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《轉(zhuǎn)多基因水稻耐鹽株系鑒定與評(píng)價(jià)》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、轉(zhuǎn)多基因水稻耐鹽株系鑒定與評(píng)價(jià)IdentificationandAnalysisofSaltToleranceofMultipleTransgenicHybridPaddyRice課題來源:國家973項(xiàng)目“作物應(yīng)答高鹽、低溫脅迫的分子調(diào)控機(jī)理”(項(xiàng)目編號(hào):2012CBll4204)指導(dǎo)教師:迕送數(shù)援申請(qǐng)學(xué)位門類級(jí)別:理堂亟±論文完成日期:2014年5月名方學(xué)業(yè)究在專研所獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已
2、經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得寧夏大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:鞠繼扎時(shí)間:劫l‘f年鄉(xiāng)月刁日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解寧夏大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意寧夏大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽
3、名:鞠繼覬導(dǎo)師簽名:剛-f.--]:舢葉年‘月習(xí)日帆厶卟曠夕日摘要土壤鹽漬化是嚴(yán)重的非生物脅迫因素之一,很大程度的限制作物生長(zhǎng)。我國鹽漬土約3億畝,占全國耕地面積的l/4,隨著社會(huì)工業(yè)發(fā)展、自然氣候變化和水資源短缺,土地的鹽漬化日益加劇,嚴(yán)重制約著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展。水稻是我國重要的糧食作物,。耳我國糧食總產(chǎn)量的40%。水稻的生長(zhǎng)受多種脅迫因素的影響,其中土壤鹽漬化更是制約水稻生產(chǎn)產(chǎn)量。長(zhǎng)期以來,國內(nèi)外廠。泛開展了對(duì)鹽漬土的改良和利用的研究,人們運(yùn)用基因手段,從植物中分離克隆了可耐鹽的相關(guān)重要基因,培植轉(zhuǎn)基因耐鹽
4、作物。相關(guān)耐鹽基因的研究不但可以探索植物耐鹽機(jī)制,還可以開發(fā)利用生植物耐鹽基因資源,為培育耐鹽農(nóng)作物品種奠定基礎(chǔ)。通過利用基因手段,提高水稻的耐鹽能力,具有深遠(yuǎn)的應(yīng)用前景。本研究前期以優(yōu)育29號(hào)水稻為試驗(yàn)材料,將水稻愈傷組織作為外植體建立了愈傷組織受體系統(tǒng)的高頻再生體系,優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻遺傳轉(zhuǎn)化體系,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化法將載體KETG(ICEl一LOS5一CBF3一ABAR-NCED3)多基因轉(zhuǎn)入水稻,獲得了轉(zhuǎn)多基因優(yōu)育29號(hào)植株。本研究以轉(zhuǎn)基因植株的T3代種子為試驗(yàn)材料,對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行分子檢測(cè)和耐
5、鹽性鑒定,主要研究結(jié)果如下:1.首次以優(yōu)育29號(hào)T3代種子為試驗(yàn)材料,獲得12K10、12K12、12K26、12K38四個(gè)轉(zhuǎn)基因株系的基因組DNA,用ICEl、LOS5、CBF3、ABAR、NCED3基因的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,選取的植株基因組中均擴(kuò)增出大小一致的目的條帶,表明目的基因已經(jīng)整合到水稻基因組中。2.125mmol/LNaCl脅迫處理24h后,以已提取的12K10、12K12、12K26、12K38四個(gè)株系的cDNA為模板,以actin為內(nèi)參,用ICEl、LOS5、CBF3、ABAR、NCED3基
6、因的特異性引物進(jìn)行RT.PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物剛1.O%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測(cè),選取的植株基因組中均擴(kuò)增出大小一致的目的條帶,表明目的基因均已在轉(zhuǎn)基因植株中得到表達(dá)。3.在125mmol/L的NaCl脅迫下7d之后,四個(gè)轉(zhuǎn)基因株系12K10、12K12、12K26、12K38的株高、地上部利根鮮重干重、葉綠素含量、葉綠素?zé)晒鈪?shù)、電導(dǎo)率和丙二醛含量等生理生化指標(biāo)都優(yōu)于對(duì)照植株CK,均呈顯著差異水平,說明轉(zhuǎn)多基因載體提高了轉(zhuǎn)基因株系的耐鹽能力。關(guān)鍵詞:鹽脅迫水稻株系耐鹽鑒定耐鹽評(píng)價(jià)AbstractSoilsalini
7、zationisaseriousnon-biologicalthreattoplant.Itcanrestrainthegrowthofplantssignificantly.InChina,thesalinizedlandisabout300millionmu,accountingforonefourthoftotalarableland.Withthedevelopmentinindustry,climatechangeandshortageofwaterresource,salinizationoflandi
8、sincreasinglydeteriorating,whichhasenormouslyconstrainedsustainabledevelopmentofagriculture.PaddyriceisanimportantcropinChina,whichoccupies40%oftotalgrainproduction.However,thegrow