安徽小麥赤霉病菌生物學(xué)特性及遺傳多樣性研究

安徽小麥赤霉病菌生物學(xué)特性及遺傳多樣性研究

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1、安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文安徽小麥赤霉病菌生物學(xué)特性及遺傳多樣性研究姓名:許娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物病理學(xué)指導(dǎo)教師:丁克堅(jiān)201206摘要小麥赤霉病(、Ⅳheatheadscab)是安徽省小麥生產(chǎn)上的重要病害之一,本文以小麥赤霉病菌仃’淞口一“m.gm,,lf,ze口Mm)為研究對(duì)象,主要從該菌菌種不同保存、接種方法比較,不同生態(tài)區(qū)該菌菌株的菌絲培養(yǎng)性狀、生長(zhǎng)速率、產(chǎn)孢量、致病力等方面研究分析了安徽小麥赤霉病菌的生物學(xué)特性,并進(jìn)一步通過(guò)黜心D與ISSR兩種分子標(biāo)記方法對(duì)菌株的分子遺傳多樣性進(jìn)行了分析,

2、鑒定了安徽小麥赤霉病菌菌株間的遺傳多態(tài)性。該研究為安徽小麥品種審定時(shí)抗赤霉病鑒定和抗病育種工作奠定了一定的基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.菌種保存方法的優(yōu)化篩選研究了小麥赤霉病菌在大麥粒、小麥粒、玉米粒3種固體培養(yǎng)基物,含水量分別為50%.60%、40%.50%、30%.40%、20%一30%、10%.20%5種處理,保存溫度為5℃和.15℃下,分不同保存時(shí)間段測(cè)定樣本的菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)孢量及致病力。結(jié)果表明:在3種固體培養(yǎng)基物中,大麥粒培養(yǎng)保存的小麥赤霉病菌的生活力表現(xiàn)最好,在5℃保存3個(gè)月時(shí),大麥粒培養(yǎng)保

3、存的小麥赤霉病菌在5個(gè)含水量梯度下,平均菌絲生長(zhǎng)速率分別是1.83、1.80、1.88、2.02、1.76(酬d),計(jì)算5種含水量條件下的平均值為為1.85cm/d;平均產(chǎn)孢量分別是29、42、55、127、95(104個(gè)/m1),其平均值為69.6×104個(gè)/ml;小麥、玉米培養(yǎng)保存的5種含水量條件下的菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)孢量的平均值分別是:1.59cnl/d、20.6×104個(gè)/ml和1.62cm/d、20.2×104個(gè)/ml。低含水量條件下保存的小麥赤霉病菌株產(chǎn)孢量較大,高含水量條件下保存的小麥赤霉病菌

4、株在保存6~12個(gè)月時(shí)基本被雜菌污染。比較5℃與.15℃保存溫度下的菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)孢量、致病力得出5℃下菌絲生長(zhǎng)速率略好于一15℃,.15℃保存的產(chǎn)孢量、致病力略高。含水量為10%一20%的大麥粒培養(yǎng)基保存的小麥赤霉病菌在1、2、3、6、12個(gè)月時(shí),5℃下的菌絲生長(zhǎng)速率分別是1.88、1.87、1.76、2.19、1.54(cIIl/d),平均值為1.85cII們,-15℃下各月菌絲生長(zhǎng)速率平均值為1.78鋤/d;產(chǎn)孢量分別是16l、169、95、54、60(104個(gè)/m1),平均值為107.8×104

5、個(gè)/ml;.15℃下各月產(chǎn)孢量平均值是159×104個(gè)/ml;使用大麥粒培養(yǎng)基在含水量為10%.20%下保存1.18個(gè)月的小麥赤霉病菌株接種揚(yáng)麥158,.15℃下保存的致病力較強(qiáng),病情反應(yīng)指數(shù)與日擴(kuò)展速率均高其他保存方法。2.小麥赤霉病菌的接種方法比較研究了注射、噴霧2種接種方法,接種后分別采用自然、捆扎和套袋等3種處理,以及注射接種不同部位(麥穗25%處、麥穗50%處和麥穗75%處)對(duì)赤霉病發(fā)病程度的影響。結(jié)果表明:兩種接種方法平均發(fā)病程度無(wú)明顯差異,而注射接種的個(gè)體發(fā)病程度整齊性較高;3種處理方式中以

6、接種后套袋處理有利于小麥赤霉病的發(fā)生,其中噴霧接種套袋的病情指數(shù)為0.77,其余依次為捆扎(0.49)、自然(0.44)。注射接種套袋,病情指數(shù)為0.78,捆扎(O.51)、自然(O.47)。接種于麥穗不同部位對(duì)小麥赤霉病發(fā)病程度影響不明顯,接種于穗25%處、穗50%處和穗75%處得出的病情指數(shù)分別為為O.78、0.77、0.78。3.安徽小麥赤霉病菌的生物學(xué)特性鑒定對(duì)采自安徽23個(gè)地方(皖南地區(qū):宣州、潛山、安慶、南陵、繁昌、蕪湖;皖中地區(qū):巢湖、金寨、六安、壽縣、霍邱、長(zhǎng)豐、明光、風(fēng)陽(yáng);皖北地區(qū):新馬

7、橋、毛集、鳳臺(tái)、潁上、阜陽(yáng)、蒙城、渦陽(yáng)、宿州、碭山)小麥赤霉病菌株的菌絲培養(yǎng)性狀、生長(zhǎng)速率、產(chǎn)孢量及致病力等生物學(xué)特性差異進(jìn)行了分析研究,結(jié)果表明:23個(gè)不同地方的小麥赤霉病菌的PDA培養(yǎng)基物顏色相差不大,大致分為淺紅、紅色、深紅及紅中帶黃。不同菌株間菌絲生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量有一定差異,皖北地區(qū)小麥赤霉病菌株的平均菌絲生長(zhǎng)速率略大于中、南部地區(qū),分別為2.53cm/d、2.39CIIl/d、2.50cn們。皖北地區(qū)小麥赤霉病菌的產(chǎn)孢量明顯高于比中、南部地區(qū)的菌株,平均產(chǎn)孢量依次為:196×104個(gè)、132×1

8、04個(gè)、74.8×104個(gè)。皖北地區(qū)菌株的致病力皆表現(xiàn)為強(qiáng)致病力,中、南部地方菌株的致病力則多表現(xiàn)為中與弱。按由南向北的方向,以4個(gè)地方菌株的平均病情反應(yīng)指數(shù)與平均產(chǎn)孢量進(jìn)行相關(guān)性分析,得出關(guān)系式:y=O.052x+2.1485;R2=O.8434,可見(jiàn)小麥赤霉病菌株產(chǎn)孢量與致病力有一定的相關(guān)性。4.安徽小麥赤霉病菌遺傳多樣性分析采用ISSR與RAPD兩種分子標(biāo)記方法,對(duì)安徽23個(gè)地方小麥赤霉病菌進(jìn)行PCR擴(kuò)增分析,結(jié)果表明:

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