鈷相互作用的微生物選育及相關(guān)機(jī)理初探

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1、CIassifiedIndex：U．D．C：SouthwestUniversityofSc‘enceandTechnoIbcIenCeIe13n0IogyMasterDegreeThesiSStudyonMicrobiaIScreeningandBreedingforCobaltandtherelatedmechanismsGrade：Candidate：AcademicDegreeAppIiedfor．SpeciaIity：Supervisot：2011ZhangeMasterBotanyProf．ChenXiaomingApr．3，2014獨(dú)創(chuàng)性

2、聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得西南科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。簽名：劾強(qiáng)荻El期：勁f伊6：6關(guān)于論文使用和授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解西南科技大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文的復(fù)印件，允許該論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨荚撜撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存

3、論文。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)簽名：j堿導(dǎo)師簽名：刪日期：Ⅵ，鈀彳，‘西南科技大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文第1頁(yè)摘要微生物修復(fù)重金屬污染是一種廉價(jià)、高效、環(huán)境友好的修復(fù)方法，近年來(lái)成為研究的熱點(diǎn)。為了獲得微生物對(duì)去除Co(II)和氧化co單質(zhì)的效率和相關(guān)機(jī)理，本研究首先建立了微生物培養(yǎng)體系中co(II)的測(cè)定方法，通過(guò)平板初篩和搖床復(fù)篩獲得具有一定Co(II)耐受性的微生物，進(jìn)一步考察了這些微生物對(duì)Co(II)的去除能力、對(duì)Co單質(zhì)的氧化效率和Y輻照耐受性能，采用傅里葉變化紅外光譜(FTIR)探究細(xì)胞參與吸附作用的主要基團(tuán)，借助掃描電鏡(SE

4、M)探索細(xì)胞與Co(II)在細(xì)胞水平上的相互作用，主要研究結(jié)果如下：(1)微生物培養(yǎng)體系中co分析方法的構(gòu)建。研究發(fā)現(xiàn)微生物培養(yǎng)體系的pH和培養(yǎng)組分會(huì)嚴(yán)重干擾co的分光光度法測(cè)定，因此本研究對(duì)其進(jìn)行了進(jìn)一步的考察。a)Co(II)的分析方法構(gòu)建：當(dāng)培養(yǎng)基的pH為7．0～9．0時(shí)，LB、NA和TGY培養(yǎng)基對(duì)Co(II)澳J定的影響率超過(guò)了50％；培養(yǎng)基pH控制到5．o~6．0時(shí)，LB、NA和TGY培養(yǎng)基對(duì)Co(II)測(cè)定的影響率都控制在了5％以內(nèi)。b)co單質(zhì)的分析方法構(gòu)建：考察了真菌培養(yǎng)基組分NH4N03，NaN03，MgS04，蔗糖和葡萄糖對(duì)Co單

5、質(zhì)的氧化能力，結(jié)果表明NH4N03對(duì)鈷單質(zhì)的氧化作用較強(qiáng)，在72h時(shí)對(duì)100mg／L鈷單質(zhì)的氧化率高達(dá)64．32％，而硝酸鈉的氧化率只有9．66％。因此，探討Co(II)與微生物的相互作用時(shí)，培養(yǎng)體系的pH需控制到5．0～6．0；研究Co單質(zhì)與微生物的相互作用時(shí)，選用由NaN03替代NHnN03的改良培養(yǎng)體系。(2)去除Co(II)的微生物篩選。通過(guò)平板初篩和搖床復(fù)篩，獲得了8株能耐受Co(II)的細(xì)菌，分別是蠟樣芽胞桿菌1(Bacilluscereus1)，蠟樣芽孢桿菌2(Bacilluscereus2)，枯草芽孢桿菌(Bacillussubtil

6、is)，蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)，假蕈狀芽孢桿菌(Bacilluspseudomycoides)，弗雷尼棒狀桿菌(FrennyCorynebacterium)，沃氏葡萄球菌(Staphylococcuswarneri)和耐輻射奇球菌(Deinococcusradiodurans)，Co(II)的耐受濃度分別為：150mg／L，50mg／L，30mg／L，20mg／L，20mg／L，10mg／L，10mg／L和10mg／L。研究中采用活體微生物法和死體微生物法來(lái)探討這些微生物對(duì)C00I)的去除能力。死體微生物法：即C

7、o(II)水溶液的微生物吸附，統(tǒng)一吸附過(guò)程中的菌濃度、初始Co(n)濃度和吸附時(shí)問(wèn)，結(jié)果沃氏葡萄球菌，枯草芽孢桿菌和弗雷尼棒狀桿菌吸附率分別為94．08％，82．86％和63．43％。西南科技大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文第1l頁(yè)活體微生物法：即搖床培養(yǎng)同步的微生物去除，選用蠟樣芽孢桿菌2和沃氏葡萄球菌，其對(duì)Co(II)的去除率隨著pH升高而逐漸升高，在72h達(dá)到最大，分別為77．10％和98．26％。(3)氧化Co單質(zhì)的微生物篩選：通過(guò)透明圈初篩和搖床復(fù)篩，獲得了2株產(chǎn)酸能力比較高的真菌即黑曲霉(Aspergillusniger)和青霉(Aspergill

8、us)，考察了黑曲霉和青霉對(duì)lOOmg／L的鈷單質(zhì)氧化作用，其分別在60h和72h時(shí)對(duì)鈷單質(zhì)的氧化率達(dá)到最大