黃芩苷對急性肝衰竭大鼠肝臟核轉(zhuǎn)錄因子--κb表達的影響

《黃芩苷對急性肝衰竭大鼠肝臟核轉(zhuǎn)錄因子--κb表達的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。

1、溫州醫(yī)學院碩士學位論文黃芩苷對急性肝衰竭大鼠肝臟核轉(zhuǎn)錄因子--κB表達的影響姓名：陸小蒟申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學指導教師：陳永平2012-05-17黃芩苷對急性肝衰竭大鼠肝臟核轉(zhuǎn)錄因子一KB表達的影響中文摘要目的：觀察急性肝衰竭大鼠肝臟NF—KB表達水平的變化及黃芩苷對其表達的影響，探討黃芩苷治療急性肝衰竭的作用機制。方法：106只雄性SD大鼠，按隨機數(shù)字表法隨機分為三組：正常組6只、肝衰竭組50只和黃芩苷組50只，每組留10只觀察生存率。肝衰竭組和黃芩苷組再按不同時間點分為24h、72h、120h、168h共4個亞組，每亞組10只。

2、肝衰竭組和黃芩苷組以1．259／kg體重劑量腹腔注射IO％D-GalN制備大鼠急性肝衰竭模型，正常組腹腔注射等量生理鹽水。黃芩苷組于造模后12h開始每隔12小時以120mg／kg劑量腹腔注射黃芩苷，肝衰竭組注射等量生理鹽水。造模后24h、72h、120h和168h各亞組隨機處死6只大鼠。采用全自動生化儀檢測血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(AST)、白蛋白(Alb)和總膽紅素(Tbil)水平；蘇木素一伊紅(HE)染色觀察肝臟病理學變化；反轉(zhuǎn)錄酶一聚合酶鏈鎖反應(RT—PCR)檢測肝組織核轉(zhuǎn)錄因子一KB(NF—KB)、腫瘤壞

3、死因子一Q(TNF—Q)、凋亡蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表達：免疫組化和免疫印記(westernblot，WB)法檢測NF-KB蛋白動態(tài)表達。數(shù)據(jù)采用SPSS18．0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料用均數(shù)±標準差(z±S)表示。樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析(One—wayANOVA)。P<0．05表示差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果：1．D-Gal1．259／kg腹腔注射成功構(gòu)建了大鼠急性肝衰竭模型。肝衰竭組168h死亡率為40％(4／10)，黃芩苷組死亡率為20％(2／10)。肝衰竭組大鼠肝臟色澤灰白，表面可見散在的點、片狀出血點及瘀斑；

4、光鏡下可見肝小葉結(jié)構(gòu)嚴重破壞，肝組織結(jié)構(gòu)紊亂。與肝衰竭組各時間點相比，黃芩苷組大鼠肝臟肝細胞壞死情況明顯減輕。2．肝衰竭組血清ALT、AST、TBil水平較對照組顯著升高，72h時達最高水平(659．17±36．76，735．48±31．48，8．38_+0．39)，差異有統(tǒng)計學意義(F=336．572，289．082，102．135；P

5、(1．1784-O．021)，隨后逐漸降低，與正常組(O．385±0．056)相比，差異有統(tǒng)計學意義(F=879．830，P<0．001)；TNF-a在造模后表達水平逐步增高，72h達高峰(0．698±0．023)，隨后稍有所下降，仍顯著高于對照組，各組與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(F=209．63，401．982，172．330，6．113；P<0．001，P<0．001，P<0．001，P=0．039)。Caspase-3mRNA表達量也于72h達到高峰(1．949±0．104)，與正常組相比差異有統(tǒng)計學意義(F=249．674，P<0

6、．001)隨后逐漸降低，到達168h時表達量(1．008±0．080)與正常組(1．070±0．068)水平相當，差異沒有統(tǒng)計學意義(仁1．731，P=0．225)。黃芩苷組NF-KB、TNF-Q、Caspase一3mRNA表達趨勢與肝衰竭組相同，72h達高峰，但表達量較肝衰竭組明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義(F=603．801，42．174，27．222，P<0．001，P<0．001，P=0．001)。4．免疫組化顯示造模后NF-KB蛋白的表達量隨著時間延長而漸增，并于72h達高峰(0．192±0．007)，且以細胞核表達為主，細胞質(zhì)內(nèi)仍有

7、少量表達，還可見浸潤的炎性細胞內(nèi)也有少量表達；隨后表達量有所降低，且胞核表達量明顯減少。黃芩苷組NF-KB蛋白的表達也于72h達到最大值，但其表達量較肝衰竭組減少，其差異有統(tǒng)計學意義(F=8．903，P=-0．017)。5．直線相關分析結(jié)果顯示，TNF_Q、Caspase一3mRNA表達水平與N卜KBmRNA表達水平均呈正相關(r=O．916，0．859；均P<0．001)。結(jié)論：1．腹腔注射10％的D-Gal1．259／kg，成功建立大鼠急性肝衰竭模型；其可能機制為誘導TNF-Q的表達增加從而上調(diào)NF—KB及caspase一3的表達而導致

8、急性肝衰竭。2．黃芩苷對D一氨基半乳糖誘發(fā)的大鼠急性肝衰竭有保護作用，其機制可能與黃芩苷下調(diào)NF-KB、TNF-Q并l：lCaspase一3的表達有關。關鍵詞黃芩苷；急性肝衰竭；