絲膠蛋白羥基磷灰石復(fù)合材料的制備及生物相容性研究

絲膠蛋白羥基磷灰石復(fù)合材料的制備及生物相容性研究

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1、浙江理T大學(xué)碩+學(xué)位論文摘要生物礦化指的是生物體嚴(yán)格控制下形成無機(jī)礦物質(zhì)的過程。仿生合成有機(jī)/無機(jī)復(fù)合材料不僅能幫助理解生物礦化機(jī)理,同時(shí)也能為制備生物礦化材料提供新思路,因此受到廣泛關(guān)注。本研究在不同濃度的絲膠溶液中,利用化學(xué)沉淀法仿生合成絲膠/羥基磷灰石復(fù)合材料。用X射線粉末衍射儀(Ⅺm)、傅立葉變換紅外光譜儀(FTIR)、透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM)、原子力顯微鏡(AFM)等分析了復(fù)合材料的晶相組成、化學(xué)結(jié)構(gòu)和微觀形貌。最后,通過體外細(xì)胞培養(yǎng)評價(jià)了復(fù)合材料的生物相容性。結(jié)果表明,以絲膠蛋白為有機(jī)基質(zhì)調(diào)控生成了類牙釉狀羥基磷灰石,并對其

2、生長機(jī)理進(jìn)行研究。TEM、SEM和AFM結(jié)果顯示晶體是由直徑大約10.20nm的納米微晶聚集而成,當(dāng)濃度較小為0.001%(w/v)時(shí),納米微晶聚集成長約70—100nm,寬約10.20nm的類牙釉狀;當(dāng)絲膠濃度到達(dá)1%(w/v)時(shí),晶體尺寸長度超過200nm,寬度也達(dá)到了60—80nm;說明隨著濃度的逐漸增大,晶體尺寸也隨之增加。研究還發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)初始階段,絲膠蛋白在攪拌作用下,自組裝成親水端向外的納米小球,堿性環(huán)境使得小球帶負(fù)電,能與羥基磷灰石微晶的晶面發(fā)生靜電作用,從而阻斷了在這些晶面發(fā)生的晶體一晶體間的融合,最后形成了類牙釉狀的SS/HA復(fù)合顆粒。本研究將

3、不同濃度絲膠溶液調(diào)控所得SS/HA復(fù)合粉末和作為對照的純羥基磷灰石粉末與MG.63細(xì)胞體外共同培養(yǎng),研究復(fù)合材料的生物學(xué)性能。通過形態(tài)學(xué)觀察,熒光染色觀察以及MTT檢測,與純羥基磷灰石相比,絲膠與羥基磷灰石的復(fù)合材料更能促進(jìn)MG.63細(xì)胞的增殖、生長,具有更好的生物活性,檢測MG一63細(xì)胞的堿性磷酸酶(ALP)活性以及細(xì)胞上清液中骨鈣素(Oc)含量,結(jié)果表明絲膠與羥基磷灰石復(fù)合材料更能促進(jìn)細(xì)胞ALP活性的表達(dá)和誘導(dǎo)細(xì)胞分泌OC,使得MG.63細(xì)胞的成骨能力能到增強(qiáng),是一種理想的復(fù)合生物材料。上述結(jié)果表明,本研究以絲膠為有機(jī)基質(zhì)調(diào)控羥基磷灰石的結(jié)晶生長,制得類牙釉

4、狀羥基磷灰石具有良好的生物相容性和生物活性。研究其生長機(jī)理,希望能為闡明蛋白質(zhì)的生物礦化過程及其調(diào)控機(jī)理提供了理論依據(jù),也可以為制備理想的復(fù)合生物材料提供新的思路。關(guān)鍵詞:羥基磷灰石絲膠蛋白生物礦化生物相容性浙江理J:入學(xué)碩+學(xué)位論文AbstractBiomineralizationisthesophisticatedprocessofproductionofinorganicmineralsbylivingorganisms.Constructionoforganic—inorganichybridmaterials、析也controlledmineraliz

5、ationanalogoustothoseproducedbynaturehasrecentlyreceivedmuchattentionbecauseitCanaidinunderstandingthemechanismsofthebiomineralizationprocessanddevelopmentofbiomimeticmaterialsprocessing.Silksericin(ss)/hydroxyapatite(HA)compositeswerepreparedbyCO-precipitationmethodintheSSsolution誦t

6、hthedifferentSSconcentrationsfrom0.001“,/v)%to1(w/V)%.Themorphologies,components,physicalandchemicalpropertiesofthecompositescaffoldswereinvestigatedbyTEM,SEM,AFM,XRD,F(xiàn)TIR,etc.Theresultsshowedt11atatalowconcentrationofSS,i.e.,0.001(w/v)%,thecomposite州tllthesizeof70—100nlninlengthandl

7、0—20nnlinwidthWaspresentasassociationofnanoparticles.However,thesize,especiallythelengthofcompositesincreasedgraduallywiththeincreaseofSSconcentration.WhentheSSconcentrationWas1(w/v)%,theobtainedcompositeswereexhibitedasthewhiskermorphologywithasignificantlyincreasedlengthofmorethan2

8、00nnland60.8

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