內(nèi)皮祖細胞移植對腎臟急性缺血再灌注損傷的影響及其機制研究

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1、東南大學(xué)碩士學(xué)位論文內(nèi)皮祖細胞移植對腎臟急性缺血再灌注損傷的影響及其機制研究姓名：陳波申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：賈瑞鵬2012-05-28中文摘要內(nèi)皮祖細胞移植對腎臟急性缺血再灌注損傷的影響及其機制研究研究生：陳波1導(dǎo)師：賈瑞鵬教授21．東南大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院2．南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院泌尿外科摘要目的：進行EPC移植，觀察內(nèi)皮祖細胞(EPCs)對急性缺血再灌注損傷(IRI)大鼠腎組織形態(tài)和功能的影響，探討EPCs對腎臟急性IRI的影響及其可能機制。方法：采用Ficoll密度梯度離心法分離獲取骨髓單個核細胞，體外定向誘導(dǎo)、擴增培

2、養(yǎng)內(nèi)皮祖細胞(EPCs)，并用氯甲基苯甲酰氨(CM．Dil)熒光染料標記；將45只雄性SD大鼠隨機分為三組，且I]EPCs移植組(EPCs組，n=15)，對照組(IRI組，n=15)，假手術(shù)組(Sham組，n=15)。EPCs組夾閉雙側(cè)腎蒂45min，再灌注后經(jīng)股靜脈移植用CM．Dil標記的EPCs；IRI組夾閉雙側(cè)腎蒂45min，再灌注后經(jīng)股靜脈注入等量生理鹽水；Sham組假手術(shù)后經(jīng)股靜脈注入等量生理鹽水。觀察：(1)EPCs移植對腎臟IRI后不同時間點血肌酐、尿素氮、腎組織形態(tài)學(xué)和細胞凋亡的影響；(2)移植的EPCs對損傷腎小管周毛細血

3、管的修復(fù)作用；(3)CM．Dil標記的EPCs在腎組織中的分布特征。結(jié)果：經(jīng)CM—Dil熒光染料標記的EPCs陽性率接近100％，IRI組、EPCs組大鼠血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)均顯著高于Sham組，但EPCs組血BUN、Scr水平卻較同一時『白J的IRI組低(P

4、最為顯著。結(jié)論：EPCs移植可顯著減輕IRI腎臟的病理性損傷，抑制細胞凋亡，促進毛細血管內(nèi)皮修復(fù)，促進VEGF等細胞因子分泌，改善腎臟急性IRI后的腎功能，對損傷腎臟產(chǎn)生保護作用。關(guān)鍵詞內(nèi)皮祖細胞；缺血再灌注損傷；細胞移植AbstractTheeffectofendothelialprogenitorcellstransplantationonacuteischemiareperfusioninjuryratsanditsmechanismPostgraduate：CHENBoTutor：Prof．JIARui—pen921．Southea

5、stUniversitySchoolofClinicalMedicine2．DepartmentofUrology,NanjingHospitalAffiliatedtoNanjingMedicalUniversityobjective：Toinvestigatetheeffectsofbonemarrow·derivedendothelialprogenitorcells(EPCs)transplantationontherenalischemiareperfusioninju叫(IRI)rats，andobservethehomingo

6、fEPCsinIRIrenaltissue．Methods：Bonemarrow-derivedmonocytescellswereisolatedfromthefemursandtibiaeofmaleSDratswithficolldensitygradientcentrifugation，induceddifferentiationintoEPCsinvitro，andlabeledwithchloromethyl—benzamidodialky-lcarbocyanine(CM—Dil)fluorescentdyebeforetra

7、nsplantation．Forty-fivemaleSDratswererandomlydividedinto3groups：EPCstransplantationgroup(EPCsgroup，n=15)，controlgroup(IRIgroup，n=15)andsham-operatedgroup(Shamgroup，n=5)．EPCsgroupwereinducedacuterenalIRIbyclampingbilateralrenalarteriesfor45minutes，thentransplantedEPCslabele

8、dwithCM—Dilimmediatelyaftertheresumptionofcirculationinkidney．IRIgroupwereinducedacuteren