人參皂苷rh2對人肝癌bel-7402細胞增殖和凋亡的影響

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1、分類號UDC610碩士學(xué)位論文密級人參皂苷Rh2對人肝癌Beb7402細胞增殖和凋亡的影響EffectsofginsenosideRhzontheproliferationandapoptosisofhumanhepatocarcinomacellsBel·-7402作者姓名：何鑫學(xué)科專業(yè)：外科學(xué)學(xué)院(系、所)：衛(wèi)生部肝膽腸外科研究中心指導(dǎo)教師：何剪太教授答辯委員會主御中南大學(xué)二O一二年六月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別

2、加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。作者簽名：絲型逸日期：業(yè)年』月』日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本

3、學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。日期：至坐年—L月上日碩士學(xué)位論文中文摘要摘要目的：觀察人參皂苷Rh：對人肝癌Bei-7402細胞增殖和凋亡的影響，探討其機制，為肝癌相關(guān)的新藥研發(fā)和臨床治療提供理論依據(jù)。方法：將人肝癌Bei-7402細胞用含10％胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基，在37℃、5％C0：培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每2天換液一次，細胞生長至80％時用胰蛋白酶進行消化傳代。取對數(shù)生長期的人肝癌Bel一7402細胞與人參皂苷Rh2(200、100、50、0ug·m

4、l。1)在37℃、5％C0。培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，應(yīng)用MTT比色法，通過應(yīng)用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值并計算細胞生長抑制率，從而間接反映人參皂苷Rh。對人肝癌Bel一7402細胞增殖的影響；利用流式細胞儀分析人肝癌Bei-7402細胞周期中各時期的細胞百分數(shù)；應(yīng)用TUNEL技術(shù)，利用熒光顯微鏡，在450-500nm波長范圍激發(fā)熒光，并以細胞核出現(xiàn)強烈熒光作為判斷TUNEL陽性細胞的標準，計算細胞凋亡率，從而反映人參皂苷Rh：對人肝癌Bel一7402細胞凋亡的影響；通過Western

5、blot法檢測人肝癌Bel一7402細胞中Bcl一2、Bax的蛋白表達。結(jié)果：MTT比色法結(jié)果顯示，將不同濃度的人參皂苷Rh2(200、100、50ugoml‘1)與人肝癌Bei-7402細胞共培養(yǎng)48h后，與陰性對照組比較細胞增殖抑制率分別為：30．25±1．29％、14．14±1．17％、8．27±1．02％，說明人參皂苷Rh：能抑制人肝癌Bei-7402細胞的生長，且在一定程度上呈量效關(guān)系；流式細胞儀檢測顯示，人參皂苷Rh。(200、100、50ug·ml叫)能使細胞停滯于G1期，百分比分別為

6、：79．3±1．10％、71．2±1．47％、66．1±1．22％，在一定程度上呈量效關(guān)系；TUNEL技術(shù)檢測結(jié)果顯示，人參皂苷Rh。(200、i00、50ug·m1。1)能有效誘導(dǎo)人肝癌Bel一7402細胞凋亡，凋亡率分別為14．32±1．11％、8．14±1．21％、5．28±1．09％，在一定程度上呈量效關(guān)系。WesternBlot結(jié)果顯示，人參皂苷Rh。能上調(diào)人肝癌Bei-7402細胞中Bax的表達，下調(diào)Bcl一2的表達，在一定程度上呈量效關(guān)系。結(jié)論：與陰性對照組相比，用不同濃度的人參皂苷R

7、h：處理人肝癌Bel一7402細胞48h后，細胞中具有抗凋亡作用的Bcl一2表達下降，碩士學(xué)位論文中文摘要而促凋亡的Bax表達升高，這也引起了Bcl一2／Bax比值降低。本實驗結(jié)果提示人參皂苷Rh。誘導(dǎo)人肝癌Bel一7402細胞凋亡的作用可能是通過影響B(tài)ax、Bcl一2表達來實現(xiàn)的。人參皂苷Rh。能有效抑制人肝癌Bel一7402細胞的增殖，并能誘導(dǎo)其凋亡，因而在臨床治療肝癌方面有廣泛的應(yīng)用前景。進一步證明了其作用機制至少涉及兩方面內(nèi)容，一是細胞周期阻滯，二是Bel-2和Bax參與調(diào)控的細胞凋亡。關(guān)鍵

8、詞人參皂苷Rh：，人肝癌Bel-7402細胞，增殖，凋亡II碩士學(xué)位論文英文摘要ABSTRACT【Objective】ToinvestigatetheeffectsofginsenosideRh2ontheproliferationandapoptosisofhumanlivercancercellsBel．7402．『MethodslHumanhepatomaBel一7402cellsweretreatedwithDMEMmediumcontaining1O％fet