基地梔子優(yōu)良種質(zhì)的篩選與高產(chǎn)栽培技術(shù)研究

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1、廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中己經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名耘鈍罐日期：／叩年6月午日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權(quán)廣州

2、中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名≥易％碚論文導(dǎo)師簽名13期：嬸年‘月唯日彳麗舴摘要梔子(GardeniajasminoidesEllis)又名山梔子、黃梔子、紅梔子，為茜草科(Rubiaceae)多年生常綠灌木，分布于我國(guó)江西、四川、湖南等南方各省，喜溫暖濕潤(rùn)、陽光充足的環(huán)境，較耐旱，忌積水。為2010版《中國(guó)藥典》收錄的中藥材梔子原植物。目前有關(guān)梔子藥材的化學(xué)、藥理學(xué)等方面的研究已有較多報(bào)道，

3、但對(duì)梔子原植物的DNA指紋鑒定、以及關(guān)于優(yōu)良梔子品種質(zhì)的篩選研究卻少有報(bào)道。本課題在前人研究工作基礎(chǔ)上，采用RAPD即隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA(randomamplifiedpolymorphismDNA，隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNARAPD)分子標(biāo)記和并結(jié)合高效液相色譜法等技術(shù)(HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC)，對(duì)在江西樟樹吳城鄉(xiāng)康成梔子基地發(fā)現(xiàn)的形態(tài)上有明顯差別的14個(gè)梔子植株樣品，從植株外部形態(tài)特征、葉片性狀、果實(shí)性狀及單株果實(shí)產(chǎn)量、果實(shí)有效成分含量等方面進(jìn)行了比較分析和綜合評(píng)價(jià)。同時(shí)

4、選取基地主要栽培的品種進(jìn)行了基于提高梔子質(zhì)量、產(chǎn)量和病蟲害防治效果的高產(chǎn)技術(shù)等方面的評(píng)價(jià)研究。本研究的目的是：(1)通過形態(tài)指標(biāo)客觀鑒別基地梔子的不同種質(zhì)；(2)通過RAPD比較分析14個(gè)樣品的DNA指紋圖譜，探討它們間的遺傳關(guān)系，從分子水平上進(jìn)一步鑒定14個(gè)樣品；(3)通過用HPLC色譜比較分析14個(gè)樣品的梔子苷、西紅花苷一1、綠原酸含量的差異，探討梔子種質(zhì)與質(zhì)量的關(guān)系；(4)統(tǒng)計(jì)不同種質(zhì)的單株產(chǎn)量，研究梔子種質(zhì)與產(chǎn)量的關(guān)系；(5)建立梔子優(yōu)良種質(zhì)篩選的方法，并在基地篩選出優(yōu)良梔子種質(zhì)；(6)通過HPLC色譜比較分析幾種不

5、同肥料和農(nóng)藥處理后梔子的梔子苷、西紅花苷一1、綠原酸含量的差異，探討不同肥料和農(nóng)藥處理與三種主要有效成分含量的關(guān)系，評(píng)價(jià)農(nóng)藥對(duì)蟲害的綜合防治效果，為梔子高產(chǎn)栽培技術(shù)規(guī)程制定提供依據(jù)；(7)綜合兩類研究，以期從而獲得質(zhì)量?jī)?yōu)良種質(zhì)，及高產(chǎn)栽培技術(shù)。研究取得主要結(jié)果如下：1．基地梔子形態(tài)鑒定。調(diào)查了基地梔子的種質(zhì)資源，采集了14個(gè)樣品，對(duì)照《中國(guó)植物志》檢索，均符合黃梔子的外形特征。經(jīng)SPSS19軟件分析各個(gè)樣品的形態(tài)指標(biāo)，14個(gè)樣品可以分為四大類：第一大類為14號(hào)，其特點(diǎn)是葉長(zhǎng)、葉寬在所有樣品中最小，果長(zhǎng)、果寬，宿萼長(zhǎng)也偏小，單

6、株果數(shù)較多，產(chǎn)量較高；第二大類為l號(hào)、4號(hào)、5號(hào)、7號(hào)、12號(hào)，其特點(diǎn)是葉長(zhǎng)、葉寬、果寬均較大，其中1號(hào)產(chǎn)量最高，其余產(chǎn)量較低；第三類為2號(hào)、6號(hào)、8號(hào)、9號(hào)、10號(hào)、1l號(hào)和13號(hào)，其特點(diǎn)是葉長(zhǎng)、葉寬均較小，其中8號(hào)產(chǎn)量較好，百果重最重，9號(hào)百果重最小，10號(hào)、11號(hào)和13號(hào)單株果數(shù)較多。第四大類為3號(hào)，其特點(diǎn)是除托葉較小外，其余葉長(zhǎng)、葉寬、葉長(zhǎng)寬比、果長(zhǎng)、果寬、宿萼長(zhǎng)、果長(zhǎng)宿萼長(zhǎng)比等指標(biāo)均處于最高水平，但單株百果重較低。2．基地梔子分子鑒定。從12個(gè)RAPD引物中篩選出3個(gè)引物，共擴(kuò)增出150條DNA條帶，其中146條為

7、多態(tài)性條帶，多態(tài)性條帶比率為93．33％。獲得了能有效區(qū)別14個(gè)梔子的多態(tài)性RAPD指紋圖譜。聚類結(jié)果顯示14個(gè)樣品梔子形成2支，其中2號(hào)、6號(hào)首先聚類成一支，其它樣品梔子形成另一大支。12個(gè)樣品形成的大支中的梔子再聚類成4個(gè)亞支，其中1號(hào)、3號(hào)聚類成第1個(gè)亞支，10號(hào)、11號(hào)、13號(hào)、12號(hào)聚類成第2個(gè)亞支，4號(hào)、7號(hào)、14號(hào)、5號(hào)聚類成第3個(gè)亞支，8號(hào)、9號(hào)聚類成第4個(gè)亞支。第1亞支和第2亞支優(yōu)先聚類，第3亞支和第4亞支形成另一分枝。分子鑒定進(jìn)一步確認(rèn)14個(gè)樣品間存在差異；通過和形態(tài)聚類的對(duì)比，可見分子鑒定結(jié)果與形態(tài)鑒定

8、結(jié)果相似。3．篩選了優(yōu)質(zhì)品系。七大類梔子的有效成分含量和產(chǎn)量測(cè)定結(jié)果表明：有效成分最高的為類群四，但其產(chǎn)量最低；產(chǎn)量最高的是類群一，但其有效成分較低；類群六的三種有效成分均較高，產(chǎn)量也較大，是優(yōu)良的梔子品系。建議基地以后在優(yōu)良品系選種的時(shí)候可以優(yōu)先考慮類群六的植株(即8號(hào)和9號(hào)梔子)作為種