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《蟲蛋白基因?qū)雰?yōu)良玉米自交系的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、遺傳HEREDITAS(Beijing)24(1):35~39,2002研究報告農(nóng)桿菌介導(dǎo)將Bt殺蟲蛋白基因?qū)雰?yōu)良玉米自交系的研究1111,2111張艷貞,王罡,胡漢橋,魏松紅,季靜,王軍軍,李昌(1.解放軍軍需大學(xué)植物基因工程研究中心,吉林長春,130062;2.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植保系,遼寧沈陽,110061)摘要:以雜交育種中廣泛使用的優(yōu)良玉米自交系340、4112為材料,用帶有質(zhì)粒pGBIL04(Pactin-Bt-Tnos)的根癌農(nóng)桿菌LBA4404轉(zhuǎn)化其幼胚及其初始愈傷組織,共培養(yǎng)3天后,在含PPT的培養(yǎng)基上連
2、續(xù)篩選培養(yǎng)3代,然后分化獲得再生植株。PCR檢測證明目的基因已整合到再生植株的基因組中。實驗結(jié)果表明幼胚預(yù)培養(yǎng)后形成的新鮮的初始愈傷組織是比較適宜的轉(zhuǎn)化受體,結(jié)果還發(fā)現(xiàn)將共培養(yǎng)溫度降到22℃可以提高農(nóng)桿菌介導(dǎo)的玉米遺傳轉(zhuǎn)化的篩選頻率。關(guān)鍵詞:玉米;自交系;轉(zhuǎn)基因;農(nóng)桿菌;Bt;預(yù)培養(yǎng);共培養(yǎng)溫度;PCR中圖分類號:Q785文獻標(biāo)識碼:A文章編號:0253-9772(2002)01-0035-05TransferofInsecticidalProteinGenefromBacillusthuringiensisintoC
3、onventionalMaizeInbred-lineMediatedbyAgrobacteriumtumefaciens1111,2ZHANGYan2zhen,WANGGang,HUHan2qiao,WEISong2hong,111JIJing,WANGJun2jun,LIChang(1.ResearchCenterforPlantGeneticEngineering,QuartermasterofPLA,ChangchunJilin,130062,China;2.DepartmentofPlantProtectio
4、n,ShenyangAgricultureUniversity,ShenyangLiaoning,110061,China)Abstract:Excellentinbred-linesofmaize,340and4112,whichwereusedlargelyinhybridizedcombinationweretrans2formedwithAgrobacteriumtumefaciens.TheimmatureembryosandtheiroriginalcalliwereinfectedbyA.tumefaci
5、ensLBA4404containingplasmidpGBIL04.After3daysofco-cultivation,theimmatureembryosandcalliwerecontinuouslyselectedonthemediumcontainingphosphinothricin(PPT)for3generations,thenplantswereregenerated.ItwasprovedbyPCRanalysisthatthetargetBtgenehadbeenintegratedintoth
6、egenomeofregeneratedplants.Theresultsshowedthatfreshoriginalcallifromtheimmatureembryosafterpre-cultureweresuitableacceptors.Theresultsalsoshowedthatitcouldincreasethefrequencyofselectionbyproperlyloweringtheco-culturetemperatureto22℃.Keywords:maizeinbred-line;t
7、ransformation;Agrobacteriumtumefaciens;Bt;pre-culture;co-culturetemperature;PCR玉米螟俗稱玉米鉆心蟲,除青海、西藏未見報道重,常年春玉米受害減產(chǎn)約10%,夏玉米減產(chǎn)約[1]外,在我國的華北、東北、華東及西北危害均十分嚴20%~30%。應(yīng)用化學(xué)殺蟲劑對玉米螟作用效收稿日期:2000-12-25修回日期:2001-9-25基金項目:“:國家植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究開發(fā)與中試基地建設(shè)”專項課題J99-B-001作者簡介:張艷貞(1972-),女(漢),河
8、南滎陽人,碩士,助研,專業(yè)方向:植物基因基因工程E2mail:shenshen@mail.jl.cn通訊聯(lián)系人:王罡(1964-),男,教授,專業(yè)方向:植物基因基因工程。電話:0431-7973911-65087,E2mail:wgtt@public.cc.jl.cn?1994-2010ChinaAcademicJournalEl