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《豬前體脂肪細胞的誘導分化及13個群體aflp多態(tài)性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、山東農業(yè)大學碩士學位論文豬前體脂肪細胞的誘導分化及13個群體AFLP多態(tài)性研究姓名：胡艷霞申請學位級別：碩士專業(yè)：動物遺傳育種與繁殖指導教師：曾勇慶20120614山東農業(yè)大學碩士學位論文中文摘要本論文對萊蕪豬前體脂肪細胞的誘導分化和13個中外豬種(群)的AFLP多態(tài)性進行了研究。脂肪沉積性狀是豬的重要經(jīng)濟性狀，與豬肉品質密切相關。前脂肪細胞是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化細胞，對其增殖和分化機理的深入研究有助于了解脂肪沉積的調控機理。萊蕪豬具有較強的脂肪沉積能力，其肌內脂肪含量豐富。本研究采集1
2、日齡萊蕪豬仔豬頸、背部皮下脂肪組織，采用膠原酶與胰蛋白酶相結合的方法，分離原代前體脂肪細胞，進行前體脂肪細胞的原代和傳代培養(yǎng)，并進行前體脂肪細胞誘導分化的研究，以Real．timePCR技術檢測了前體脂肪細胞分化過程中關鍵基因PPARY的表達。結果表明：分離的豬原代前體脂肪細胞約8h后開始貼壁，貼壁的細胞呈短梭形或不規(guī)則的三角形，第3天多數(shù)細胞進入指數(shù)生長期，呈成纖維細胞樣形態(tài)，細胞生長曲線近似S形：誘導培養(yǎng)結果顯示，少量細胞在第2天開始出現(xiàn)脂滴，多數(shù)細胞在第3天出現(xiàn)脂滴，第7—8天小脂滴開始逐漸融合成較大
3、脂滴，在第12天左右融合成大脂滴，油紅O染色呈橘紅色。在前體脂肪細胞分化過程中PPAR丫基因mRNA的表達量逐漸增加，在誘導后的49h表達量最高，隨后其表達豐度逐漸下降。本實驗成功建立了萊蕪豬前體脂肪細胞培養(yǎng)體系和體外誘導分化模型，為進一步研究萊蕪豬前體脂肪細胞增殖與分化機制和豬體脂肪的沉積奠定基礎。用12對AFLP引物組合檢測了13個中外豬種(群)混合基因組DNA的遺傳變異，并根據(jù)AFLP分析結果計算了13個豬種(群)間的遺傳相似系數(shù)，據(jù)此構建了UPGMA聚類關系圖。結果表明，AFLP標記有著很高的多態(tài)檢
4、測效率，平均每對引物檢測到76個多態(tài)位點，多態(tài)性比例為41．99％；觀測的最高等位基因為1．6056，最低為1．2899，平均觀測等位基因數(shù)目為1．4632；有效等位基因最高為1．4282，最低為1．2050，平均有效等位基因為1．3276；平均Nei基因多樣度(H)為0．1919，平均信農指數(shù)(I)為0．2799。通過UPGMA聚類分析13個豬種(群)分成兩個大類群，中國地方豬種與國外引進豬種間的遺傳分化明顯，親緣關系較遠，中國地方豬種之間親緣關系較近。13個豬種分為兩大類群，杜洛克、長白豬和大白豬聚為一
5、大類群，同為引進豬種：而中國地方豬種里岔黑豬、東北民豬、煙臺黑豬、大蒲蓮豬、徒河黑豬、沂蒙黑豬、萊蕪豬、淮南豬、梅山豬和二花臉豬聚為另一大類群。第二大類群又分為三個小類群，第一類群包括里岔黑豬和東北民豬，第二類群包括煙臺黑豬、大蒲蓮豬、徒河黑豬、沂蒙黑豬、萊蕪豬，第三類群包括淮南豬、梅山豬和二花臉豬。關鍵詞：豬；前體脂肪細胞；細胞培養(yǎng)：分化；AFLP標記：遺傳多樣性I豬前體脂肪細胞的誘導分化及13個群體的AFLP多態(tài)性研究StudiesontheInducedDifferentiationofPorcine
6、PreadipocytesandthePolymorphismof13pigbreedsusingAFLPmarkersABSTRACTWestudiedtheinduceddifferentiationofporcinepreadipocytesandthepolymorphismgeneticrelationshipof13pigbreedsusingAFLPmarkersinthisthesis．Fattydepositionisanimportanteconomicaltraitinpigbreed
7、ing，andithasbeenshownt0becloselyrelated晰tIltheporkquality．Preadipocytesareatypeofspecialprecursorcells、析mtheabilityofgenerationanddifferentiationtowardsadipocyteswhosedeeplystudyofmechanismofgenerationandcelldifferentiationisusefultocomprehendregulationmec
8、hanismoffattydepositionincells．LaiwuBlackisasuperordinateindigenouspigbreed，whichhavethehiglllycapableoffattydeposition，andhavetheabundantintramuscularfat．Inthisstudy,preadipocyteswereisolatedfromsubcutaneous
