基于蚓糞菌群的土傳病害拮抗菌篩選與復(fù)合菌劑研制

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1、分類號UDC學(xué)位論文學(xué)號叢!!!!!!密級——基于蚓糞菌群的土傳病害拮抗菌篩選與復(fù)合菌劑研制陳浩指導(dǎo)教師姓名:申請學(xué)位級別:論文提交日期:學(xué)位授予單位:塑焦鏊撞!揚劌盤堂!壟菱塹劌!121QQ2碩士至魚!墨生墨旦塹劌盤鱟學(xué)科專業(yè)名稱:圭璧堂論文答辯日期:至Q!圣生墨旦學(xué)位授予日期:星Q!呈生魚月答辯委員會主席:筮±堂墊絲論文評閱人:查E塹塾蕉藍叢查!塾蕉2013年5月學(xué)位論文基于蚓糞菌群的土傳病害拮抗菌篩選與復(fù)合菌劑研制專業(yè)名稱:土壤學(xué)指導(dǎo)老師:胡健教授研究生:陳浩揚州大學(xué)二。一三年五月中文摘要中文捅姜隨著種植面積和年限的逐年增加,作物連作障

2、礙問題已成為我國設(shè)施農(nóng)業(yè)發(fā)展的限制因素之一。已有研究表明,作為有機廢棄物生物消解產(chǎn)物,蚯蚓糞可以改善土壤理化性質(zhì)、調(diào)節(jié)土壤微生物生態(tài),能有效解除作物連作障礙,這些功能的實現(xiàn)可能與蚯蚓糞微生物群落特征密切有關(guān)。開展蚯蚓糞微生物群落特征研究,篩選并利用蚯蚓糞有益微生物,對于拓展蚯蚓糞的土壤生態(tài)調(diào)節(jié)功能具有重要意義。本文初步研究了蚯蚓糞微生物群落多樣性特性,從蚯蚓糞及園土中篩選獲得若干具有廣譜拮抗和體外促生活性菌株,并進行了分子鑒定,同時,在分析了菌株間的相容性,以及優(yōu)化菌株混合發(fā)酵條件的基礎(chǔ)上,構(gòu)建了細菌及放線菌兩類混合菌劑,并初步應(yīng)用于黃瓜連作

3、栽培試驗。主要研究結(jié)果如下:(1)以牛糞、豬糞和污泥等常見有機廢棄物作為蚯蚓餌料,利用細菌16SrDNAV3區(qū)特異擴增及變性梯度凝膠電泳(PCR.DGGE)技術(shù),比較了不同餌料及餌料改變對蚯蚓糞細菌群落結(jié)構(gòu)多樣性的影響。結(jié)果表明:與所取食的餌料相比,蚯蚓糞細菌群落結(jié)構(gòu)多樣性均有不同程度的下降,蚯蚓糞與對應(yīng)餌料之間細菌群落結(jié)構(gòu)相似性范圍為15.3%37.7%;來自不同餌料的蚯蚓糞細菌群落結(jié)構(gòu)相似性范圍為17.2o/曠39.1%,其中以牛糞和豬糞為餌料時,蚯蚓糞細菌群落結(jié)構(gòu)相似性最高,與對應(yīng)的餌料細菌群落結(jié)構(gòu)相似性相比,提高了近l倍;當(dāng)餌料由豬糞

4、改為牛糞后,隨著時間延長,蚯蚓糞細菌群落結(jié)構(gòu)多樣性逐漸下降并趨于穩(wěn)定,并且蚯蚓糞與餌料牛糞的細菌群落結(jié)構(gòu)相似性由0d的33.2%逐漸下降到21d的14.8%并趨于穩(wěn)定。由此可知,餌料的種類及轉(zhuǎn)換可以影響蚯蚓糞細菌群落結(jié)構(gòu)多樣性。(2)利用對峙平板試驗從蚯蚓糞和園土中篩選得到對黃瓜枯萎病菌(Fusarisumoxysporumf),黃瓜立枯病菌(R廳忍Dc,o行腸solaniKiihn)、小麥根腐病菌(Cochliobolussativu)和西瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporiumj3具有拮抗作用的細菌及放線菌22株,其中12個菌株對

5、上述病原菌具有較好的及廣譜的拮抗作用,同時還具有不同程度的體外促生能力。根據(jù)形態(tài)學(xué)特征和16SrRNA序列分析對比發(fā)現(xiàn):8株細菌均為芽孢桿菌屬(Bacillus),4株放線菌均為鏈霉菌屬(Streptomyces)。(3)對供試菌株生長的相容性、適宜pH值范圍及培養(yǎng)基的研究結(jié)果表明:II中文摘要8株細菌之問及4株放線菌之間均具有良好的相容性;8株細菌和4株放線菌培養(yǎng)適宜pH值范圍均為6~8;對混合菌劑培養(yǎng)基配方進行優(yōu)化,提高了拮抗和促生活性。(4)利用平板培養(yǎng)法和PCR.DGGE法,研究了細菌及放線菌兩種復(fù)合菌劑灌根處理對連作黃瓜根際土壤微生

6、物數(shù)量及多樣性的影響。結(jié)果表明:在不同的旌肥條件下,細菌菌劑和放線菌菌劑處理能不同程度地提高黃瓜根際土壤中細菌和放線菌數(shù)量,降低真菌數(shù)量,同時普遍提高了根際土壤細菌與真菌及放線菌數(shù)量的比值。細菌菌劑對根際細菌的促進作用在不施肥及復(fù)合肥+有機肥背景下表現(xiàn)突出,而放線菌劑的促進作用在復(fù)合YJE+微生物肥及復(fù)合肥背景下表現(xiàn)突出。兩種菌劑對根際微生物的比例及細菌群落結(jié)構(gòu)的調(diào)節(jié)作用因施肥背景的不同而存在差異。關(guān)鍵詞:蚯蚓糞;拮抗菌;復(fù)合菌劑;連作障礙;細菌群落多樣性ABSTRACTIIIWimtheincreasingofplantedareaandc

7、uhivingtime.continuouscroppingobstaclesofcropisbecomingseriousproblemandlimitingthedevelopmentofargriculturalindustry.Vermicompost,whichwasgeneratedfromorganicwastebyearthworm,havebeencommercializedasasubstrateandfertilizer.Itpromotedphysicalandchemicalofcontinuouscroppings

8、oil,regulatedsoilflora.Multiplefunctionswererelevantedbeneficialmicrobeofvermicomp

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