環(huán)境空氣中尼古丁的高效液相色譜測定方法

《環(huán)境空氣中尼古丁的高效液相色譜測定方法》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。

1、環(huán)境空氣中尼古丁的高效液相色譜測定方法摘要：目的建立高效液相色譜(HPLc)測定環(huán)境空氣中尼古丁的方法。方法樣品通過反相C18柱(150×4．6mm)分離，采用磷酸二氫鉀～乙腈溶液為流動相(流速為lml／min，采用等度洗脫)，通過紫外檢測器檢測(波長為260nm)。結(jié)果該方法標準曲線的相關系數(shù)為0．99993，工作曲線的相關系數(shù)為0．9995，檢出限為4．03×10-3ug/ml，測定下限為3．12×10-2ug/ml，對低、中、高3濃度尼古丁加標回收率為87．4％、88．5％、90．8％，對低、中、高3濃度尼古

2、丁測定的相對標準偏差分別為0．88％、0．52％、1．1％，對低、中、高3濃度尼古丁的解吸率測定分別為92．3％、94．3％、94．6％，以及采樣器中樣品穩(wěn)定性實驗，表明11d內(nèi)樣品均穩(wěn)定。結(jié)論：該方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，操作簡便，儀器易普及。關鍵詞：高效液相色譜：環(huán)境卒氣中尼古?。粰z測目前．國內(nèi)外尼古丁的測定方法有很多種，例如可以采用LC—MS、LC—MS—MS、GC—MS的方法．但由于這些方法中儀器較昂貴，儀器保有量很低，無法在基層單位推廣。由于用高效液相色譜檢測尼古丁的方法具有靈敏度高．重現(xiàn)性好．且儀器易普及

3、的特點。適用于實驗室推廣使用。因為本方法不僅可以監(jiān)測環(huán)境空氣中尼古丁的濃度。還可以測定人體生物樣品如尿液、唾液和頭發(fā)中的尼古丁含量．從而可以比較準確地評價人群的暴露水平。為制訂科學的控煙措施及評價控煙效果提供技術支持。材料與方法1方法原理環(huán)境中氣態(tài)尼古丁采用被動式采樣器采樣．采樣后將4％NaHS04-5％甘油溶液浸漬的玻璃纖維濾膜經(jīng)氫氧化鈉洗脫和正庚烷萃?。谳腿∫褐屑欲}酸混勻，用氮吹儀吹至近干，用流動相定容。使用C18反相色譜柱分離．紫外檢測器檢測，檢測波長為260nm，以保留時間定性，以峰面積定量。2實驗儀器、

4、材料和試劑2．1實驗儀器和材料LC7000高效液相色譜儀?？焖倩靹蚱?，超聲波清洗器、氮吹儀，玻璃纖維濾膜(d=42mm)，被動式采樣殼體(由中疾控提供)，10ul和50ul微型注射器，1．5ml樣品瓶2．3實驗試劑尼古丁(標準品)，磷酸二氫鉀(分析純)，磷酸(分析純)，鹽酸(分析純)，乙腈(色譜純)，庚烷磺酸鈉(色譜純)，正庚烷(色譜純)，甘油(分析純)，氫氧化鈉(分析純)。3樣品采集3．1尼古丁吸收液的配置準確稱量20．09gNaH-S04和25．0g甘油，用純水定容于500ml，配制成4％NaHS04-5％甘油

5、的尼古丁吸收液。3．2濾膜制備選擇合格濾膜．對光檢查無針孔或折縫；將玻璃纖維濾膜在馬弗爐中450℃烘烤2h．放入干燥器中冷卻至室溫：從干燥器中取出玻璃纖維濾膜。用尼古丁吸收液浸漬0．5h后．取出置于干燥器中晾干備用。3．3采樣器安裝被動式采樣器由殼體、擋風層和吸收層組成。殼體包括前蓋、壓環(huán)、托板和底座，擋風層為核孑L濾膜和滌綸紗網(wǎng)．吸收層為浸漬尼古丁吸收液的玻璃纖維濾膜。安裝好采樣器后，放入鋁箔袋中。封口。4實驗分析步驟-3-4．1流動相的制備準確稱取1．09g磷酸二氫鉀，用超純水溶解至接近于lL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值

6、為3，定容至lL，準確加入0．0082g庚烷磺酸鈉，混勻，通過0．45um過濾膜過濾，制得的磷酸二氫鉀溶液與乙腈比例為9：l混勻。4．2色譜條件色譜柱C18柱150mm×4．6mm5um．柱溫為25℃，SPD檢測器，檢測波長為260nm．流動相流速為1ml／min。4．3標準溶液制備準確稱取10．1mg(99％的尼古丁)于10ml容量瓶中，加入流動相定容，超聲3min。配成1.0ug/ul的尼古丁(1)液，取(1)液1ml于10ml容量瓶中，用流動相定容，得0.1ug/ul的尼古丁(2)液。4．4尼古丁標準曲線的制

7、備分別移取尼古丁(2)液5ul、10ul準確加入1ml流動相，混勻，得0．5ug/ml、lug/ml。又分別移取尼古丁(1)液2u1、4ul、8ul、16ul準確加入1ml流動相，混勻，得2ug/ml、4ug/ml、8ug/ml、16ug/ml標準系列，得到尼古丁的標準系列分別進樣5ul進行分析，各點進樣3次，各點對應峰面積取平均值．以標準系列質(zhì)量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標．繪制峰面積和濃度的標準曲線。4．5尼古丁工作曲線的制備分別移取尼古丁(2)液5ul、10ul，移取尼古丁(1)液2ul、4ul、8ul、16

8、ul置于制備好的玻璃纖維濾膜上，分別放于10ml比色管中．各加入5．0m11.5mol／L的Na0H和準確加入2．0ml正庚烷充分混勻后在恒溫65℃超聲30min，取出于漩渦混勻器上．混勻3min．取正庚烷層(1．8ml)，加l0“l(fā)鹽酸，65℃超聲混勻3min，漩渦2min，氮吹近干，用lml流動相定容．65℃水浴超聲3min漩渦2min徹底解析出尼古丁。