大葉風(fēng)蘭組培快繁技術(shù)體系的研究

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1、北方園藝2OLO(]O)：173～175·生物技術(shù)·大葉風(fēng)蘭組培快繁技術(shù)體系的研究王裕，韓磊，丁雪珍，丁世民(濰坊職業(yè)學(xué)院，山東濰坊261031)摘要：通過大葉風(fēng)蘭的花梗腋芽誘導(dǎo)出無(wú)菌植株，再利用無(wú)菌植株莖尖誘導(dǎo)形成原球莖，成功地誘導(dǎo)分化形成了再生植株，篩選出了花梗腋芽啟動(dòng)、原球莖誘導(dǎo)、增殖、生根以及過渡培養(yǎng)等培養(yǎng)基配方．形成一套完整的大葉風(fēng)蘭組培快繁技術(shù)體系。關(guān)鍵詞：大葉風(fēng)蘭；組織培養(yǎng)；快速繁殖中圖分類號(hào)：S682．31文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1001-0009(2010)10一一0173一O3大葉風(fēng)蘭(Neofinetiacate)屬附生

2、蘭類，主要產(chǎn)試驗(yàn)?zāi)康氖菍⒒üＲ秆繂?dòng)，形成營(yíng)養(yǎng)芽，在三角于韓國(guó)、日本。喜歡溫暖、潮濕、半陰、通風(fēng)的環(huán)境。植株瓶?jī)?nèi)長(zhǎng)成無(wú)菌植株，以便利用無(wú)菌植株的莖尖誘導(dǎo)原球嬌小，是近幾年從韓國(guó)引進(jìn)的“香花洋蘭”。風(fēng)蘭的根、莖進(jìn)行快速繁殖?；üＲ秆拷臃N在營(yíng)養(yǎng)芽誘導(dǎo)培養(yǎng)莖、葉和花都是觀賞對(duì)象，具有株型迷你。造型奇特，花基上，7d左右腋芽開始萌動(dòng)膨大。30d左右長(zhǎng)出小葉。具異香等特點(diǎn)，越來越受到人們的青睞，市場(chǎng)開發(fā)價(jià)值研究結(jié)果表明，不同激素及其濃度配比對(duì)于花梗腋較大。盡管在市場(chǎng)上已占據(jù)了一定位置，但與蝴蝶蘭、芽啟動(dòng)培養(yǎng)的影響差異顯著(表1)。代號(hào)A2培養(yǎng)基大花蕙蘭

3、比較，日前應(yīng)屬稀有品種。大葉風(fēng)蘭若采用MS+6一BA2．0mg／I出芽率最高，達(dá)9o。傳統(tǒng)的分株繁殖，每年每株僅繁殖2～3個(gè)芽，繁殖系數(shù)表1不同激素組合對(duì)花梗腋芽啟動(dòng)培養(yǎng)的影響很低，繁殖速度慢、周期長(zhǎng)，難以迅速占領(lǐng)市場(chǎng)，滿足需培養(yǎng)6BANAA接種數(shù)出芽數(shù)出芽率基代號(hào)rng．I1／mg．I個(gè)／個(gè)／求。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)，可以加快繁殖速度，進(jìn)行工業(yè)A11．0010031．531．5d化生產(chǎn)。]。以新引進(jìn)的大葉風(fēng)蘭優(yōu)良品種為材料，將大A22．00l0090．090．0a葉風(fēng)蘭的花梗腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)生成無(wú)菌植株，再利用無(wú)菌A33．0010076．576．5

4、bA440010055．055．0c植株莖尖誘導(dǎo)形成原球莖，成功地誘導(dǎo)分化形成了再生A51．00．510026．526．5d植株，達(dá)到快速繁殖的日的。A62．00．510035．035．0dA73．00．510050050．0c1材料與方法A84005l0036．536．5d1．1試驗(yàn)材料注：小寫字母代表P<0．05的顯著水平，以F同。選取大葉風(fēng)蘭未開花的帶腋芽花梗為供試材料。2．2原球莖誘導(dǎo)1．2試驗(yàn)方法將花梗腋芽試管苗的莖尖接種在原球莖狀體誘導(dǎo)1．2．1消毒選取大葉風(fēng)蘭未開花的帶腋芽花梗，用流培養(yǎng)基上，40d后比較試驗(yàn)結(jié)果。不同激素組合的

5、誘導(dǎo)水沖洗30n1in后，切成長(zhǎng)約2～3cm帶腋芽的花梗節(jié)，情況見表2。用無(wú)菌濾紙吸干水分，用70的酒精浸泡20~30S后，表2不同激素種類和濃度對(duì)誘導(dǎo)原球莖的影響用無(wú)菌水沖洗5遍，再用0．1的升汞分別浸泡15min，無(wú)菌水沖洗5～8次，用無(wú)菌濾紙吸干水分。代號(hào)／nag．·LJ／rag．·L一1／個(gè)／個(gè)／N1．2．2培養(yǎng)基采用MS+蔗糖20L+瓊脂粉3．5Bl6．00．51003232cB25．00．51006363bg／L+活性炭1．5g／L+不同激素組合，pH5．4的培養(yǎng)1334．00．51o09494a基，培養(yǎng)溫度(25±2)。C，光照

6、強(qiáng)度1500lx，光照時(shí)間l2B43．00．51004545ch／d。B52．00．51003434c1361．00．51002222d2結(jié)果與分析B74．00．2l007676b2．1花梗腋芽啟動(dòng)培養(yǎng)I383．00．21005050bB92．00．21003131cB101．00．21002020d第一作者簡(jiǎn)介：王裕(1978-)，女，山東濰坊人，碩士，主要研究方向?yàn)樯锛夹g(shù)及應(yīng)用。E-mail：qqwy2008@163．COiTI。試驗(yàn)結(jié)果表明，不同激素組合對(duì)原球莖誘導(dǎo)率影響收稿日期：2010-01—29差異顯著。所有組合都可以誘導(dǎo)出原球

7、莖，在相同濃度173·生物技術(shù)·北方園藝2olo(1o)：173～175的N從下，高濃度6-BA對(duì)原球莖誘導(dǎo)有明顯促進(jìn)作培養(yǎng)基生根平均根數(shù)不同，E2組合平均根數(shù)達(dá)3．1條，用，但高于5．omg／L則會(huì)抑制其生長(zhǎng)。其中組合這說明6-BA和NAA配合使用比單獨(dú)使用NAA或MS+6-BA4．0mjg／L+NAA0．5mg／L誘導(dǎo)率最高，IBA更有利于生根。6-BA1．0mg／L時(shí)平均根數(shù)多，使達(dá)94％。用NAA比IBA生根數(shù)略多，且考慮到NAA在培養(yǎng)基2．3原球莖增殖滅菌過程中穩(wěn)定，并且價(jià)格比IBA低，所以生產(chǎn)中以用原球莖繼代增殖應(yīng)在轉(zhuǎn)綠之前，將原

8、球莖切成小塊6-BAl_0mg／L和NAA0．5nag／L配合作為生根劑(3ram)，并給予針刺損傷]，接種在不同激素組合的原為好。球莖增殖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)時(shí)間為30