肺癌細胞對順鉑耐藥的fabrca途徑機制研究

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1、江蘇大學碩士學位論文肺癌細胞對順鉑耐藥的FA/BRCA途徑機制研究姓名：胡一明申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學指導教師：李堅20120609江蘇大學碩士學位論文摘要目的：通過檢測經(jīng)順鉑(DDP)處理后的肺癌細胞增殖抑制率變化，以及肺癌細胞FANCC、FANCF、FANCLmRNA和蛋白表達水平的變化，研究FA／BRCA途徑的DNA損傷修復功能在肺癌細胞對DDP耐藥機制中的作用。方法：體外培養(yǎng)肺癌細胞株A549、Calu．1和SK．MES．1，采用CCK．8法分別測定經(jīng)不同濃度DDP處理三個肺癌細胞株24h、48h后的細胞增殖抑制率。用不同濃度DDP處理肺癌細胞后，收集

2、細胞，分別提取總RNA和總細胞裂解物，采用實時熒光定量RT-PCR技術(shù)(QRT-PCR)測定三個肺癌細胞株中的FANCC、FANCF、FANCLmRNA表達，應用Westemblotting檢測它們的蛋白表達。結(jié)果：(1)肺癌細胞A549和Calu．1的細胞增殖抑制率均隨DDP濃度和作用時間的不同而變化，呈劑量依賴性(尸

3、g／ml和20lag／ml濃度DDP處理48h后，F(xiàn)ANCCmRNA表達明顯增高(尸

4、增高后降低(尸

5、癌細胞Calu．1、SK．MES．1對DDP的耐藥性顯著高于肺癌細胞A549。肺癌細胞Calu—l和SK．MES．1對DDP耐藥性增高的機制之一可能是FA／BRCA途徑中FANCF和FANCC蛋白高表達的結(jié)果，F(xiàn)A／BRCA途徑的DNA損傷修復功能在肺癌細胞對DDP耐藥中發(fā)揮了一定的作用。關(guān)鍵詞：肺癌細胞；順鉑；FA／BRCA途徑；藥物耐受江蘇大學碩士學位論文ABSTRACT0bjectiveTostudytheeffectoffanconianemia(FA／BRCA)pathwayinthemechanismofcisplatin(DDP)resistanceo

6、flungcancel"cellsbyanalyzingtherelationshipbetweentheproliferationinhibitionrateoflungcancercellsandFANCC，F(xiàn)ANCFandFANCLmRNA，andproteinexpressionaftertreatmentofvariantconcentrationcisplatin．MethodsTheproliferationinhibitionratesoflungcancercelllinesA549，Calu-1andSK·MES-1aftertreatmento

7、fvariantconcentrationDDPweremeasuredusingtheCCK-8assay．Theexpressionlevelsof’FANCC，F(xiàn)ANCFandFANCLmRNAweredetectedbyreal-timefluorescentquantitativePCR(RFQ—PCR)．TheexpressionsofFANCC，F(xiàn)ANCFandFANCLproteinsweredeterminedbyWesternblotting．Results(1)Theratesofproliferationinhibitingofthree