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1、萬方數(shù)據(jù)學校代碼：10225學號：S14538學位論文大豆根際解磷菌分離及其定殖分析指導(dǎo)教師姓名：申請學位級別：論文提交日期：授予學位單位：郎敬楊洪一副教授東北林業(yè)大學碩士學科專業(yè)：微生物學2014年月論文答辯日期：2014年6月東北林業(yè)大學授予學位日期：2014年月答辯委員會主席：論文評閱人：許修宏葛菁萍宋金柱聾必櫛素大擎萬方數(shù)據(jù)UniversityCode：10225RegisterCode：S14538DissertationfortheDegreeofMasterIsolationofPhosphate·-solubilizin
2、gBacteriainSoybeanRhizosphereandtheAnalysisoftheColonizationforBacteriaCandidate：Supervisor：AssociateSupervisor：AcademicDegreeAppliedfor：Speciality：Dateof0ralExamination：University：LangJingHongyiYangMasterofScienceMicrobiologyJune，2014NortheastForestry萬方數(shù)據(jù)摘要土壤中磷元素缺乏使植物的生
3、長受到嚴重影響，人為向土壤中施加化學磷肥，可在一定程度上緩解缺磷現(xiàn)象，但植物對化學磷肥的吸收和利用不足25％，造成資源浪費，并且殘留在土壤中的化學磷肥還會引起土壤板結(jié)，形成惡性循環(huán)。因此，當前生物磷肥的研究倍受科學家們的關(guān)注。本研究利用PVK平板篩選結(jié)合搖瓶復(fù)篩，對東北地區(qū)大豆根際土壤樣本中的解磷菌進行了篩選及鑒定，并對解磷菌的應(yīng)用效果以及其在植物根際土壤中的定殖情況進行分析。1、從東北各地區(qū)大豆田選取土壤樣品，利用PVK平板初分離法結(jié)合NBRIP搖瓶復(fù)篩，成功篩選出高效解磷菌菌株。此外，還利用鉬藍比色法在搖瓶復(fù)篩階段對這些菌株進行了解
4、磷能力的測定。2、利用CTAB法提取細菌總DNA，以提取的細菌DNA為模板，用細菌通用引物進行PCR，將PCR產(chǎn)物純化后進行序列測定。測序結(jié)果顯示：肇東1號菌株、阿城1號菌株與海倫1號菌株與巨大芽孢桿菌序列相似度最高；北安4號菌株與枯草芽孢桿菌序列相似度最高。此外，還利用普通光學顯微鏡及掃描電鏡對菌株進行了形態(tài)學鑒定。3、在盆栽實驗中，測定了施入解磷菌前后的大豆根際土中的可溶性磷含量，結(jié)果顯示，施入解磷菌后的大豆根際土較施入解磷菌前的土壤中可溶性磷含量明顯增多；用同樣的方法測定施入解磷菌前后一些處理中大豆葉片中的磷含量也有一定的升高。4
5、、用處理過的細沙作為介質(zhì)，將一定量的難溶性的磷化物(Cas(P04)2)均勻混合于細沙中，加入配制好的培養(yǎng)液，將解磷菌接種在由難溶性磷化物作為唯一磷源的細沙培養(yǎng)基上，在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間后分別用直接浸提法和快速消煮法處理培養(yǎng)物，用鉬藍比色法測定其中可溶性磷的含量，結(jié)果顯示加入解磷菌增加了可溶性磷含量。5、分別提取加入解磷菌前后的大豆根際土的土壤細菌。e2,DNA，用帶“GC夾”的引物進行PCR擴增，將PCR純化后的產(chǎn)物進行變性梯度凝膠電泳，分析解磷菌在土壤中的定殖情況，結(jié)果顯示兩株解磷菌菌株可能能夠在大豆根際土壤中有效定殖。關(guān)鍵詞
6、菌株篩選，解磷細菌，定殖，DGGE，解磷能力萬方數(shù)據(jù)AbstractLackofphosphorusinsoilaffectedseverelythegrowthofplants．Itcanreducethephenomenonofphosphorusdeficiencytosomeextentbyaddingthechemicalphosphorusfertilizerartificiallyinthesoil，butitseffectiveutilizationislessthan25％．Therefore，thiscanresul
7、tinwasteofresource．Inaddition，theremnantchemicalphosphorusfertilizerinthesoilalsocancausesoilhardening，SOitiseasytoformaviciouscircle．Currently，theresearchaboutbiologicalphosphorusfertilizerattractedtheattentionofmanyscientists．OnthebasisofPVKplatescreeningcombinedwithsh
8、akeflaskscreeningmethod，thestudyscreenedandidentifiedthephosphate-solubilizingbacteriafromthesoybean’Sr
