杉木遺傳多樣性的issr研究

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1、TheStudyonthegeneticdiversityofCunninghamiaLanceolataByISSRbyHaoBoboAthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScience1nGeneticslnCentralSouthUniversityofForestryandTechnology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictChangshaHunan410004，P．R．CHINASupervisor

2、ProfessorXUGangbiaoMay,2014燃煳中南林業(yè)科技大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導師的指導下獨立進行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品，也不包含為獲得中南林業(yè)科技大學或其他教育機構的學位或證書所使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均己在文中以明確方式表明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔。作者簽名：泰}碉擁陽f髟年歹月力影日中南林業(yè)科技大學學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，

3、同意學校保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件或電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權中南林業(yè)科技大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。本學位論文屬于：1、保密口，在年解密后適用本授權書。2、不保密口。(請您在以上相應方框打“√’’)作者簽名：赤閽捌力f￥年』月肜日翩囂夠加中氣歲月矽日摘要杉木(Cunninghamialanceolata(Lamb．)HooK)屬杉科(Taxodiaceae)杉木屬的高大喬木，為第四紀冰期的孑遺植物，是我國南方最主要的造林樹種之一，分布于我國南方

4、16個省區(qū)，其中，黔東南、湘西南、桂北、粵北、贛南、閩北和浙南等地區(qū)是我國杉木的重點產(chǎn)區(qū)。本研究擬采用ISSR(inter-simplesequencerepeats)分子標記，對杉木全分布區(qū)的種源進行遺傳多樣性分析，以期從分子水平上全面揭示杉木種源遺傳變異分布格局，探討杉木種源間的親緣關系，為杉木遺傳資源管理及高世代遺傳改良提供分子依據(jù)。主要研究結果如下：(1)采用正交設計，建立了穩(wěn)定的、可重復的ISSR．PCR擴增反應體系：201aL反應體系為：M92+1．5mmol·L～，dNTP0．3mmol·L～，引物0．7lxmol·L～，DNA70ng，Taq酶

5、1U。擴增程序為：94℃預變性5min；94℃變性40S，退火40s(退火溫度隨引物的變化而不同)，72℃延伸2min，38個循環(huán)；72℃延伸7min；4oC保存。(2)利用最佳ISSR．PCR反應體系，從100條引物中篩選出穩(wěn)定的、重復性高的9條引物對40個種源進行ISSR．PCR擴增，9條ISSR引物共檢測出133條帶，其中122條多態(tài)性條帶，多態(tài)條帶百分率(PPB)為91．73％，各種源PPB和Shannon表型多樣性指數(shù)(Hpop)分別為37．46％～55．75％和0．2015～0．3445，這表明杉木種源具有較高的遺傳多樣性，種源間遺傳分化較大。其中

6、，湖南會同、安徽涇縣、廣西融水、貴州黎平種源遺傳多樣性最高，江蘇句容、河南新縣、云南馬關、富源種源遺傳多樣性最低。分子方差分析(AMOVA)揭示，種源間和種源內(nèi)遺傳變異分別占總變異的46．51％和53．49％，種源間遺傳分化極顯著(西sT=0．4651，P

7、鍵詞：杉木；種源；ISSR標記；遺傳多樣性ABSTRACTCunninghamiaLanceolata，akindofarborsinTaxodiaceaeandapreciousplantofquatemaryiceage，isoneofthemainspeciesforafforestationinsouthernChina·DistributedinsixteenprovincesandregionsinsouthChina,distributionareaofC·lanceolataspanstenlatitudesfromnorthtosouthan

8、d15longitudesfromea