南方小花蝽孤雌生殖的微衛(wèi)星標(biāo)記驗(yàn)證

南方小花蝽孤雌生殖的微衛(wèi)星標(biāo)記驗(yàn)證

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1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文南方小花蝽孤雌生殖的微衛(wèi)星標(biāo)記驗(yàn)證姓名:王小芬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師:周興苗201206南方小花蝽孤雌生殖的微衛(wèi)墨標(biāo)記驗(yàn)證摘要南方小花蝽(OriussimilisZheng)是我國的特有物種,它廣泛分布于我國南方農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中的一種重要的捕食性天敵。國內(nèi)已有大量的關(guān)于南方小花蝽分類學(xué)、生物學(xué)、及生態(tài)學(xué)方面的研究報(bào)道,但在對(duì)于南方小花蝽是否存在孤雌生殖這一生殖方式方面還有爭議。為明確南方小花蝽的生殖方式,揭示其孤雌生殖的可能性,本文從室內(nèi)脅迫環(huán)境條件下和分子生物學(xué)水平上兩個(gè)方面系統(tǒng)的研究了南方小花蝽的生殖方式,其主要結(jié)果如下:一脅迫

2、環(huán)境下南方小花蝽孤雌生殖的發(fā)生南方小花蝽在室內(nèi)飼養(yǎng)時(shí),其繁殖和發(fā)育主要受溫度、光照、濕度、食物種類和食物豐歉5個(gè)因素的影響。本文在室內(nèi)環(huán)境下,將這5個(gè)不同因素分別設(shè)置5個(gè)不同水平,設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),研究南方小花蝽在室內(nèi)脅迫環(huán)境下的孤雌生殖現(xiàn)象,試驗(yàn)未觀察到南方小花蝽處女雌成蟲的產(chǎn)卵現(xiàn)象;但是在溫度28℃、濕度70%、光照L14:D10,以花粉+棉蚜/薊馬飼養(yǎng)并給以充足的食物來源,將20頭南方小花蝽處女雌成蟲放在一起飼養(yǎng)時(shí)會(huì)有產(chǎn)無效卵的現(xiàn)象。二南方小花蝽自然種群孤雌生殖的分子驗(yàn)證根據(jù)微衛(wèi)星位點(diǎn)的側(cè)翼序列高度保守,其部分引物在起源相近的物種中可以通用的特點(diǎn),本文利用從NCBI上搜索到的與O

3、riussimilisZheng同屬小花蝽科的O.strigicollis和0.sauteri共19個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)對(duì)南方小花蝽自然種群的個(gè)體基因組分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增,將擴(kuò)增的結(jié)果進(jìn)行6%的變性聚丙烯酰胺膠電泳分析,最終篩選出6個(gè)最合理的位點(diǎn)并對(duì)其PCR體系的配制和PCR擴(kuò)增程序進(jìn)行了優(yōu)化。進(jìn)入孤雌生殖的卵的有三種不同的發(fā)育途徑:(1)由卵直接發(fā)育成為新個(gè)體,其基因型為單倍體;(2)卵以自合的方式恢復(fù)二倍體后發(fā)育成新的個(gè)體,這種方式產(chǎn)生的孤雌生殖后代均為二倍體且其基因型只有兩種:純合-了或者與母體基因型完全一樣;(3)卵核不經(jīng)過減數(shù)分裂直接發(fā)育成新個(gè)體,其基因型與母體完全一樣。利用上述

4、篩選到的6個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)對(duì)對(duì)南方小花蝽自然種群的個(gè)體進(jìn)行分子水平的研究中沒有檢測(cè)到純合了的個(gè)體也沒有至少兩個(gè)個(gè)體在6個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)上的基因型完全一致的現(xiàn)象。因此本研究沒有發(fā)現(xiàn)南方小花蝽的孤雌生殖現(xiàn)象。關(guān)鍵詞:南方小花蝽;生殖方式;微衛(wèi)星位點(diǎn);孤雌生殖AbstractO廠f淞similisZheng(Hemiptera:Anthocoridae)isChina-sendemicspecies,anditisaIl1mpolrtantpredatorwidelydistributeinagroecosystemsofSouthChina.Alotof11terature8we。erepor

5、tedonthetaxology,characteristicsofbiologyandecolgyof0.similisZheng.Butlnwhe吐1ertheparthenogenesisreproductiveisofthereproductivewayofO.j砌加Zheng1scontroversial·InordertogettheknowledgeofthereproductivewavofO.s‘m腑么hengandtorevealthepotentialoftheparthenogenesisreproductivein0.s加船乞neng,servmgaSmd

6、oorstressenvironmentconditionsandthelevelofmolecularbi0109Y.1nthistwoaspectsthispaperhadsystematicallystudiedthereproductivewayof0.similisZheng.Themainconclusionsareasfoliows:JTheparthenogenesisreproductiveofO.similisZhenginindoorstressenvironnlentInthemdoorrearingofO.similisZheng,themianlyfac

7、torsofitsreproductionanddeVeIopmentaretemperature,light,humidity,thevarietyoffoodsandfoodstages.thusWeusethis5factorsdesignedthefivefactorsof5levelsomlogonaItest.InthjstestWeneVerobservedthespawningphenomenonoffemaleQsimilisZheng.Butin鋤

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