高溫脅迫下番茄slmpk1的作用機理研究

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1、朱曉紅:高溫脅迫下番笳SIMPK!的作用機理研究目錄Abstract..............................................................................................................................、-,中英文對照詞????????????????????????????.VIIl文獻(xiàn)綜述??????????????????????????????.11.1植物對高溫脅迫的響應(yīng)??????????????????????l1.1.1Ca2+信號????????

2、?????????????????????????..21.1.2熱擊轉(zhuǎn)錄因子???????????????????????.31.1.3熱擊蛋白?????????????????????????.31.2植物MAPK???????????????????????????????????.41.2.1MAPK級聯(lián)系統(tǒng)??????????????????????.41.2.2MAPK分類???????????????????????????????.51.2.3已知的MAPK級聯(lián)途徑???????????????????61.3番茄MAPK的研究進(jìn)展????????????????

3、?????.71.4MAPK與高溫??????????????????????????91.5本研究的目的及意義??????????????????????.112材料與方法?????????????????????????????122.1材料???????????????????????????????????????122.1.1植物材料?????????????????????????122.1.2菌種及載體????????????????????????122.1.3酶及相關(guān)試劑???????????????????????122.1.4相關(guān)溶液配制??????????

4、?????????????132.2實驗方法???????????????????????????..142.2.1pGSAl285-SlMPKl-RNAi構(gòu)建????????????????142.2.2pGSAl285.SIMAPKl.RNAi轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌????????????.172.2.3農(nóng)桿菌介導(dǎo)的番茄轉(zhuǎn)化???????????????????172.2.4轉(zhuǎn)基因植株鑒定??????????????????????192.2.5表型鑒定?????????????????????????202.2.6生理指標(biāo)分析???????????????????????202.2。7

5、相關(guān)基因的定量PCR分析?????????????????.232.2.8誘餌載體構(gòu)建???????????????????????232.2.9誘餌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化酵母?????????????????????232.2.1O重組誘餌質(zhì)粒自激活及毒性檢測??????????????.242.2.11酵母雙雜交文庫篩選方法?????????????????.242.2.12陽性菌落pGADT7文庫質(zhì)粒測序分析????????????253結(jié)果與分析?????????????????????????????263.1伽KJ『干擾片段的選擇?????????????????????263.2

6、目的片段的克隆及其鑒定????????????????????..263.3pGSAl285.SIMPKl.RNAi的構(gòu)建與鑒定??????????????.273.4pGSAl285.SIMPKl.RNAi轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌???????????????.28II揚州大學(xué)碩士學(xué)位論文3.5農(nóng)桿菌介導(dǎo)的番茄轉(zhuǎn)基因?????????????????????283.6PCR鑒定????????????????????????????????????.293.7定量PCR鑒定?????????????????????????.303.8高溫誘導(dǎo)SIMPKl的表達(dá)????????????????

7、????.303.9研燃J『.RNAi提高番茄的耐高溫能力???????????????313.9.1長期高溫下SIMPKl.RNAi番茄的表型????????????313.9.2短期高溫下卿朋.I礬Ai番茄的表型????????????323.9.3高溫脅迫下.研^護(hù)KJ『.RNAi番茄存活率????????????333.9.4高溫脅迫下.卯^護(hù)KJ『.RNAi番茄葉片的葉綠素含量???????333.10SIMPK,.RNAi調(diào)控抗氧化系統(tǒng)????????????????

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