復(fù)合益生菌在凡納濱對(duì)蝦苗種培育中的應(yīng)用及評(píng)價(jià).pdf

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1、學(xué)校代碼：10264研究生學(xué)號(hào)：M150104120上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文復(fù)合益生菌在凡納濱對(duì)蝦苗種培育題目：中的應(yīng)用及評(píng)價(jià)EffectsofcomplexprobioticsintheseedbreedingofLitopenaeus英文題目：vannamei專業(yè)：臨床獸醫(yī)學(xué)研究方向：水產(chǎn)病害防控姓名：孫博超指導(dǎo)教師：宋曉玲研究員二O一八年五月日上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得

2、的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對(duì)所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)

3、位論文。保密□，在年解密后適用本版權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密□學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會(huì)人員名單姓名工作單位職稱是否碩士導(dǎo)備注師孫黎中科院海洋所研究員是主席聶品青島農(nóng)業(yè)大學(xué)教授是委員站文斌中國海洋大學(xué)教授是委員潘魯青中國海洋大學(xué)教授是委員李健黃海水產(chǎn)研究所研究員是委員李晨黃海水產(chǎn)研究所研究員是委員答辯日期2018年5月24答辯地黃海所１號(hào)樓３樓會(huì)議室日點(diǎn)上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文復(fù)合益生菌在凡納濱對(duì)蝦苗種培育中的應(yīng)用及評(píng)價(jià)

4、EffectsofcomplexprobioticsintheseedbreedingofLitopenaeusvannamei學(xué)位論文完成日期：指導(dǎo)教師簽字：答辯委員會(huì)成員簽字：上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文復(fù)合益生菌在凡納濱對(duì)蝦苗種培育中的應(yīng)用及評(píng)價(jià)摘要隨著經(jīng)濟(jì)迅速發(fā)展，人們對(duì)水產(chǎn)品的需求日益增加，水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，養(yǎng)殖密度不斷增大，導(dǎo)致水環(huán)境的生態(tài)平衡遭到威脅?？股匾约盎瘜W(xué)藥物帶來的負(fù)面影響有目共睹，現(xiàn)在水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)急需一條健康的可持續(xù)發(fā)展的道路。益生菌作為一種微生態(tài)制劑，不僅可以改善水體環(huán)境，并能抑

5、制或殺死水體中的病原菌，還可以促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物的生長提高水產(chǎn)動(dòng)物的免疫力。凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)作為我國主要的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物之一，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖的成敗與其苗種質(zhì)量密切相關(guān)。凡納濱對(duì)蝦幼體時(shí)期需要經(jīng)過多個(gè)變態(tài)過程，伴隨著形態(tài)、生活習(xí)性、食性的轉(zhuǎn)變以及免疫系統(tǒng)的形成。本研究從水樣中篩選分離具有功能性的菌株，與本實(shí)驗(yàn)室保藏菌株進(jìn)行配伍后應(yīng)用于凡納濱對(duì)蝦苗種培育過程中，分析復(fù)合益生菌對(duì)對(duì)蝦幼體體內(nèi)微生物組成的影響，探究復(fù)合益生菌在凡納濱對(duì)蝦苗種培育中的應(yīng)用潛力。研究主要內(nèi)

6、容如下：1、海水中硝化細(xì)菌及產(chǎn)酸細(xì)菌的分離鑒定不同的益生菌具有不同的功能，隨著養(yǎng)殖水體中氮濃度的快速上升，導(dǎo)致水體的自凈能力嚴(yán)重下降。而且氨氮和亞硝酸對(duì)水生動(dòng)物具有一定的毒性，影響水產(chǎn)動(dòng)物的健康和生長。而硝化細(xì)菌具有降低養(yǎng)殖水體氨氮的功能。乳酸菌是一種能夠發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生乳酸的微生物。乳酸菌定植在動(dòng)物體內(nèi)，產(chǎn)生乳酸，從而減少病原菌的數(shù)量。本實(shí)驗(yàn)從水樣中經(jīng)過選擇性培養(yǎng)基的篩選，篩選出能夠有效利用亞硝酸鹽的優(yōu)勢(shì)菌株和能夠產(chǎn)酸的優(yōu)勢(shì)菌株。并通過16srRNA方法進(jìn)行鑒定，并且構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果顯示BC109為

7、芽孢桿菌，BC702為腸球菌。血平板結(jié)果說明兩株菌在數(shù)量達(dá)到1×106CFU時(shí)不具有溶血活性，這表明這兩株菌可以作為益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)中進(jìn)行應(yīng)用。2、復(fù)合益生菌配方的篩選為了預(yù)防對(duì)蝦急性肝胰腺壞死綜合征（Acutehepatopancreasnecrosissyndrome,AHPNS）等病害的發(fā)生與流行，越來越多的微生態(tài)制劑被應(yīng)用到凡納濱對(duì)蝦的養(yǎng)殖過程中。本研究中，我們對(duì)復(fù)合益生菌配方以及添加方式進(jìn)行篩選。選取5種益生菌，分別為：假交替單胞菌CDM8、蠟樣芽孢桿菌PC465、短小芽孢桿菌LV012、I上海海洋

8、大學(xué)碩士學(xué)位論文芽孢桿菌BC109以及腸球菌BC702，以及一株具有PirA和PirB毒力基因的副溶血弧菌。首先，我們對(duì)5種益生菌之間的相互拮抗作用進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果表明假交替單胞菌CDM8對(duì)其他四株菌都具有拮抗作用。對(duì)益生菌進(jìn)行配伍，并以不同方式進(jìn)行添加。添加益生菌后，對(duì)水體中的總菌數(shù)（TBC）和總弧菌數(shù)（VBC）進(jìn)行監(jiān)測，結(jié)果表明假交替單胞菌CDM8與短小芽孢桿菌LV012和芽孢桿菌BC109交替添加和假交替