腸淋巴液引流對(duì)失血性休克大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激應(yīng)激的影響

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腸淋巴液引流對(duì)失血性休克大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激應(yīng)激的影響_第1頁(yè)
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1、河北北方學(xué)院學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下,由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果,其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河:IL:iL方學(xué)院所有。河北北方學(xué)院有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開(kāi)和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名單位為河:iL:II二方學(xué)院,試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北北方學(xué)院所有。否則,承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。翩虢彳枷研究蝴:研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明年月日本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的研

2、究成果,指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫(xiě),,、文責(zé)自負(fù)。導(dǎo)師簽名:彳名y韌I目錄中文摘要????????????????.?????????1英文摘要?????????????????????????.3英文縮寫(xiě)????..???一????????????????..7研究論文腸淋巴液引流對(duì)失血性休克大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響前言????.???????????.?????????.9日l(shuí)J舌????.????????????????????..9材料與方法?????????????????????..10結(jié)果?????????????.

3、.?.????????..15附圖?????????????..???????.??..19附表???????????????????????..29討論???????????.????????????.31結(jié)論???????????????????????..34參考文獻(xiàn)???????????????????????35綜述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與心肌缺血再灌注損傷?????????41致謝????.?????.??..?????????????50個(gè)人簡(jiǎn)歷?????????????????????????.52中文摘要腸淋巴液引流對(duì)失血性休克大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

4、應(yīng)激的影響摘要重癥失血性休克引起機(jī)體組織器官的缺血、缺氧,進(jìn)一步引起組織細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmicreticulumstress,ERS),導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷或凋亡,成為患者器官功能障礙、衰竭乃至死亡的重要因素。近年來(lái)研究表明,危重狀態(tài)下的腸淋巴液回流至體循環(huán)成為遠(yuǎn)隔器官肺、肝、心、腎等重要器官損傷的重要原因;以腸淋巴管結(jié)扎或腸淋巴液引流的手段阻斷腸淋巴液回流均可減輕各組織器官的炎癥反應(yīng)、自由基損傷,改善能量代謝,對(duì)于重癥休克的防治具有積極意義。但減少腸淋巴液回流減輕器官損傷的機(jī)制是否與降低組織細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有關(guān),尚不清楚。為此,

5、本研究采用失血性休克模型,觀察休克腸淋巴液引流對(duì)休克大鼠肺、肝、腎、心肌組織細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志分子葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose.regulatedprotein78,GRP78)、鈣網(wǎng)蛋白(calreticulin,CRT)的影響,進(jìn)一步觀察對(duì)ERS引起細(xì)胞凋亡途徑的啟動(dòng)分子C/EBP同源蛋白(C/EBPhomologousprotein,CHOP)、天冬氨酸蛋白水解酶12(cysteinylaspartatespecificproteinase12,Caspase一12)以及細(xì)胞凋亡的影響,探討腸淋巴液引流對(duì)失血性休克大鼠組織細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

6、應(yīng)激的作用。首先,18只Wistar雄性大鼠隨機(jī)均分為:假手術(shù)組、休克組及休克腸淋巴液引流組(休克+71流組)。大鼠經(jīng)戊巴比妥鈉全身麻醉后,行股部手術(shù),右股靜脈注射肝素鈉全身抗凝,右股動(dòng)脈插管連接生物信號(hào)采集系統(tǒng),連續(xù)監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈血壓(menarterypressure,MAP);左股側(cè)動(dòng)脈插管后連接注射器固定于抽注機(jī)上備放血用;腹部手術(shù),剝離腸系膜淋巴管。待所有手術(shù)完成、穩(wěn)定30min后,休克組、休克+引流組大鼠經(jīng)左股動(dòng)脈勻速放血,10min內(nèi)將MAP降至40mmHg,復(fù)制失血性休克模型。維持低血壓60min后,將放出的全血與林格氏液按1:1

7、混勻,經(jīng)右側(cè)股靜脈輸液復(fù)蘇,30min完成;觀察至輸液結(jié)束后3h。休克+引流組在輸液結(jié)束后,行腸淋巴管插管,按我室常規(guī)方法引流休中文摘要克腸淋巴液至休克3h。假手術(shù)組進(jìn)行相同的手術(shù)操作,但不放血、不輸液。休克組及休克+71流組大鼠在液體復(fù)蘇后3h、假手術(shù)組于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn),留取肺、肝、心肌、腎糾織,部分組織制備10%組織勻漿,ELISA法檢測(cè)GI心78、CRT、CHOP、Caspase.12含量;部分組織制備單細(xì)胞懸液,應(yīng)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞周期分析,計(jì)算細(xì)胞增殖指數(shù)(proliferationindex,PI);部分組織應(yīng)用多聚甲醛固定,制備組織

8、切片,DAPI染色法檢測(cè)各組織細(xì)胞的凋亡率。結(jié)果顯示,休克組大鼠肺、肝、腎、心肌組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志分子GI沖78、CRT含量均顯著高于假手術(shù)組;休克+

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