flavopiridol對食管癌eca-9706細(xì)胞放射增敏機制的實驗研究

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1、Flavopiridol對食管癌ECa-9706細(xì)胞放射增敏機制的實驗研究計:學(xué)位論文:30頁表格:1個插圖:4幅李大偉指導(dǎo)教師:石靜濱教授申請學(xué)位級別:碩士學(xué)位論文提交日期:2012年4月學(xué)位授予單位:大連醫(yī)科大學(xué)專業(yè)名稱:腫瘤學(xué)論文答辯日期:2012年5月學(xué)位授予日期:2012年6月評閱人:答辯委員會主席:獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得大連醫(yī)科大學(xué)或

2、其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使J。j過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:簽字Et期:型L年』月衛(wèi)Et目錄一、摘要??????????????????????????1(一)中文摘要??????????????????????1(二)英文摘要??????????????????????3二、正文??????????????????????????6(一)前言??????0D00????????00Q0DQ··0????6(一)日IJ舌???一??

3、‘????????????6(二)材料與方法?????????????????????7(三)結(jié)果???????????????????????12(四)討論???????????????????????15(五)結(jié)論???????????????????????18(六)參考文獻(xiàn)?????????????????????19三、綜述????????mOOOD??OOO0D04P4bQ4DIDO??DIDoIooIDIDll????22(一)綜述??????????????????????22(二)參考文獻(xiàn)??

4、???????????????????26四、致謝??????????????0m0000000000GIIDDliB80Q00????30Flavopiridol對食管癌ECa一9706細(xì)胞放射增敏機制的實驗研究碩士生姓名:指導(dǎo)教師:指導(dǎo)小組:專業(yè)名稱:李大偉石靜濱教授石靜濱教授腫瘤學(xué)摘要放射治療是食管癌主要治療方法之一,雖然近年來放療技術(shù)取得了較快進(jìn)步,明顯提高了腫瘤治療的精度,但最終療效還不能令人滿意。因此,如何提高食管癌放射治療的療效便成為目前亟待解決的問題。Flavopiridol是小分子細(xì)胞周期蛋白

5、依賴性蛋白激酶(CDKs)抑制劑,化學(xué)結(jié)構(gòu)為黃酮,最初來源于一種印度植物,是第一個經(jīng)臨床試驗證實的CDKs抑制劑,研究發(fā)現(xiàn)其對前列腺癌、食管癌等多種腫瘤具有較強的抑制作用。其可能的抗腫瘤機制主要為抑制CDKs活性、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡及抗血管生成等,且對靜止期細(xì)胞和增殖期細(xì)胞具有相似的抗腫瘤作用。另外,F(xiàn)lavopiridol還能通過抑制放療后DNA的損傷修復(fù)過程從而提高細(xì)胞對放射治療的敏感性。通過前期實驗已測定Flavopiridol對ECa-9706細(xì)胞株的IC∞(半數(shù)致死量)為256nmol/L,并證明對ECa-

6、9706細(xì)胞株具有放射增敏作用,1/5IC∞即51.2nmol/LFlavopiridol的SER(放射增敏比)為1.268。但其對食管癌ECa-9706細(xì)胞株放射增敏的分子機制還不甚清楚。研究發(fā)現(xiàn)VEGF、Survivin、CyclinDl三種蛋白在人多種腫瘤細(xì)胞中均有表達(dá)異常,本實驗通過Flavopiridol聯(lián)合放射線共同作用于ECa一9706細(xì)胞株,通過實驗前后食管癌ECa一9706細(xì)胞周期的變化情況以及VEGF,CyclinDl,Survivin蛋白表達(dá)水平的變化情況,分析Flavopiridol對食

7、管癌ECa一9706細(xì)胞的放射增敏作用機制,為Flavopiridol應(yīng)用于臨床食管癌放射增敏治療提供實驗依據(jù)。目的:Flavopiridol與放射線單獨或聯(lián)合作用于食管癌ECa一9706細(xì)胞株,通過對作用前后細(xì)胞周期的變化以及VEGF,CyclinDl,Survivin三種蛋白表達(dá)水平的改變情況,初步分析Flavopiridol對食管癌ECa-9706細(xì)胞株體外放射增敏機制。方法:將實驗分為四組(對照組:不做任何處理;藥物組:0.2×IC軸Flavopiridol;放射組:6Gy單次吸收劑量射線照射;實驗組:

8、0.2×IC。。Flavopiridol處理24小時后6Gy單次吸收劑量射線照射),通過流式細(xì)胞術(shù)及Westernblotting方法檢測以上四組細(xì)胞周期分布狀況和VEGF、CyclinDl、Survivin蛋白表達(dá)水平的變化情況。結(jié)果:1、實驗組G。/G。、G:/M期比例較對照組比例顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,(P

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