斷奶前后健康仔豬與腹瀉仔豬糞便菌群的比較研究

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時間:2019-03-06

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1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文斷奶前后健康仔豬與腹瀉仔豬糞便菌群的比較研究姓名:王凱申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:王九峰20070601中國農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文·摘要目的利用PCR-DGGE技術(shù)分析斷奶前后仔豬糞樣細(xì)菌區(qū)系變化,并比較腹瀉仔豬與健康仔豬糞樣菌群的結(jié)構(gòu)差異.方法選取各日齡(出生到斷奶(301日齡)后兩周)腹瀉仔豬的糞便,同時取同窩、同性別,體重相近健康仔豬的新鮮糞便.提取糞便樣品中細(xì)菌的混合mqA,再對其16srDNA的Ⅵ可變區(qū)進(jìn)行PcR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)DC-6E電泳后進(jìn)行相似性分析.同時,比較同

2、日齡腹瀉仔豬與健康仔豬糞樣DGGE譜帶的異同,找出特征性帶,回收測序后確定菌屬.結(jié)果斷奶前,仔豬糞樣DGGE條帶較少,f司窩仔豬譜帶相似,有一些位置相同的條帶.?dāng)嗄毯?,隨著時間的推移,圖譜條帶逐漸增多,仔豬個體間條帶差異也逐漸增大.仔豬是否同窩對DGGE條帶沒有明顯影響;同日齡腹瀉仔豬與健康仔豬間DGGE條帶有明顯差異,多出現(xiàn)一到兩條較明顯的優(yōu)勢條帶,特征條帶經(jīng)回收測序確定屬于腸桿菌.結(jié)果表明,仔豬從出生到斷奶前后,腸道優(yōu)勢菌群結(jié)構(gòu)從單一到復(fù)雜。隨著日齡的增長,優(yōu)勢菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯改變;由于致病菌的優(yōu)勢定殖,導(dǎo)致腹瀉

3、仔豬腸道菌群紊亂,較健康仔豬糞樣細(xì)菌DGGE條帶減少,但致病菌形成特征條帶.本研究結(jié)果不僅可為仔豬腹瀉的臨床治療提供參考依據(jù),也可為今后研究仔豬腹瀉時腸道通透性改變的機(jī)理,起到一定的借鑒作用.關(guān)鍵詞交性梯度凝膠電泳(DGGE);16SrDNA;斷奶仔豬;糞樣菌群AbstractPCRandde∞tI

4、l面ggradi∞tgdelecu'ophor∞is卿E)we∞usedtomonitorthedevelopmentofbacterialcemmunityinfh∞%ofweaning#gle乜.DGGE蛐岫isals

5、odevelopedforthe蚰蛐offecalfloraindiarrheaandhealthypiglets.ThereginusVjofthe16SrDNAoffaecalbac婦婦慨a(chǎn)mplified.DGGEprofilesofthePCRmnplicousw粥comparedbysimilarityanalysis.ThecharacteristicprofilesofDGGEw帆CUtandrecycledbyPCR,aRcr∞quencetest,thebactmumtypewasdetermined

6、.Theresults缸dic弧edtim,DGGEofftx:alt6SrDNAam#iconsfrom30individualsshoweddifferentprofiles,pigletsfromthe$anaeSowbeforeweaningshowedsimilarDGGEprofiles,withs0111ebandsincolnmon.Afterweaning,asthepiglctsgrew,DGGEprofilesb

7、蜘Imccomplicatedanddivcrse.n”individualpigI

8、dhaditsuniqueDGGEbands’withlowsimilaritybetweenpiglets.11”SOUl'CcofsowshowednoapparenteffectontheDGGEprofiles.Comparedwithhealthypiglets,diarrheapigletsshowedmorethan∞edifferentDGGEban正ItbelongstoEacherichiacoliusing∞口u∞∞test.Thecmrentstudyshowedthatthediversity

9、ofthepredominantbacteriainweaningpiglets'gastrointestinaltracthasobviouschangeduringtheweaningpefiodBecausethebacteriacausingthediarrheadiseaseW雒predominantlyproliferated,itshowedtypicalband011theD(粥Egd。andthediarrheapiglcFintestinalbacterialcommunityweredisorde

10、red.hconclusion,thepresentresultsnotonlyprovidetheadvisoryopinionstOtheclinicaltreatmentofdiarrheapiglets.butalsogivesomcguidestotheresearchofthemechanismsoftheintest

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