探析不同pcr擴(kuò)增試劑盒檢驗(yàn)血樣dna結(jié)果

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1、探析不同PCR擴(kuò)增試劑盒檢驗(yàn)血樣DNA結(jié)果【摘要】目的探討不同PCR擴(kuò)增試劑盒在血樣DNA中的檢驗(yàn)及對(duì)比結(jié)果。方法抽取320例血樣DNA作為檢測對(duì)象，并應(yīng)用不同PCR擴(kuò)增試劑盒進(jìn)行檢測，在此基礎(chǔ)上，結(jié)合所得的血樣檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析比較。結(jié)果經(jīng)研究，在樣本相同的情況下，血樣檢驗(yàn)差異率為1.25%(4/320)o而且經(jīng)檢測，4例出現(xiàn)不同檢驗(yàn)分型的樣本均存在等位基因缺失。另外,ProfilerPlusTM擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.9375%,IdentifilerTM擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.3125%,Powerplex16HS擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.3125%o結(jié)論在血樣DNA的檢驗(yàn)過程中

2、，通過應(yīng)用不同PCR擴(kuò)增試劑盒進(jìn)行檢測，能夠準(zhǔn)確獲取到不同位置的異?；?，減少基因缺失、擴(kuò)增不平衡所帶來的誤差影響，具有較高的推廣價(jià)值。【關(guān)鍵詞】PCR擴(kuò)增試劑盒；血樣DNA；檢驗(yàn)；擴(kuò)增不平衡；基因缺失doi：10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.11.834文章編號(hào)：1004-7484(2013)-11-6808-02聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是常用于基因分離、克隆及DNA或RNA檢測的一種體外酶促合成特異DNA片段技術(shù)［1］。在當(dāng)前，隨著現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，以及DNA血樣檢驗(yàn)技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用日趨于普遍，使得不同PCR擴(kuò)增試劑盒在實(shí)際檢驗(yàn)

3、中顯露出越來越明顯的結(jié)果差異。為此，本研究擬結(jié)合不同PCR擴(kuò)增試劑盒檢驗(yàn)血樣DNA的結(jié)果進(jìn)行討論，現(xiàn)具體報(bào)道如下。1資料與方法1.1一般資料1.1.1研究對(duì)象本研究抽取我院數(shù)據(jù)庫積累的320例漢族血樣作為研究對(duì)象，其中，男性為219例；女性為101例。年齡均在22歲到69歲之間，平均年齡(40.1±2.2)歲。而且經(jīng)了解，全組320例血樣均不存在血緣關(guān)系。1.1.2儀器選用儀器選用美國ABI公司生產(chǎn)的9800型PCR擴(kuò)增儀，以及該公司生產(chǎn)的3500型基因分析儀。1.1.3硅珠法資料硫氧酸肌.能夠使蛋白質(zhì)與DNA充分分離，在硅珠吸附前髙速離心可以將變性的蛋白質(zhì)及一些不溶的物質(zhì)除

4、去。吸附后的漂洗過程則可將溶液中的PCR抑制物洗去。高濃度的硫氧酸肌條件下，DNA能夠被SiO2特異性吸附，若無硫氧酸肌存在，DNA則可重新釋放出來。1.2方法采用硅珠法提取血樣中的DNAo按照相關(guān)要求，將PCR擴(kuò)增儀反應(yīng)體系設(shè)置為10uL,其余(如成份、熱循環(huán)參數(shù)設(shè)置等)按照儀器說明書進(jìn)行嚴(yán)格設(shè)置和操作。試劑盒主要選用Powerplex16HS,以及Prof訂erPlusTM和IdentifilerTM等3種，用于分列出等位基因。具體按照0.05ng>0.075ng和1一8昭的劑量，分別用于擴(kuò)增并檢驗(yàn)血樣DNA。2結(jié)果經(jīng)研究，本組320例血樣中，相同樣本的檢驗(yàn)差異率為1.2

5、5%(4/320)o而且經(jīng)檢測，4例出現(xiàn)不同檢驗(yàn)分型的樣本均存在等位基因缺失。另外，ProfilerPlusTM擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.9375%,IdentifilerTM擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.3125%,Powerplex16HS擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.3125%。3討論P(yáng)owerplex16HS、ProfilerPlusTM以及IdentifilerTM等試劑盒是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域上經(jīng)常用到的3種遺傳標(biāo)記系統(tǒng)［4］。一般在采用PCR擴(kuò)增試劑盒對(duì)血樣DNA進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，往往會(huì)由于選用的試劑盒不同，而出現(xiàn)被檢測異?；虻奈恢貌煌那闆r，且基因缺失、擴(kuò)增不平衡等兩種是其主要的表現(xiàn)形式［2］。

6、不過據(jù)有關(guān)資料顯示，Prof訂erPlus試劑盒在所有PCR擴(kuò)增試劑盒當(dāng)中，出現(xiàn)異常的百分比相對(duì)要高得多［5］o在本組320血樣研究中，經(jīng)不同PCR擴(kuò)增試劑盒檢驗(yàn)，4例出現(xiàn)不同檢驗(yàn)分型的樣本均存在等位基因缺失。另外，ProfilerPlusTM擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.9375%,IdentifilerTM擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.3125%,Powerplex16HS擴(kuò)增不平衡發(fā)生率為0.3125%O應(yīng)用PCR擴(kuò)增試劑盒檢驗(yàn)血樣DNA時(shí)，應(yīng)盡可能選用同一類型且具有較低異常百分比的試劑盒進(jìn)行檢驗(yàn)。并可通過相互檢驗(yàn)的方式，來進(jìn)一步降低重要判型過程中的錯(cuò)判率[4]。本組相同樣本存在的檢驗(yàn)

7、差異率為1.25%O經(jīng)本研究表明，在血樣DNA的檢驗(yàn)過程中，通過應(yīng)用不同PCR擴(kuò)增試劑盒進(jìn)行檢測，能夠準(zhǔn)確獲取到不同位置的異常基因，減少基因缺失、擴(kuò)增不平衡所帶來的誤差影響，具有較高的推廣價(jià)值。參考文獻(xiàn)[1]周翼，吳林軍?不同PCR擴(kuò)增試劑盒檢驗(yàn)血樣DNA的結(jié)果對(duì)比分析[J].中國醫(yī)藥科學(xué)，2012,04(15)：263-264.[2]柳天天.幾種常用PCR擴(kuò)增試劑盒檢驗(yàn)血樣DNA的結(jié)果比較[J]?中外醫(yī)療，2012,05(01)：174-175.[3]王秋平，陳斌，張瓊，雷秀霞，周小棉，匡艷華.3種免