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1、虎杖水提取物對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)舒張作用和機(jī)制【摘要】目的：探討虎杖水提取物對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的舒張作用及其機(jī)制。方法：建立大鼠離體主動(dòng)脈環(huán)灌流模型，觀察虎杖水提取物對(duì)1.O?mol/L苯腎上腺素(PE)預(yù)收縮的內(nèi)皮完整血管環(huán)和去內(nèi)皮血管環(huán)的舒張作用，并觀察左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)和亞甲藍(lán)(ME)預(yù)處理對(duì)虎杖水提取物的舒張血管作用的影響。結(jié)果：虎杖水提取物(0.1,0.3mg/ml)對(duì)大鼠離體內(nèi)皮完整胸主動(dòng)脈環(huán)具有濃度依賴(lài)性的舒張作用；左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)(0.lmmo
2、l/L)和亞甲藍(lán)(MB)(10?mol/L)預(yù)處理可抑制虎杖水提取物的舒張作用。結(jié)論：虎杖水提取物對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)具有內(nèi)皮依賴(lài)性舒張血管作用，其可能機(jī)制是主要通過(guò)NO-cGMP途徑介導(dǎo)【關(guān)鍵詞】血管舒張；虎杖；主動(dòng)脈，胸；大鼠【中圖分類(lèi)號(hào)】R456.3【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1004-7484(2012)13-0030-02虎杖(PolygonumcuspidatumSiieb.etZucc.)為廖科廖屬多年生草本植物，藥用部位為根及根莖?虎杖始載于《名醫(yī)別錄》，其主要含蔥醍類(lèi)、二苯乙烯
3、類(lèi)、黃酮類(lèi)等多酚性化合物[1].文獻(xiàn)報(bào)道虎杖具有活血定痛、清熱祛濕、解毒消腫、止咳化痰等功效，臨床已用于高血壓、心絞痛和冠心病等的治療[2,3].但虎杖本身對(duì)血管的舒張作用及機(jī)制研究目前尚不多見(jiàn)?本研究擬通過(guò)大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)實(shí)驗(yàn)觀察虎杖水提取物對(duì)血管的作用，并初步探討其相關(guān)的作用機(jī)制1材料準(zhǔn)確稱(chēng)取虎杖(根及根莖)200g,加入蒸館水2L,在8(TC溫度煮沸2h,過(guò)濾減壓濃縮干燥而得14.21g粉末.苯腎上腺素(phenylephrine,PE)、乙酰膽堿(acetylcholine,Ach)、
4、左旋硝基精氨酸甲酯(N3-nitro-L-argininemethylester,L-NAME)和亞甲藍(lán)(methyleneblue,MB)均為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品(SigmaChemicalCo.,St.Louis,MO,USA)O其余試劑為市售分析純?實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用SD大鼠，雄性，體重為250-300g,由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科提供.生理性營(yíng)養(yǎng)液成分(Kreb，s營(yíng)養(yǎng)液)為氯化鈉115.Ommol/L、氯化鉀4.7mmol/L>氯化鈣2.5mmol/L、氯化鎂1.2mmol/L>碳酸氫
5、鈉25.Ommol/L.磷酸二氫鈉1.2mmol/L和葡萄糖10.Ommol/L組成。pH值為7.4.SQG-4型四腔器官浴槽系統(tǒng)、HSS-1(B)型恒溫浴槽及RM6240BD型多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)均為成都儀器廠產(chǎn)品2方法與結(jié)果2.1大鼠離體胸主動(dòng)脈環(huán)的制作腹腔注射給予大鼠3g/L戊巴比妥鈉50mg/kg,待麻醉后打開(kāi)胸腔，迅速分離胸主動(dòng)脈?將取下的胸主動(dòng)脈置入QC的Kreb'S營(yíng)養(yǎng)液中，小心去除血管周?chē)闹炯敖Y(jié)締組織，將動(dòng)脈剪成4mm長(zhǎng)的血管環(huán),操作過(guò)程中避免過(guò)度牽拉，以防損傷內(nèi)皮?根據(jù)
6、實(shí)驗(yàn)需要,去除血管內(nèi)皮時(shí)，使用小輟子輕輕地磨擦血管環(huán)內(nèi)表面，以去除內(nèi)皮細(xì)胞?將血管環(huán)懸掛于經(jīng)37。(2預(yù)熱的容量為20mL的盛有Kreb，s營(yíng)養(yǎng)液的浴槽內(nèi)，一端固定，另一端通過(guò)張力換能器連接至RM6240BD型多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)，持續(xù)通以含有95mL/L氧和5mL/L二氧化碳的混合氣體，將靜息張力逐漸調(diào)節(jié)至2.0g,在379下穩(wěn)定lh,期間每15min換液1次?用50mmol/L氯化鉀刺激達(dá)峰值，用Kreb，s營(yíng)養(yǎng)液沖洗3次，以誘發(fā)血管環(huán)的最大收縮幅度?待動(dòng)脈環(huán)穩(wěn)定后，換液1次，向浴槽中加
7、入苯腎上腺素1.0?mol/L,收縮達(dá)峰值15min后，加入乙酰膽堿1.0?mol/L,若加入乙酰膽堿后使苯腎上腺素預(yù)收縮的血管舒張60?90%,可認(rèn)為內(nèi)皮完整，反之則認(rèn)為去內(nèi)皮2.2統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)偏差(X±SD)表示，并采用t檢驗(yàn)及ANOVA法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析2.3虎杖水提取物對(duì)苯腎上腺素引起的胸主動(dòng)脈環(huán)預(yù)收縮的影響取雄性大鼠40只，隨機(jī)分為5個(gè)組，即對(duì)照組、內(nèi)皮気整虎杖水提取物大、小劑量組和去內(nèi)皮虎杖水提取物大、小劑量組，每組各為8只。剖取各組大鼠胸主動(dòng)脈制作內(nèi)皮完整和去內(nèi)皮胸
8、主動(dòng)脈環(huán)，加入1.O?mol/L苯腎上腺素,待血管環(huán)收縮穩(wěn)定后，分別向內(nèi)皮完整虎杖水提取物大、小劑量組和去內(nèi)皮虎杖水提取物大、小劑量組的浴槽內(nèi)累計(jì)加入0.1,0.3mg/ml虎杖水提取物,向?qū)φ战M內(nèi)加入20mLKreb,s營(yíng)養(yǎng)液，觀察血管環(huán)的舒張反應(yīng)，計(jì)算虎杖水提取物各劑量組血管環(huán)的舒張百分比。舒張百分比二（苯腎上腺素作用后血管張力-虎杖水提取物給藥后血管張力）/苯腎上腺素作用后血管張力xl00%o本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，內(nèi)皮完整虎杖水提取物大、小劑量組血管環(huán)舒張百分比為62.21±14.63%和45.
