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《silkrgd羥基磷灰石復(fù)合材料的制備及其性能表征》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要目前，基因重組技術(shù)被用來合成具有特定組成以增強(qiáng)或賦予其新型功能的蛋白質(zhì)材料方面，取得了較大的進(jìn)展。本論文利用基因工程方法將含短肽RGD的氨基酸序列連接到桑蠶絲素蛋白中，設(shè)計(jì)并合成了具有[TS(GAGAGS)5GAGYTGRGDsPAGYGAGVGASl玎一級結(jié)構(gòu)的重組桑蠶絲素．RGD融合蛋白(簡稱silk．RGD)，并利用Escherichiacoli轉(zhuǎn)基因系統(tǒng)將其合成并表達(dá)出來，以期獲得具有優(yōu)異機(jī)械性能和熱穩(wěn)定性以及良好生物相容性的蛋白材料；探索了重組蛋8／羥基磷灰石(silk．RGD／HA)復(fù)合材料的制備方法，研究了重
2、組蛋白在復(fù)合材料中的結(jié)構(gòu)特性及其對羥基磷灰石性能的影響；最后對制備的復(fù)合材料進(jìn)行生物相容性檢測。論文主要分以下四個部分闡述：(1)簡要介紹了桑蠶絲素蛋白和重組蛋白相關(guān)研究及其在生物醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用，并闡述了本研究的立題依據(jù)和研究目的。(2)利用基因工程方法設(shè)計(jì)并合成了包含RGD三肽及Bombyxmori蠶絲蛋白典型肽段的新的重組蛋白silk．RGD，并利用SDS．PAGE、掃描電鏡、紅外光譜、質(zhì)譜及熱重分析儀等對所得產(chǎn)物進(jìn)行了分析表征。結(jié)果表明：重組silk．RGD蛋白被成功合成，并具有與天然絲素蛋白相類似的結(jié)晶特性及相比擬的熱穩(wěn)定性。(3)采用共沉淀法
3、合成了重組蛋白silk—RGD和羥基磷灰石的復(fù)合物，利用XRD，F(xiàn)TIR，TGA，TEM等測試手段研究了復(fù)合材料中重組蛋白silk．RGD本身的結(jié)構(gòu)特性及其對HA晶體的尺寸、形貌及結(jié)晶度等的影響。結(jié)果表明：所得復(fù)合物從尺寸(10～20x40～70nm)，形貌，組成(如含有C032-等)，結(jié)晶度(較低)等方面與天然骨HA接近或類似【人體骨HA尺寸(5～20nmx60姍)】：由于HA的引入，silk．RGD的分子取向或結(jié)晶程度及熱穩(wěn)定性被顯著提高，而HA卻因silk．RGD的引入其結(jié)晶度，沿c軸方向的晶格尺寸及a軸方向的生長被降低或抑制，前者可使得材料具
4、有良好的熱穩(wěn)定性，機(jī)械性能，后者可使材料更易被降解吸收。(4)最后研究了silk．RGD／HA復(fù)合材料對細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。結(jié)果表明：與天然絲素／HA材料相比，silk．RGD／HA復(fù)合材料具有更好的細(xì)胞黏附性和促細(xì)胞增殖的能力。本實(shí)驗(yàn)制備的silk-RGD／HA復(fù)合材料充分體現(xiàn)了RGD的促進(jìn)細(xì)胞黏附功能，絲素蛋白結(jié)晶序列GAGAGS高熱穩(wěn)定性以及HA本身的生物相容性，充分表明了我們的設(shè)計(jì)初衷被成功實(shí)現(xiàn)。這種具有滿意結(jié)構(gòu)，形狀以及良好生物相容性的復(fù)合材料，有望在生物醫(yī)用材料領(lǐng)域得到應(yīng)用。關(guān)鍵詞：重組silk．RGD蛋白；羥基磷灰石；共沉淀法浙江理-
5、J：人學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractGeneticrecombinationtechniquehasbeenusedtosynthesizeproteinswithspecialstructurepossessingimprovedpropertiesornewfunction．Inthisdissertation，anovelhybridproteinsilk—RGD，whichcombinedtheRGDtripeptideandprimaryaminoacidsequencederivedfromnativeBombyxmorisilkfibr
6、oinWasdesignedandsynthesizedbyusingtheEscherichiacolitransgenicexpressionsystem．Furthermore，themineralizationofhydroxyapatite(HA)intheprecenceofsilk—RGDwasinvestigatedindetail．Therolesofsilk-RGDplayedintheformationofHAcrystalandtheeffectofsilk—RGD／HAcompositesonbiologicalbehavi
7、orofcellshadbeendetected．Thisarticlewasclarifiedbyfourfragments：(1)Theresearchandapplicationofsilkproteinandrecombinantproteininbiomedicalfieldwerereviewedandthebackgroundandcontentsofourtopicwereelucidated．(2)Silk-RGDWassynthesizedandsubsequentlycharacterizedbyusingSDS—PAGE，fo
8、uriertransforminfraredspectroscopy(FTIR)，MSandthermogr
