ppar--γ在增生性瘢痕中的表達(dá)及意義

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1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文PPAR--γ在增生性瘢痕中的表達(dá)及意義姓名：張義鵬申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：高偉陽2012-05-27溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位畢業(yè)論文PPAR-Y在增生性瘢痕中的表達(dá)及意義中文摘要目的研究過氧化物酶體增殖物激活受體一Y(peroxisomeproliferator—activatedreceptor—gamma，PPAR—Y)在人正常皮膚組織及增生性瘢痕組織中的表達(dá)情況及PPAR—y激動劑對體外培養(yǎng)的增生性瘢痕成纖維細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)的影響。討論P(yáng)PAR—Y在增生性瘢痕形成

2、過程中的作用，為進(jìn)一步研究增生性瘢痕發(fā)病機(jī)制提供基礎(chǔ)，并為增生性瘢痕的臨床防治提供新的治療靶點(diǎn)。方法1．臨床采集正常皮膚組織標(biāo)本1l例及增生性瘢痕組織標(biāo)本15例，使用免疫組織化學(xué)法對正常皮膚組織和增生性瘢痕組織中PPAR—Y蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測。2．臨床采集正常皮膚組織及增生性瘢痕各9例，組織塊法原代培養(yǎng)正常皮膚成纖維細(xì)胞及增生性瘢痕成纖維細(xì)胞。3．取正常皮膚組織和增生性瘢痕組織培養(yǎng)出來的的第三代成纖維細(xì)胞，應(yīng)用細(xì)胞免疫化學(xué)技術(shù)檢測細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中的成纖維細(xì)胞特異性蛋白vimentin的表達(dá)，鑒定培養(yǎng)的成

3、纖維細(xì)胞。4．使用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)及免疫蛋白印跡技術(shù)檢測正常皮膚成纖維細(xì)胞及增生性瘢痕成纖維細(xì)胞中PPAR—V在mRNA水平及蛋白水平的表達(dá)量。5．使用MTT法檢測PPAR-Y激動劑曲格列酮對成纖維細(xì)胞的增殖活性的影響。6．使用ELISA法檢測TGF—p。及曲格列酮對增生性瘢痕成纖維細(xì)胞分泌I型膠原的影響。結(jié)果1．免疫組織化學(xué)正常皮膚組織和增生性瘢痕均有PPAR—Y蛋白的表達(dá)。表達(dá)主要分布于毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)和真皮層的成纖維細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析顯示PPAR—V在增生性瘢痕組織(28．39±6．1

4、2)中較正常皮膚組織(59．24±10．35)中表達(dá)低，(P

5、酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)PPAR—YmRNA在正常皮膚成纖維細(xì)胞和增生性瘢痕成纖維細(xì)胞中均有表達(dá)。正常皮膚成纖維細(xì)胞中PPAR—YmRNA相對表達(dá)量為14．62％士2．92％，增生性瘢痕成纖維細(xì)胞中PPAR—YmRNA的相對表達(dá)量為7．08％士3．04％，增生性瘢痕組PPAR—YmRNA水平相對表達(dá)量顯著低于正常皮膚成纖維細(xì)胞，(P

6、48％士4．13％，增生性瘢痕組為9．40％士2．23％。正常成纖維細(xì)胞PPAR—Y蛋白水平的相對表達(dá)量顯著高于增生性瘢痕組，(PO．05)；各實(shí)驗(yàn)組組間比較，差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0．05)。7．ELISATGF—p。組(5ng／m1、lOng／ml、20ng／ml、50ng／m1)能夠增加增生性瘢痕成纖維細(xì)胞膠原1分

7、泌量，并呈劑量依賴效應(yīng)，(PO．05)。結(jié)論1．PPAR—Y在正常皮膚和增生性瘢痕中均有表達(dá)，且增生性瘢痕中PPAR—Y表達(dá)較正常皮膚低。2．TGF—13。干預(yù)培養(yǎng)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞能夠增加其I型膠原分泌量。3．PPAR—Y激動劑干預(yù)培養(yǎng)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞對其I型膠原分泌量無明顯影響。4．PPAR—Y激動

8、劑能夠拮抗TGF-p。誘導(dǎo)的增生性瘢痕成纖維細(xì)胞I型膠原分泌增多效應(yīng)。5．PPAR—Y可能參與了增生性瘢痕纖維化的形成過程，為今后病理性瘢痕形成機(jī)制的研究提供新的思路，并為該病的臨床有效治療提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。關(guān)鍵詞成纖維細(xì)胞；細(xì)胞培養(yǎng)；PPAR—Y；增生性瘢痕4TheExpressionandSignificanceofPPAR-YinHypertrophicScarABSTRACTObjectiveThisstudywa