水質(zhì)的細(xì)菌學(xué)檢查

《水質(zhì)的細(xì)菌學(xué)檢查》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、水質(zhì)的細(xì)菌學(xué)檢查一、目的要求(一)學(xué)習(xí)水質(zhì)的細(xì)菌學(xué)檢查法(二)了解水質(zhì)狀況同細(xì)菌數(shù)量的關(guān)系及大腸菌群的數(shù)量在飲水中的重要性。二、基本原理檢測水中的細(xì)菌數(shù)量是評價水質(zhì)狀況的重要指標(biāo)之一。飲水是否合乎衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，需要進(jìn)行水中細(xì)菌數(shù)量及大腸菌群數(shù)量的測定。大腸菌群是腸道最普遍存在和數(shù)量最多的一群細(xì)菌，由于大腸菌群是一群能發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性、無芽孢桿菌，它們在乳糖培養(yǎng)基中經(jīng)37℃培養(yǎng)24小時即能產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，所以常將其作為糞便污染的標(biāo)志。飲用水一般規(guī)定：1毫升自來水中總菌數(shù)不得超過100個；1000毫升自來水中大腸菌群數(shù)不得超過3個。三、實(shí)驗(yàn)材料培養(yǎng)基及器皿、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、乳糖

2、蛋白胨發(fā)酵管（內(nèi)倒置小管）、三倍乳糖蛋白胨發(fā)酵管（內(nèi)倒置小管）、伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基、無菌空瓶、無菌水、無菌培養(yǎng)皿、移液管、試管。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)客(一)采取水樣1、自來水：從學(xué)校各生活區(qū)取樣。先將自來水龍頭用火焰滅菌,再開放水龍頭使水流1—2分鐘后，用無菌空瓶接取水樣。2、池水、湖水或河水：用無菌空瓶取距水面10—15厘米深層水樣。水樣采取后應(yīng)立即檢驗(yàn)，不得超過4小時。(二）水中細(xì)菌總數(shù)測定l、自來水：稀釋水樣：原水樣和10-1水樣，用無菌移液管分別吸取l毫升原水樣和10-1水樣，分別注入二個無菌培養(yǎng)皿中。每皿各加13--15毫升已融化并冷卻到45--50℃的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，

3、輕輕旋轉(zhuǎn)，使培養(yǎng)基與水樣充分混勻，待凝固后，將平板倒置于37℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24小時進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。制作培養(yǎng)基方法、消毒滅菌、接種、計(jì)數(shù)皆參照參微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，具體如下：培養(yǎng)基制作：實(shí)驗(yàn)五、培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基配方：附錄二、常用培養(yǎng)基之一培養(yǎng)基滅菌：實(shí)驗(yàn)六、滅菌與消毒水樣接種：實(shí)驗(yàn)七、土壤微生物的分離與測數(shù)細(xì)菌總數(shù)測定：實(shí)驗(yàn)七、土壤微生物的分離與測數(shù)2、池水、湖水或河水等。稀釋水樣：稀釋倍數(shù)視水樣污濁程度而定，使水樣培養(yǎng)后每個平板中的菌落數(shù)在30--300之間的的稀釋度最為合適。例如：取湖水稀釋成10-1、10-2、10-3。每個稀釋度作兩個培養(yǎng)皿，并依上法傾入培養(yǎng)基制成平板

4、，培養(yǎng)，計(jì)數(shù)。菌落計(jì)數(shù)方法：7（1）先計(jì)算同一稀釋度的平均菌落數(shù)。若其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不應(yīng)采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的平均菌落數(shù)。若片狀菌落的大小不到培養(yǎng)皿的一半，而其余的一半菌落分布又很均勻時，則可將此一半的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌數(shù)，然后再計(jì)算該稀釋度的平均菌落數(shù)。（2）首先選擇平均菌落在30—300之間的平板，當(dāng)只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時，則以該平均菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)即為該水樣的細(xì)菌總數(shù)（見表1中例1）。（3）若有兩個稀釋度的平均菌落數(shù)都在30--300之間，則按兩者菌落總數(shù)之比值來決定。若其比值小于2則應(yīng)取兩者的平均數(shù)

5、；若大于2則取其中較小的菌落總數(shù)（表1中例2及3）。（4）若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)（表1中例4）。（5）若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)（表1中例5）（6）若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30--300之間。則以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)（表一中例6）表一計(jì)算菌落總數(shù)方法舉例例次不同稀釋度的平均菌落數(shù)兩個稀釋度菌落數(shù)之比菌落數(shù)10-110-210-3123456136527602890無數(shù)27無數(shù)1642952714650113052046605135121.62

6、.21600或1.6*10438000或3.8*10427000或2.7*1045.1*105270或2.7*10231000或3.1*104(三）用發(fā)酵法檢查大腸菌群1、自來水：分三個步驟進(jìn)行檢查（1）初發(fā)酵試驗(yàn)：在2個裝有50毫升三倍乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，各加入100毫升水樣，在10支裝有5毫升三倍乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，各加入10毫升水樣?；靹蚝?7℃培養(yǎng)24小時。（2）平板分離：經(jīng)24小時培養(yǎng)后，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣及只產(chǎn)酸的發(fā)酵管，分別劃線接種于伊紅美藍(lán)平板上，于37℃培養(yǎng)18--24小時，將符合下例特征的菌落的一部分，進(jìn)行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。a．深紫黑色，具有金屬光澤的菌落

7、；b．紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落；c．淡紫紅色，中心色較深的菌落。（3）復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)：經(jīng)涂片、染色、鏡檢為革蘭氏陰性無芽抱桿菌時，則挑取該菌落的另一部分，再接種于普通濃度的乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，每管可接種來自同一發(fā)酵管的同類型菌落1---3個。37℃培養(yǎng)24小時，結(jié)果若產(chǎn)酸產(chǎn)氣，即證實(shí)有大腸菌群存在。證實(shí)有大腸菌群存在后，再根據(jù)發(fā)酵試驗(yàn)的陽性管數(shù)查表二,即得大腸菌群數(shù)。2．池水，湖水或河水等分別取湖水10-2、10-1的稀釋液及原水樣各1毫升，加到裝有10毫升普通乳糖蛋白胨發(fā)酵液試管中。另取10毫升和100毫升原