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《海人酸致癇模型大鼠腦組織中orexin mrna及陽性細(xì)胞的表達(dá)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院解放軍總醫(yī)院碩士學(xué)位論文海人酸致癇模型大鼠腦組織中orexinmRNA及陽性細(xì)胞的表達(dá)姓名：陳福順申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：郎森陽2012-05-22軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院碩士學(xué)位論文海人酸致癇模型大鼠腦組織中orexinmRNA及陽性細(xì)胞的表達(dá)中文摘要目前的抗癲癇藥物大多通過降低神經(jīng)元興奮性或增加抑制性神經(jīng)遞質(zhì)起作用。癲癇的發(fā)生被認(rèn)為是中樞內(nèi)丫一氨基丁酸(GABA)抑制作用減弱或缺乏的結(jié)果。Orexin又稱hypocretin，1998年發(fā)現(xiàn)于下丘腦，與食欲有關(guān)，包括orexin-A
2、和orexin—B(又稱為hypocretin-1和-2)，均為orexin前體的分解產(chǎn)物，其受體有2種亞型一一orexinlR及orexin2R，廣泛分布于整個中樞神經(jīng)系統(tǒng)，此后又發(fā)現(xiàn)其與交感神經(jīng)活動，以及睡眠與覺醒狀態(tài)的調(diào)控有關(guān)，而對于其與癲癇的有關(guān)研究，有實驗證實orexin能增強GABA電流，反復(fù)癲癇發(fā)作患者腰穿腦脊液中orexin．A濃度少于非癲癇患者。因此，orexin可能與癲癇的發(fā)生或控制有關(guān)。本研究采用海人酸腹腔注射誘發(fā)大鼠癲癇急性發(fā)作，并分別在發(fā)作終止后的第8h、1d、3d、7d和慢性
3、復(fù)發(fā)時間點行實時逆轉(zhuǎn)錄PCR方法檢測大鼠大腦皮層、海馬和下丘腦中的prepro-orexinmRNA表達(dá)量，免疫組化方法檢測prepro—orexin，orexin-A和orexin-B免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞及其神經(jīng)纖維數(shù)量，以闡明orexin在癲癇發(fā)作中的作用。結(jié)果如下：1．實時逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測prepro-mRNA表達(dá)：大鼠致癇發(fā)作中止后，其prepro．orexinmRNA表達(dá)量在皮層與海馬部位呈現(xiàn)先增高后回復(fù)趨勢，且在皮層與海馬變化趨勢大體一致，在1d組處prepro-orexinmRNA表達(dá)量增高均
4、達(dá)到最大量，相對于對照組，倍數(shù)分別為3．170857士0．271和2．788士0．075；而在下丘腦處則呈現(xiàn)先減少后回復(fù)趨勢，其表達(dá)量在ld組處達(dá)到最少，為對照組的O．597土0．020倍。2．免疫組化檢測：(1)prepro—orexin免疫陽性細(xì)胞分布在下丘腦和穹窿周圍核；各組之間prepro．orexin陽性細(xì)胞數(shù)差異并不顯著，但其變化曲線總體是下降的，尤其在致癇后的第7天出現(xiàn)了變化較大的減少；prepro—orexin免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)纖維數(shù)量稀少，主要分布在下丘腦、丘腦室旁核及海馬。軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
5、碩士學(xué)位論文(2)Orexin．A免疫陽性細(xì)胞分布集中于下丘腦和穹窿周圍核；8h組細(xì)胞數(shù)顯著減少，與其他各區(qū)組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；其他相鄰組間差異并不具有統(tǒng)計學(xué)意義；整體細(xì)胞數(shù)變化，呈現(xiàn)出先減少，后回復(fù)，再減少趨勢；orexin．A神經(jīng)纖維的檢測，其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)分布廣泛，8h組顯著增加，與其他各組相比，除1d組外，其值差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義，神經(jīng)纖維曲線變化呈現(xiàn)先升高，后下降，再次升高的趨勢。(3)Orexin—B免疫陽性細(xì)胞的分布局限于下丘腦和穹窿周圍核，在海馬有可疑的陽性，8h組陽性最高，其次3d組
6、；細(xì)胞數(shù)呈現(xiàn)為先減少后回復(fù)，之后減少再回復(fù)趨勢，在7d組處顯著減少，與其他各組差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；orexin．B神經(jīng)纖維的檢測，其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)分布廣泛，數(shù)量呈現(xiàn)出與其細(xì)胞數(shù)相反的變化。綜上所述，Prepro-rexinmRNA，orexin細(xì)胞數(shù)及其神經(jīng)纖維在大鼠癲癇發(fā)作后的變化，表明其可能參與了癲癇的神經(jīng)元放電和傳播的調(diào)節(jié)，增加其濃度有助于對癲癇的控制。關(guān)鍵詞：癲癇大鼠海人酸orexinprepro—orexin2軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院碩士學(xué)位論文ExpressionoforexinmRNAandposit
7、ivecellsintheratbraintissueoftheepilepsymodelinducedbykainicacidAbstractThecurrentanti··epilepticdrugsplayrolesmostlybyreducingneuronalex-·citabilityorincreasingtheinhibitoryneurotransmitter．TheoccurrenceofseizureSisconsideredtobetheresultsofreductionorl
8、ackof1,-aminobutyricaci-d(GABA)inhibitioninthecentralnervoussystem．Orexin，alsoknownasth-ehypocretin，includingorexin—Aandorexin-B(hypocretin-1andhypocretin-2respectively)derivedbyproteolyticcleavagefromprepro-orexinprecurso
