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1、廈門大學(xué)碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)錄因子Oct4及Nanong在人乳腺癌干細(xì)胞中的表達(dá)及意義姓名：羅維遠(yuǎn)申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：羅琪201205摘要腫瘤干細(xì)胞理論認(rèn)為腫瘤是由腫瘤干細(xì)胞異常增殖、分化而形成，常規(guī)放化療僅能消滅增殖期的非致瘤性腫瘤細(xì)胞，使腫瘤縮小甚至消失，然而，腫瘤干細(xì)胞和普通干細(xì)胞一樣，對放化療等方法具有較高的抵抗能力，當(dāng)治療停止后，腫瘤干細(xì)胞可再次增殖形成腫瘤。干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子Oct4及Nanog參與胚胎干細(xì)胞和原始生殖細(xì)胞的自我更新，是維持細(xì)胞全能性所必須的轉(zhuǎn)錄因子，在分化或成熟的組織中其表達(dá)水
2、平降低或消失。近來發(fā)現(xiàn)Oct4及Nallog在腫瘤組織中也有表達(dá)，且表達(dá)水平與腫瘤的惡性程度相關(guān)。這與腫瘤中存在腫瘤干細(xì)胞的理論相一致，其在腫瘤干細(xì)胞中的作用有待研究。目前已證實乳腺癌中存在乳腺癌干細(xì)胞，并且乳腺癌干細(xì)胞在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵作用。本實驗利用砒蛆干擾的方法研究轉(zhuǎn)錄因子0c“及NaIlog在乳腺癌干細(xì)胞中的作用。我們首先通過無血清培養(yǎng)法從乳腺癌MDAMB231細(xì)胞中分離出乳腺癌干細(xì)胞。通過研究其乳腺癌干細(xì)胞表面標(biāo)志、抗化療藥紫杉醇的能力及在小鼠體內(nèi)的致瘤能力，對其干細(xì)胞特性進(jìn)行鑒定。其次，通過R
3、eal．timePCR及W．estenB10t等方法檢測其Oct4及Nanog的表達(dá)情況。隨后，我們利用siRNA分別下調(diào)乳腺癌干細(xì)胞中0c傅及N觚og的表達(dá)，并通過Real．nnePCR及W色stenBlot等方法檢測干擾效果，探討Oct4與NaIlog在乳腺癌干細(xì)胞中的相互作用，并利用CellTiter-BlueCellⅥabil時Assay檢測干擾后對乳腺癌干細(xì)胞抗化療藥能力的影響。通過上述研究，我們發(fā)現(xiàn)在無血清培養(yǎng)基中存活下來的MDAMB231細(xì)胞比普通MDAMB231細(xì)胞具有較強(qiáng)的致瘤能力及抗化療藥紫杉醇的
4、能力，具有乳腺癌干細(xì)胞的特性，下調(diào)乳腺癌干細(xì)胞中Oct4的表達(dá)會降低其Nanog的表達(dá)水平，同樣，下調(diào)乳腺癌干細(xì)胞中NaIlog的表達(dá)也會減少其Oct4的表達(dá)水平，Oct4及Nallog的表達(dá)量減少均會導(dǎo)致乳腺癌干細(xì)胞的抗化療藥能力下降。本研究表明，轉(zhuǎn)錄因子Oct4及№mI)g在乳腺癌干細(xì)胞中發(fā)揮作用，其表達(dá)水平影響乳腺癌干細(xì)胞對化療藥的耐藥性。關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子；乳腺腫瘤；腫瘤干細(xì)胞IIAbstractAccordiIlgt0仕屺劬0rstcmcellshypomesis，t11lnorsorigilla【ein仕I
5、eproliferationanddi行erentiationoftumorstemcells．Conventionalradi硎媳rapy鋤dchemomerapycaIloIllykillthenon—tuIl塒ge血ct岫orcells，causingtumorSt0姍11koreVendisappear．However，liket11en0肌alstemcells，cancer妣mcellshaveK出erabili鑼toresistra【diotherapy鋤dchemotherapy．Whentlle讎a
6、：nIlemStops，tumorstemcellsareablet0prolife陽【tion鋤di11duceneoplasiaagain·T舢scri口tionf如torOct4鋤dNanogpanicipaleint11eself二ren聃哇ngofemb巧oIlicstemcellsandprimordialge吼cells．111eyarebotllnecessaryformai“IlingcelltOtipotencyandmeirexpressionl“el麗llreduceordisappeariI
7、lthedi位rentiatedorm船orgalliZation．However，inmerecentresearch，Oct4andNallogarefoulldeXpressingiIl位tIlrnortissue，aIldtheexpressionleVelisco仃elatedwithtuIIlormaligI】蛐cy．刪sisconsistent研m恤tlleorythatturnorstemcellsexiStintumorS，齜ldtheir脅ioniIltuInorstemcellshastobes
8、tudied缸脅er．IthaSbeenproVedtllattllerearecancerstemcellsmbreastcanceraIldbreaStcanerstemcellsplayakevroleiIlt11eoccunlence鋤ddevelopmentofbreaStcancer．Weexpl讎dtheeXpressionand
