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1、淀粉酶糖蛋白在BME-UV腫瘤壞死要素增加在人乳腺表皮細(xì)胞體外模型的表達(dá)作者：略摘要：糖蛋白是一種屬于ATP結(jié)合盒基因超家族的噴流泵可以影響藥物的利用度和藥性。乳腺表皮細(xì)胞顯示不同的藥物運(yùn)輸者，包括糖蛋白，即使在比較低的程度。在炎癥期間，和上皮屏障功能變化聯(lián)系起來(lái)的是，促炎性因子，如腫瘤壞死淀粉在奶和血清中是升高的。在這項(xiàng)研究中，TNF-A的作用調(diào)節(jié)確定為BME-UV細(xì)胞中，一個(gè)不朽的牛乳房上皮細(xì)胞株。糖蛋白和核苷酸蛋白質(zhì)生產(chǎn)在BABCCB1的表現(xiàn)，基因編碼糖蛋白，在TNF-A24小時(shí)曝光后增加。最高的觀察效果是在TNF-A曝光72小時(shí)后，蛋白質(zhì)和核苷酸表現(xiàn)也在
2、TNF-A處理120小時(shí)候顯著增加，但低于72小時(shí)后觀察到的效果。從頂點(diǎn)到幾點(diǎn)的地高辛流量，糖蛋白集體，在TNF-A曝光后降低。當(dāng)維拉帕米時(shí)得到逆轉(zhuǎn)，已知化合物和糖蛋白的作用，和地高辛一起添加到供體室。丙磺舒,一種和有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白產(chǎn)生反應(yīng)的化合物，不是糖蛋白，沒(méi)有增加地高辛的流出。該模型對(duì)于理解的乳房上皮屏障功能具有重要意義,提供糖蛋白在奶和血清中積累或者排除外源性物質(zhì)作用的深刻觀察。12介紹：不同動(dòng)物的身體由物理屏障建立和修改容積和成分包括物質(zhì)成分而區(qū)分不同。生物屏障功能的概念已經(jīng)轉(zhuǎn)向了從靜態(tài)的屏障,復(fù)雜的交通系統(tǒng),包括各種膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。射流泵是一個(gè)家庭的A
3、TP-dependent運(yùn)輸?shù)鞍妆磉_(dá)在幾家主要報(bào)導(dǎo)生理障礙包括血腦屏障(BBB)腎、小腸和胎盤[1-3]乳腺上皮屏障,絕大多數(shù)的血漿和牛奶的特征，表達(dá)各種藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白包括糖蛋白。糖蛋白是一種屬于ATP結(jié)合盒基因超家族的噴流泵，由于其組織分布和細(xì)胞定位糖蛋白在外源性物質(zhì)吸附、分配和消除發(fā)揮重要作用，例如，糖蛋白在洗涮腸道上皮細(xì)胞發(fā)揮作用，限制吸收和促進(jìn)分泌口服給藥的腸道腔內(nèi)。在肝臟，糖蛋白在微觀肝細(xì)胞表面，促進(jìn)排泄的藥物及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行分子、毒素的膽汁。在腎臟，糖蛋白是表現(xiàn)在頂端表面近端腎小管上皮細(xì)胞襯里，在它可以調(diào)節(jié)消除內(nèi)源性代謝廢物產(chǎn)品和外源性代謝物。在例如血
4、腦屏障等生物屏障方面，表現(xiàn)在內(nèi)皮細(xì)胞膜的毛管處，那里的藥物或毒素伸出回毛細(xì)血管,所以不會(huì)到達(dá)大腦嗎。糖蛋白可以表現(xiàn)為不同的因素，12包括調(diào)制藥物、毒劑、熱激、炎癥、孕婦及哺乳期。幾個(gè)體外和體內(nèi)的調(diào)查表明，促炎細(xì)胞因子和前炎癥細(xì)胞因子如：TNF-A改變糖蛋白的效果。這些細(xì)胞激素的影響,出現(xiàn)在不同層次的調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄,包括要素和轉(zhuǎn)錄后。在炎癥反應(yīng)中，可變化有關(guān)乳房上皮屏障功能的細(xì)胞因子,前炎性細(xì)胞因子，如TNF-a提高的血清和牛奶。TNF-a顯著增加是牛奶和血清中大腸桿菌和大腸脂多糖浸泡乳頭溢液乳腺，此外,暴露了牛從外周血單核細(xì)胞對(duì)金黃色葡萄球菌enterotoxins3
5、h導(dǎo)致TNF-a快速生產(chǎn)水平達(dá)到了48小時(shí)然后最大下降了96小時(shí)。前炎性細(xì)胞因子的影響TNF-a條例的射流泵在乳房上皮細(xì)胞中尚未被報(bào)導(dǎo)。Whole-animal模型用于研究前沿性細(xì)胞因子表現(xiàn)上和糖蛋白影響總體調(diào)控炎癥信息活性。然而，促炎性細(xì)胞因子的影響在調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)上調(diào)控糖蛋白發(fā)布的一系列的內(nèi)源性細(xì)胞復(fù)雜。因此,容易加工的體外模型提供的答案為了闡明特定的角色煽動(dòng)性的光調(diào)變器。牛乳腺上皮細(xì)胞一個(gè)不朽的線(BME-UV)應(yīng)用于當(dāng)前的研究。該細(xì)胞株曾被選為blood-milk屏障模型由于其表達(dá)能力,運(yùn)輸?shù)牡鞍踪|(zhì)，建立一個(gè)細(xì)胞極性與規(guī)范的相鄰間細(xì)胞緊密連接,建立跨上皮電阻
6、,類固醇激素及其反應(yīng)。本研究的目的是確定細(xì)胞因子的影響表現(xiàn)上TNF-a和活性的BME-UV糖蛋白細(xì)胞。材料與方法12TNF-a調(diào)節(jié)細(xì)胞基因表達(dá)的影響在培養(yǎng)細(xì)胞bymeasuringmRNABME-UV確定和蛋白水平TNF-a暴露后為選定的時(shí)間。影響滲透上皮屏障擴(kuò)散進(jìn)行了研究,采用化合物與糖蛋白進(jìn)行互動(dòng)。細(xì)胞培養(yǎng)BME-UV細(xì)胞的培養(yǎng)條件下,類似于那些先前描述的細(xì)節(jié)。簡(jiǎn)而言之,剩余BME-UV細(xì)胞成長(zhǎng)到65-75%在25平方厘米塑料文化燒瓶中。分離和分散細(xì)胞被播種在滲透聚酯的支持，使用不對(duì)稱媒體飼養(yǎng)。典型牛的媒介，含有乳糖和小的電解質(zhì)濃度相近,此鏡血清。頂端方面被
7、暴露在頂端牛介質(zhì)(ApM)的低乳糖成分electrolyte-high像離子組成的牛奶。TBM的組成和ApM被報(bào)道出現(xiàn)。這些細(xì)胞被孵化入預(yù)熱371C/fhumidified氛圍中含5%的二氧化碳，媒體在頂端和basolateral方面的細(xì)胞被刷新日?qǐng)?bào)，細(xì)胞被保存在文化對(duì)滲透性支持了兩周,形成一個(gè)分級(jí)、極化和電緊前實(shí)驗(yàn)。所有的單層。前沿性細(xì)胞因子孵化條件：細(xì)胞培養(yǎng)在混合和暴漏在濃度200g/ml的重組牛TNF-A中24,72和120小時(shí)在獲得RNA和蛋白質(zhì)或者利用它們進(jìn)行載體研究之前。在這個(gè)范圍內(nèi)TNF-a濃度也已經(jīng)在牛的乳腺炎日常記錄。用電成對(duì)細(xì)胞過(guò)程中,沒(méi)有暴
8、露在維持TNF-a(母親
