β-欖香烯對肺癌a549細(xì)胞放射治療增敏作用及可能機(jī)制初探 (1)

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1、中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明IYfJffl12JJJ2II19IJIl6Ifrl5rll1rlr8rill本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名：盤趙遺日期：泣么蘭：!

2、_9論文作者簽名：塑公匝日期：泣么蘭：!_y中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬中國醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為中國醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外)，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名：套叁逸指

3、導(dǎo)教師簽名：鳘!呈日期：Ⅻ主：笸：2目錄一、摘要1．中文論著摘要??????????????????????????12．英文論著摘要?????????????????????????．4二、英文縮略語???????????????????????????．8三、論文1．前言??????????????????????????????????????．．91．HU舌??????????????????????????????????????．．2．實(shí)驗(yàn)材料與方法??????????????????????

4、??．103．實(shí)驗(yàn)結(jié)果??????????????????????????．164．討論??????????????????????????????????????215。結(jié)論?????????????????????????????????????．．236．本研究創(chuàng)新性的自我評價(jià)?????????????????????247．參考文獻(xiàn)???????????????????????????．25四、附錄l、綜述??????????????????????????????????一272、在學(xué)期間科研成

5、績??????????????????????。393、致謝??????????????????????????????????．404、個(gè)人簡介??????????????????????????。41·中文論著摘要·13一欖香烯對肺腺癌A549細(xì)胞放射治療增敏作用及可能機(jī)制初探肺癌是嚴(yán)重危害人類生命和健康的常見疾病，肺癌的死亡率已成為惡性腫瘤之首。目前以手術(shù)為主的綜合治療仍然是大多數(shù)肺癌治療的主要治療手段，放射治療是有效的輔助治療手段之一。腫瘤細(xì)胞的放射敏感性是影響放療療效的重要原因。欖香烯是從姜科植

6、物溫郁金中提取的非細(xì)胞毒性的具有抗癌活性的國家二類抗癌新藥，對正常細(xì)胞及組織毒性非常低，副作用輕微，無明顯肝、腎功能損害，不發(fā)生骨髓抑制，不同于一般的細(xì)胞毒性化療藥物。多項(xiàng)研究表明欖香烯對腫瘤有抗癌效應(yīng)。凋亡抑制蛋f蘭I(inhibitorofapoptosisprotein，LAP)是抑制細(xì)胞凋亡的重要成分。Livin是最新近發(fā)現(xiàn)的一種IAP家族成員，其組織分布具有明顯的細(xì)胞選擇性，特異性表達(dá)于人的胚胎組織以及大多數(shù)人類實(shí)體瘤細(xì)胞。在正常成人組織及外周血中無表達(dá)或低表達(dá)。與另一凋亡抑制基因Bcl．2的分

7、布顯著不同，且Livin的表達(dá)與患者的預(yù)后密切相關(guān)。Livin的表達(dá)還與細(xì)胞增殖有關(guān)。關(guān)于欖香烯對腫瘤細(xì)胞的放射增敏作用機(jī)制的研究，主要是細(xì)胞周期改變及凋亡方面。而對其是否影響抑制凋亡基因Livin表達(dá)從而實(shí)現(xiàn)放療增敏作用未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)選用低細(xì)胞毒性的欖香烯乳聯(lián)合照射，通過四氮唑藍(lán)比色分析法(MTT法)檢測p．欖香烯乳對A549細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率；實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)(real．timePCR)檢測細(xì)胞Livin和Caspase．3mRNA相對表達(dá)量。觀察欖香烯乳對肺

8、腺癌A549細(xì)胞放射增敏作用及其對Livin和Caspase．3基因表達(dá)的影響。初步探討欖香烯乳放射增敏的分子機(jī)制，為中藥欖香烯作為放射增敏劑的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。目的本課題旨在研究p．欖香烯乳聯(lián)合照射作用肺腺癌A549細(xì)胞，通過四氮唑藍(lán)比色分析法、流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞凋亡的變化和通過實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)(real．timePCR)檢測凋亡抑制基因Livin的表達(dá)和Caspase．3的表達(dá)。初步探討：1．13-欖香烯乳影響肺腺癌