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《dlc2表達(dá)調(diào)控結(jié)直腸癌發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移及預(yù)后的作用機(jī)制研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中圖分類號UDCR656．9610博士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q5三3DLC2表達(dá)調(diào)控結(jié)直腸癌發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移及預(yù)后的作用機(jī)制研究StudyofRegulationMechanismofDevelopment，InvasionandMetastasisviaDLC2ExpressioninColorectalCarcinoma作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：高凱臨床醫(yī)學(xué)外科學(xué)湘雅三醫(yī)院李小榮教授答辯委員會主席中南大學(xué)2013年4月原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加
2、以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明。作者簽名遺刈日期：五＆年』月立日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾
3、提供信息服務(wù)。儲簽名劍新簽名鷙西嗍監(jiān)年』月盈日摘要結(jié)直腸癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，由于其發(fā)病率、轉(zhuǎn)移率、復(fù)發(fā)率以及死亡率均較高，使其成為一種嚴(yán)重威脅人類生命健康的惡性腫瘤。隨著影像學(xué)、外科學(xué)的進(jìn)步以及術(shù)后化療的應(yīng)用，結(jié)直腸癌的預(yù)后已經(jīng)有所改善，但腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移仍是術(shù)后患者死亡的主要原因，且已成為提高患者生存期及改善預(yù)后的瓶頸。因此，深入研究結(jié)直腸癌發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制并努力探索有效的對抗復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的治療手段，對于進(jìn)一步提高患者的生存期及改善預(yù)后有重要意義。RhoGTP酶激活蛋白家族(GTPase．a(chǎn)ctivatingProteins，GAPs
4、)調(diào)控RhoGTP酶的活性。RhoGAPs的重要功能是作為信號傳導(dǎo)的分子開關(guān)，將活化的Rho．GTP結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)槭Щ畹腉DP結(jié)合狀態(tài)，從而負(fù)性調(diào)節(jié)RhoGTP酶活性，由此參與粘附斑的形成和細(xì)胞骨架的重塑。DLC蛋白亞家族屬于RhoGAPs家族，由三個(gè)氨基酸序列高度同源的成員構(gòu)成：DLCl、DLC2和DLC3。它們也都屬于多結(jié)構(gòu)域蛋白，含有SAM(sterilealphamotif)、RhoGAP(RhoGTPase---activatingprotein)和START(StAR-relatedlipid--transfer)---個(gè)結(jié)構(gòu)域。DLC2(De
5、letedinlivercancer2)又被叫作STARD13，于2003年被成功克隆的一種抑癌基因，位于染色體13q12．3。目前對于DLC2的研究尚處起步階段，至今還沒有對DLC2在結(jié)直腸癌中的表達(dá)情況進(jìn)行相關(guān)研究的報(bào)道；其次，作為一個(gè)與DLCl結(jié)構(gòu)上高度同源的蛋白，DLC2是否在結(jié)直腸癌的發(fā)生、侵襲轉(zhuǎn)移中也發(fā)揮重要作用，這仍是需要進(jìn)一步研究的問題。Rho家族蛋白是小G蛋白Ras超家族成員，它們是一組分子量為20KD--一30KD的鳥苷酸結(jié)合蛋白，具有GTP酶活性。1985年，Rho作為Ras同源物首先被克隆出來，稱Ras榷[關(guān)單體GTP酶，Rho具有
6、RhoA、RhoB和RhoC三種異構(gòu)體，Rho家族蛋白參與調(diào)節(jié)了細(xì)胞的多種生命過程，包括肌動蛋白的細(xì)胞骨架重組、細(xì)胞黏附、細(xì)胞運(yùn)動、細(xì)胞周期進(jìn)展、細(xì)胞分裂以及基因轉(zhuǎn)錄等。近年來研究發(fā)現(xiàn)，Rho家族蛋白與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的多個(gè)方面均有聯(lián)系，包括腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移、細(xì)胞凋亡、腫瘤新生血管的形成等。Rho家族，特別是RhoA在多種腫瘤組織中表達(dá)增加并和腫瘤惡性程度密切相關(guān)，提示其在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中具有重要作用。目前，RhoA與惡性腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移的關(guān)系已成為研究的熱點(diǎn)之II由于DLC2蛋白的RhoGAP結(jié)構(gòu)域能夠激活Rho蛋白的GTP酶水解活性，使Rho蛋白由有
7、活性的GTP結(jié)合態(tài)轉(zhuǎn)化為無活性的GDP結(jié)合態(tài)，因此扮演了Rho蛋白家族負(fù)性調(diào)控因子的角色。同時(shí)近來研究已經(jīng)證實(shí)DLC2可以通過抑$1]RhoA激酶的活性，調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalprotease，MMP)的產(chǎn)生，從而改變細(xì)胞形態(tài)，影響細(xì)胞遷移。這提示DLC2可能通過調(diào)控RhoA表達(dá)從而參與結(jié)直腸癌的發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移過程，但其具體作用機(jī)制尚不清楚。本課題首先檢測結(jié)直腸癌組織及癌旁組織標(biāo)本中DLC2mRNA及蛋白的表達(dá)情況，比較結(jié)直腸癌及癌旁組織之間表達(dá)差異，并且在臨床病理變量中比較DLC2表達(dá)差異。然后，通過RNA干擾技術(shù)，抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞
8、系HT-29細(xì)胞中DLC2的表達(dá)水平，并綜合利用一系列分子生物學(xué)和
