乙肝病毒感染產(chǎn)婦血清及乳汁中病毒核酸及抗體檢測研究

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1、乙肝病毒感染產(chǎn)婦血清及乳汁中病毒核酸及抗體檢測研究【摘要】目的探討乙肝病毒感染產(chǎn)婦血清及乳汁中病毒核酸與抗體檢測方法。方法選取乙肝病毒攜帶產(chǎn)婦92例,采用ELISA檢測法對產(chǎn)婦血清及乳汁中乙肝標(biāo)志物進(jìn)行測定,并采用熒光定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法對血清以及乳汁中的HBV-DNA含量進(jìn)行測定。結(jié)果92例患者中大三陽24例(26.09%),小三陽36例(39.13%),HBsAg以及HBcAb陽性32例(34.78%)o各組患者乳汁HBV-DNA陽性率均低于血清檢出率,但是差別并不明顯(P>0.05)o大三陽組患者血清、乳汁HBV-DNA檢出率明顯高于其他兩組,且其

2、病毒載量明顯高于其他兩組(PV0.05)。且隨著血清病毒載量的升高,乳汁病毒載量也相應(yīng)升高,兩者成正相關(guān)(r=0.853,P<0.05)o結(jié)論乙肝病毒感染產(chǎn)婦進(jìn)行母乳喂養(yǎng)應(yīng)各位謹(jǐn)慎。條件允許時可以對血清以及乳汁中病毒核酸進(jìn)行檢測以確定喂養(yǎng)方式,如果條件不允許,則應(yīng)放棄母乳喂養(yǎng)?!娟P(guān)鍵詞】乙肝;病毒感染;血清;乳汁;核酸檢測;病毒檢測乙肝是我國常見的傳染性疾病,母嬰途徑是其重要的傳播方式。作為嬰兒最為理想的食物,母乳是否具有傳播乙肝病毒的作用目前還存在著一定的爭議,有研究認(rèn)為約有(30-50)%的乙肝病毒慢性攜帶者由母嬰途徑引起[1]。本研究通過對92例血

3、清HBV-Ag陽性的孕產(chǎn)婦血清及乳汁病毒核酸進(jìn)行檢測和分析,現(xiàn)報告如下:1資料與方法1.1臨床資料選取2007年1月-2011年11月期間我院收治的乙肝病毒攜帶產(chǎn)婦92例,年齡(28-43)歲,平均(29.17±3.82)歲;孕(37-41)周,平均(39.16±0.42)周。所有孕產(chǎn)婦均為單胎妊娠,且為第一次妊娠。胎兒體重(2100-4500)g,平均(3273.73±637.26)go所有產(chǎn)婦均未見明顯的臨床癥狀,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(0-40)U/Lo采用Child-pugh法對肝功能進(jìn)行分級[2],A級13例,B級39例,C級40例。剖宮產(chǎn)37例,自

4、然分娩53例,陰道助產(chǎn)2例。1.2方法采用ELISA檢測法對產(chǎn)婦血清及乳汁中乙肝標(biāo)志物進(jìn)行測定,并采用熒光定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法對血清以及乳汁中的HBV-DNA含量進(jìn)行測定。于產(chǎn)婦分娩前采取清晨空腹外周血3ml,放置lOmin后以6000r/min進(jìn)行離心lOmin。取50ul放入Eppendorf管,并加入50ulDNA提取液充分打勻,放入100°C干式恒溫器lOmin,然后進(jìn)行l(wèi)Omin離心,轉(zhuǎn)速為10000r7min。取5ul行PCR檢測。產(chǎn)婦分娩3d后收集3ml初乳,以10000r/min進(jìn)行離心lOmin,去除上層油脂后吸取100ul下層乳汁放入

5、無菌微量離心管,加入lOOullOOg/L聚乙二醇液混勻,并在4°C下進(jìn)行10000r/min離心15min,拋棄上清液。加入50ul滅菌雙蒸水,將沉淀進(jìn)行充分溶解,并加入DNA提取液,充分混勻。將上述標(biāo)本放置于冰箱以4匸冷藏過夜,然后吸取750ul乳汁注入Eppendorf管進(jìn)行ELISA檢測和HBV-DNA定量檢測。1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS13.0軟件進(jìn)行分析,計量資料采用t檢驗,計數(shù)資料采用x2檢驗,且以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1ELISA檢測結(jié)果92例患者中大三陽24例(26.09%),小三陽36例(39.13%),HBsAg以

6、及HBcAb陽性32例(34.78%)。1.2HBV-DNA檢測各組患者乳汁HBV-DNA陽性率均低于血清檢出率,但是差別并不明顯(P>0.05)o大三陽組患者血清、乳汁HBV-DNA檢出率明顯高于其他兩組,且其病毒載量明顯高于其他兩組(P<0.05)o且隨著血清病毒載量的升高,乳汁病毒載量也相應(yīng)升高,兩者成正相關(guān)(r=0.853,P<0.05),見表lo3討論乙型肝炎是一種嚴(yán)重危害人類健康的全球性疾病,在我國乙肝病毒攜帶率高達(dá)(10-15)%,每年更是有超過百萬的乙肝病毒攜帶者分娩,母嬰傳播是乙肝病毒進(jìn)行傳播的重要途徑。母乳中不僅富含優(yōu)質(zhì)蛋白、乳糖、維

7、生素以及飽和脂肪酸,而且可以有效提高嬰兒抵抗力,促進(jìn)其健康成長[3]。但是乙肝表面抗原陽性產(chǎn)婦是否可以進(jìn)行母乳喂養(yǎng)一直以來都存在著較大的爭議。乙肝病毒核酸是病毒具有傳染性的最為直接的標(biāo)志,其拷貝數(shù)量直接衡量著傳染性的強(qiáng)弱,也是衡量治療效果的重要指標(biāo)[4]。本研究中乳汁HBV-DNA的檢出率略低于血清,但是差異并不明顯。大三陽患者血清以及乳汁病毒核酸載量明顯高于其他患者,且乳汁病毒核酸載量隨著血清載量的升高而升高。這些都說明,乙肝病毒攜帶患者其體內(nèi)HBV仍然處于較為活躍的復(fù)制期,在這種情況下,產(chǎn)婦進(jìn)行母乳喂養(yǎng)應(yīng)各位謹(jǐn)慎。條件允許時可以對血清以及乳汁中病毒核

8、酸進(jìn)行檢測以確定喂養(yǎng)方式,如果條件不允許,則應(yīng)放棄母乳喂養(yǎng)。參考文獻(xiàn)[1]曾定元

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