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《結(jié)核分枝桿菌抗原定量檢測(cè)技術(shù)的建立及其初步評(píng)價(jià)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明一秉承軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)風(fēng)和科研作風(fēng)，本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝之處外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得芏主醫(yī)學(xué)盤(pán)學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。論文作者簽字：氨!區(qū)綽簽字日期：之!!!年—．L月』日軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)聲明本學(xué)位論文作者完全了解星事醫(yī)堂盤(pán)學(xué)院對(duì)研究生在學(xué)其間撰寫(xiě)的論文知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)的相關(guān)規(guī)定。本人撰寫(xiě)的論文是在導(dǎo)師具體指導(dǎo)
2、下，并得到相關(guān)研究經(jīng)費(fèi)支持下完成，其數(shù)據(jù)和研究成果歸屬于導(dǎo)師和作者本人，知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬芏主醫(yī)學(xué)盤(pán)堂院。本人保證畢業(yè)后，以本論文數(shù)據(jù)和資料發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名第一單位仍然為星主匡堂盤(pán)堂墮。芏主匡堂盤(pán)堂院有權(quán)保留學(xué)位論文及其電子版，通過(guò)網(wǎng)站公布論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文、匯編以供查閱和借閱。(涉密和延期公開(kāi)學(xué)位論文在解密后適用本聲明)論文作者簽字：蠡!匡葺簽字日期：211蘭年—立月衛(wèi)日指導(dǎo)教師簽字：幺e，z絲p簽字日期：絲!!年—L月—旦日萬(wàn)方數(shù)據(jù)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文目錄一—、￡^—L刖舌????????．第一章結(jié)核分枝桿菌特異性抗原1實(shí)驗(yàn)
3、材料和方法??．．1．1實(shí)驗(yàn)材料??．．38KD、ESAT6和CFP的克隆表達(dá)1．1．1菌株和質(zhì)粒????????????．．161．1．2工具酶和試劑盒???????????．161．1．3試劑??????????????．．161．1．4待檢樣品?????????????．161．1．5儀器設(shè)備?????????????161．1．6試劑配制?????????????．171．2實(shí)驗(yàn)方法???????????????．191．2．1MTB特異性抗原ESAT6，38KD，CFPIO表位分析??．191．2．2原核表達(dá)載體的構(gòu)建??????????191．2．2．1pBVILl質(zhì)粒提取??
4、????一??．191．2．2．2PCR法合成MTB特異性抗原38KD、ESAT6、CFPl0201．2．2．3PCR產(chǎn)物的純化?????????201．2．2．4PCR產(chǎn)物及質(zhì)粒載體酶切??????．．211．2．2．5目的基因與載體連接????????211．2．2．6連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化?????????．211．2．2．7重組質(zhì)粒的鑒定?????????．2l1．2．3在大腸桿菌中誘導(dǎo)重組質(zhì)粒的表達(dá)及表達(dá)產(chǎn)物的純化?221．2．3．1克隆化基因的誘導(dǎo)表達(dá)???????．221．2．3．2蛋白的純化??????????．．221．2．4MTB特異性抗原的活性鑒定????????221．2．
5、5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析????????????．．232實(shí)驗(yàn)結(jié)果?????????????????．232．1MTB特異性抗原表位的確定??????????231萬(wàn)方數(shù)據(jù)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文2．2結(jié)核分枝桿菌特異性38KD、ESAT6、CFPIO基因的PCR擴(kuò)增?242．3表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定???????????．242．4目的蛋白的純化?????????????．272．5抗原活性鑒定??????????????273討論??????????????????．．284小結(jié)??????????????????．．29第二章結(jié)核分枝桿菌38KD—ESAT6一CFPIO融合基因的原核表達(dá)及純化?
6、?．301實(shí)驗(yàn)材料和方法???????????????．301．1實(shí)驗(yàn)材料???????????????．．301．1．1菌種??????????????．．301．1．2試劑盒??????????????301．1．3試劑??????????????．．301．1．4待檢樣品?????????????．301．1．5儀器設(shè)備?????????????．301．1．6試劑配制?????????????．301．2實(shí)驗(yàn)方法???????????????311．2．1質(zhì)粒的提取????????????．．311．2．2質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化????????????．．311．2．3陽(yáng)性克隆的鑒定?????
7、??????．311．2．4目的蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)??????????311．2．6蛋白的純化????????????．．311．2．7蛋白的活性鑒定???????????．321．2．8統(tǒng)計(jì)學(xué)分析????????????．．322實(shí)驗(yàn)結(jié)果?????????????????．322．1融合表達(dá)基因的質(zhì)粒提取??????????．．322．2融合蛋白陽(yáng)性克隆的鑒定??????????．．332．3融合蛋白的純化????????
