(yǎng)基*廣東省自然科學基金(編號012452，020001，04007929)資助(Gibco／BRL)；堿性成纖維細胞生長因子(basicfibroblastgrowthfactor，bFGF)、表皮生長因子(epidermalgrowthfactor，EGF)和多聚賴氨酸均為Sigma公司產(chǎn)品；抗波形蛋白單克隆抗體(Dako，1：100)、抗神經(jīng)微絲200(NF200)單克隆抗體(Dako，1：100)
