鹽脅迫下乙烯調(diào)控?cái)M南芥種子萌發(fā)的作用機(jī)制

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1、萬方數(shù)據(jù)UniversityCode:10225RegisterCode:B14043DissertationfortheDegreeofDoctorMechanismsforethyleneregulatesseedgerminationundersalinityinArabidopsisthalianaCandidate:Supervisor:AssociateSupervisor:AcademicDegreeAppliedfor:Speciality:Dateof0ralExamination:University:LinYingchaoProf.Zu

2、YuangangA.P.TangZhonghuaDoctorofPhilosophyBotanyJune,2014NortheastForestry萬方數(shù)據(jù)摘要lUlIIIIIIIIIlY2723453鹽脅迫是影響植物生長發(fā)育的一個(gè)重要環(huán)境因素,但是植物的抗鹽機(jī)制還有待進(jìn)一步深入的研究。利,子作為植物最重要的繁殖材料,其在鹽脅迫下的萌發(fā)及萌發(fā)后幼苗的早期生長狀況在一定程度上反映了植物的抗鹽能力。植物氣體型激素乙烯是迄今發(fā)現(xiàn)的唯一氣體型激素,其不僅能夠調(diào)節(jié)包括種子萌發(fā)、開花、衰老與脫落在內(nèi)的生長發(fā)育過程,還參與調(diào)控植物的逆境反應(yīng)。為了研究鹽脅迫下乙烯信號對種子

3、萌發(fā)的調(diào)控及其內(nèi)在機(jī)制,本研究選用擬南芥哥倫比亞野生型C01.0及以其為背景的乙烯不敏感型突變體ein2.5和組成型乙烯反應(yīng)突變體ctrl—Jf植株種子為實(shí)驗(yàn)材料,將其置于鹽脅迫(NaCi)條件下培養(yǎng),驗(yàn)證乙烯信號對于鹽脅迫下擬南芥種子萌發(fā)的意義。不僅通過外源施加乙烯合成前體1.氨基環(huán)丙烷一1.羧酸(1-aminocyclopropane.1.carboxylicacid,ACC)以及乙烯作用相關(guān)抑制劑進(jìn)一步確定乙烯的功能,還探討了一氧化氮(NO)信號分子對鹽脅迫下擬南芥種_了萌發(fā)的影響及其與乙烯信號在此過程中的相互作用。此外,木研究還分析了鹽脅迫卜.乙烯信

4、號對擬南芥種子內(nèi)源過氧化氫(H202)產(chǎn)生,胚根仲長區(qū)細(xì)胞凋亡以及油脂代謝的影響。擬南芥作為理想的模式植物,與許多蔬菜、油料以及觀賞植物同屬十字花科植物。本研究不僅為揭示鹽脅迫下種子萌發(fā)的調(diào)控機(jī)制提供重要的理論依據(jù),而且對于實(shí)際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中新品種培育以及我國大面積鹽土開發(fā)與利用具有重要的實(shí)踐意義。本研究主要結(jié)果如下:1.高濃度鹽脅迫(NaCl)抑制擬南芥種子萌發(fā)傷害的來源。將野生型擬南芥種子置于NaCI(50rnlVl,100mM,150mM和200mM)以及具有同等滲透勢的甘露醇(100mM,200mM,300mM和400mM)預(yù)處理的培養(yǎng)基上完成吸脹作用,

5、結(jié)果表明,NaCi脅迫對種子萌發(fā)引起的抑制作用遠(yuǎn)比甘露醇大,證明NaCI抑制種子萌發(fā)是由Na+引起的離子毒害造成的,而非溶液滲透勢降低引起的滲透脅迫。2.乙烯信號對鹽脅迫下擬南芥種子萌發(fā)的調(diào)控。對比研究乙烯不敏感型突變體ein2—5與組成型乙烯反應(yīng)突變體ctrl—J在高鹽脅迫(NaCI>100mM)培養(yǎng)條件下種子萌發(fā)的差異表明,與野生型擬南芥相比,ein2—5的種子萌發(fā)受到更嚴(yán)重的抑制,證明乙烯信號是鹽脅迫下擬南芥種子所必須的調(diào)控因子。相反,突變體ctrl.』的種子則表現(xiàn)出了較高的抗鹽能力,其萌發(fā)率顯著高于同條件下的野生型種子,說明增強(qiáng)的乙烯信號反應(yīng),促進(jìn)鹽

6、脅迫下擬南芥種子的萌發(fā)。另外,外源施加乙烯合成前體ACC于鹽脅迫的C01.0種子不僅可以直接提高其萌發(fā)率,還顯著地提高了萌發(fā)后幼苗的抗鹽能力,降低了鹽脅迫對幼苗胚根與子葉生長發(fā)育的抑制。3.信號分子NO對鹽脅迫下擬南芥種子萌發(fā)的影響及其與乙烯在此過程中的關(guān)系。外源施加NO合成供體硝普鈉(SNP)有效提高了鹽脅迫下C01.0種子的萌發(fā)率和萌發(fā)后幼苗早期生長發(fā)育階段的抗鹽能力,降低了鹽脅迫對胚根造成的生長抑制。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),乙烯與NO信號相互依賴調(diào)控鹽脅迫下擬南芥種子萌發(fā)過程:完整的乙烯信號傳導(dǎo)萬方數(shù)據(jù)摘要途徑或增強(qiáng)的乙烯反應(yīng)能夠保證鹽脅迫下種子內(nèi)源NO正常合

7、成:外源NO合成供體則具有促進(jìn)鹽脅迫下乙烯生物合成、提高乙烯反應(yīng)的功能。由此可見,在鹽脅迫下擬南芥種子中,二者形成一個(gè)相互作用的網(wǎng)絡(luò),彼此促進(jìn)對方的生物合成,保證其發(fā)揮各自生物功能,共同參與調(diào)控萌發(fā)過程。4.鹽脅迫下擬南芥吸脹種子中乙烯、NO與H202的關(guān)系。本研究選用H202預(yù)處理培養(yǎng)基模擬吸脹種子受到的氧化脅迫,結(jié)果表明,外源施加ACC可以極大的提高氧化脅迫下擬南芥種子的萌發(fā)能力,而SNP則只能較低程度的增加并且其功能發(fā)揮依賴于乙烯信號途徑。另外,外源施加ACC可以顯著降低C01.0吸脹種子中內(nèi)源H202含量,但對于ein2—5則沒有效果。以上結(jié)果說明,

8、完整的乙烯信號傳導(dǎo)途徑或者增強(qiáng)的乙烯反應(yīng)對于保持細(xì)胞

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