Flg22誘導擬南芥鈣信號缺失突變體的篩選.pdf

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1、分類號:Q94單位代碼:10346密級:學號:2015111010077碩士學位論文(學術學位)中文論文題目:Flg22誘導擬南芥鈣信號缺失突變體的篩選英文論文題目:Flg22-inducedthedefectionofcalciumsignalsmutantsscreeninArabidopsis申請人姓名:楊藝指導教師:裴真明合作導師:朱杉專業(yè)名稱:植物學研究方向:植物學所在學院:生命與環(huán)境科學學院論文提交日期2018年3月杭州師范大學碩士學位論文致謝致謝不知不覺,三年的研究生生涯即將結束?;仡櫼宦窔v程,有過期待,有過驚喜,也不乏失望,偶有抱怨,但最后所有的情緒都化作感激。感謝在

2、這里經(jīng)歷的一切。首先要感謝裴老師給我一個來這里的機會,我才能來到這里,讓我有機會經(jīng)歷這一切。還要感謝我的指導老師朱杉老師,從課題的選題,到實驗的指導以及最終論文的撰寫。她都給予了我很大的幫助,讓我得以順利完成課題。此外,還要感謝遠方老師、柯麗萍老師、劉訓言老師、吳飛華老師、滕一波老師、吳曉梅老師、亓果寧老師以及裴晉珍老師在日常生活和實驗中認真地幫我解答疑問,讓我可以更順利的進行實驗。當然,我還要感謝一起工作學習的伙伴們。這其中給予我最大幫助的就是我的師兄曹孝強,感謝他教會我許多實驗技術和原理,還在實驗上給我很多建議,讓我的實驗得以順利進行。此外,實驗室的師兄師姐也在三年間給予了我大量

3、幫助,在此要感謝陳維師兄,張庶師兄,朱易華師兄,裴宋雨師姐,劉源濤師兄,張琪師姐,劉璐璐師姐,買華晨師兄,徐媛媛師姐,霍曉迎師姐。同時也要感謝梁宜,萬菂,申洋,蔡云飛,王超這些同窗在學習和生活上給我提供的各種幫助,讓我的三年的研究生活更加溫暖。當然還要感謝王夢云、伊艷艷等師弟師妹的陪伴與支持。感謝你們!最后,感謝家人的支持和自己的堅持,讓我得以有一個圓滿的研究生生涯。最后,我必須感謝我的家人,感謝你們對我最大限度的包容與支持,讓我能夠毫無顧慮的在科研道路上繼續(xù)前行奮斗,謝謝你們!I杭州師范大學碩士學位論文中文摘要中文摘要病原菌侵害是影響農(nóng)作物產(chǎn)量重要因素。植物通過質(zhì)膜或胞內(nèi)的受體感受

4、這些生物脅迫的存在,觸發(fā)下游的信號轉導,引發(fā)相應的免疫反應以抑制病原體的侵害。而作為植物第二信使的鈣信號,在植物感受到脅迫初期就會出現(xiàn),并對下游信號的傳遞發(fā)揮著重要的作用。Flg22作為一個典型的病原體相關的分子模式,其相關的信號轉導機制已經(jīng)被研究的較為清楚。但對于flg22的誘導如何引起胞內(nèi)鈣離子濃度增加的分子機制依然不清楚。本研究以含有可以穩(wěn)定遺傳水母熒光蛋白(AEQUORIN,AQ)基因的擬南芥EMS誘變體作為材料,通過篩選flg22脅迫下鈣離子濃度上升缺失的突變體,期望能夠得到flg22誘導的鈣信號傳導通路中的特異性組分。并且通過克隆相應基因,進一步深入探討植物感受生物脅迫的

5、機理。目前取得的成果如下:1.通過表型篩選、特異性驗證,我們得到了flg22誘導的鈣信號缺失的候選突變體;2.我們選取其中一個候選突變體進行回交以及BF3的驗證,得到該突變體穩(wěn)定表達的BF3代,并完成了相應的全基因組重測序,目前正在對突變基因進行定位,并初步將該基因定位于四號染色體上;3.通過對突變體生理表型的分析,我們發(fā)現(xiàn)篩選得到的突變體對AtPep1和flg22都不敏感,表明該突變基因可能在植物防御中發(fā)揮一定的作用;4.通過熒光定量PCR對flg22誘導下PR1基因表達的檢測,我們發(fā)現(xiàn)植物在應對病害脅迫時,PR1基因表達量會降低。本研究的順利進行,將為生物脅迫誘導的早期鈣信號,以

6、及采用基因工程方法提高農(nóng)作物抗病性奠定基礎,對進一步進行植物抗病育種以及指導農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實踐具有重要的作用。關鍵詞:植物免疫;flg22;鈣信號II杭州師范大學碩士學位論文AbstractAbstractThemicrobialpathogensinvasionisoneofthemainfactorsrestrictingthehighyieldofcrops.Plantsperceptbioticstressesthroughreceptorsintheplasmamembraneorintracellular,whichcantriggerdownstreamsignalpassw

7、ayandactiveimmuneresponses.Calciumsignalingasthesecondmessengeroftheplanttriggeredbystressesintheearlystageandplaysanimportantroleinsignaltransmission.AsatypicalPAMP,itisclearthathowFLS2perceptsflg22.However,howflg22induceintracel

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