研究生論文:樟科和忍冬科的dna條形碼篩選研究

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1、湖北中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文樟科和忍冬科的DNA條形碼篩選研究姓名:劉震申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):中藥學(xué)指導(dǎo)教師:陳科力20100527中文摘要目的:通過對(duì)四條不同的DNA片段(psbA-trnH,171a必rbcL,和ITS2)進(jìn)行篩選,尋找適合樟科和忍冬科植物鑒定的DNA條形碼序列。方法:使用psbA-trnH,rbcL、1"11atl(和核ITS2的通用引物對(duì)樟科和忍冬科植物進(jìn)行PCR擴(kuò)增和測序,比較各序列擴(kuò)增和測序效率、種內(nèi)和種間變異,進(jìn)行barcodinggap分析,采用BLASTl和NearestDiStance方法評(píng)價(jià)不同序列的鑒定能力。結(jié)果:所采集試驗(yàn)樣本及拓展分析

2、數(shù)據(jù)相結(jié)合,使用BLASTl的方法對(duì)樟科植物35個(gè)屬,117物種,175樣本的研究發(fā)現(xiàn),psbA-trnH序列在樟科植物中的鑒定成功率在種水平上為84.0%,屬水平上為92.3%。而在忍冬科13個(gè)屬32個(gè)物種54個(gè)樣本中,ITS2的鑒定成功率最高,物種水平上為96.3%,屬水平為100%。結(jié)論:葉綠體間隔區(qū)psbA-trnH序列可以作為樟科植物的DNA條形碼候選序列,而ITS2序列可以作為忍冬科DNA條形碼的候選序列,同時(shí)我們推薦psbA-trnH序列作為忍冬科植物DNA條形碼鑒定的補(bǔ)充序列。關(guān)鍵詞:DNA條形碼;樟科;忍冬科;psbA-trnI毛,m8瑙rbcL;ITS2Ap

3、pIicationofDNAbarcodinginthePIantsofLauraceaeandCaprifoIiaceaeramiIYSpeciaIity:ScienceofChinesemateriamedicaAuthor:ZhenLiuTutor:Ke-IithenAbstractObjective:ThiSStudyaimstodeterminethecandidatesequencesthatcanbeusedasDNAbarcodeinLauraceaeandCaprifoliaceaefamily.Methods:PCRamplification,sequenc

4、ingefficiency,differentialintra—andinter—specificdivergences,DNAbarcodinggap,andidentificationefficiencywereusedtoevaluatethefourdifferentDNAsequencesofpsbA—trnH,matK。fbcLandITS2.Results:①Thedisetiminationabi1ityofpsbA—trnHin175plantsamplesbelongingto117speciesfrom35diStinctgeneraofLauraceae

5、wastested.ItwasfoundthattherateofsuccessfulidentificationwithpsbA-trnllwere84.0%and92.3%atthespeciesandgenuslevel,respectively.②WetestedITS2regionforitssuitabi1ityasDNAbarcodesofCaprifoliaceaefamilyacross54samplesbelongingto32speciesfrom13genera.TheITS2whoserateofsuccessinidentificationingen

6、eraleveliS100%andinspeciesiS96.3%.Conelusion:Bycomparing/Yat&rbcLandITS2,itwasfoundthatthepsbA—。trnHregioniSthebestmarkerfortheidentificationofLauraceaespecies.TheITS2canbeusedasacandidatesequenceofDNAbarcodetoidentifythespeciesinCaprifoliaceaefamily,andpsbA—trnHasacomplementarybarcodetoITS2

7、forCaprifoliaceae.ⅡKeyWords:DNAbarcoding;Lauraceae;Caprifoliaceae;psbA——trnl鷥,Illaf噩rboL;ITS2Ill湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明:所呈交的學(xué)位論文是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,本論文不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得湖北中醫(yī)藥大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在

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