sunitinib對egf誘導(dǎo)的hacat細(xì)胞增殖與凋亡的影響及作用機(jī)制

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1、中圖分類號UDCR751601學(xué)校代碼密級碩士學(xué)位論文10533Sunitinib對EGF誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞增殖與凋亡的影響及作用機(jī)制TheeffectandmechanismofsunitinibonproliferationandapoptosisinHaCatcellsinducedbyEGF作者姓名：劉穎科學(xué)科專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)研究方向：皮膚病與性病學(xué)學(xué)院(系、所)：湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師：陳翔教授做答辯日期塵．巧答辯委員會主≤拶L中南大學(xué)二0一三年五月原創(chuàng)性說明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以

2、標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其它人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其它單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名：童：I塑出日期：墮年』月塹日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)說明本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文；學(xué)?？筛鶕?jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文。日期：!塹}-年三月墮日Sunitinib對EGF誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞增殖與凋亡的影響及作用機(jī)制摘

3、要目的：研究受體酪氨酸激酶抑制劑sunitinib對EGF誘導(dǎo)的HaCaT細(xì)胞(HaCaT／E)增殖與凋亡的影響及內(nèi)在機(jī)制。方法：1．采用細(xì)胞計數(shù)的方式檢測EGF對HaCaT細(xì)胞增殖的影響；2．采用MTT檢測sunitinib對HaCaT／E細(xì)胞增殖的影響：3．采用流式細(xì)胞儀檢測sunitinib對HaCaT／E細(xì)胞周期，WesternBlot檢測sunitinib對HaCaT／E細(xì)胞周期蛋白cyclinDl和cyclinEl的表達(dá)水平的變化；4．采用流式細(xì)胞儀檢測sunitinib對HaCa訛細(xì)胞凋亡的影響，WesternBlot檢測sunitinib對HaCaT

4、／E細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白cleaved—PARP表達(dá)水平的變化，電鏡觀察sunitinib對HaCaT肥細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)的影響；5．采用WesternBlot檢測sunitinib對HaCaT／E細(xì)胞Stat3信號途徑的影響。結(jié)果：1．EGF呈時問依賴性的增加HaCaT細(xì)胞的數(shù)量，在3d的培養(yǎng)期間內(nèi)，用10ng／mLEGF處理的HaCaT細(xì)胞在各個時問點(diǎn)數(shù)量顯著高于對照組細(xì)胞(P均<0．05)；2．MTT結(jié)果顯示sunitinib抑制HaCaT／E細(xì)胞的增殖，并呈濃度及時問依賴性(P均<0．05)；3．Sunitinib呈濃度及時間依賴性降低HaCaT／E細(xì)胞S期的比例，

5、并抑制細(xì)胞周期蛋白cyclinDl和cyclinEl的表達(dá)水平(P均<0．05)；II4．Sunitinib呈濃度及時間依賴性誘導(dǎo)HaCaT／E細(xì)胞的凋亡，凋亡相關(guān)蛋白cleaved．PARP的表達(dá)量隨sunitinib濃度的增高而出現(xiàn)表達(dá)量上調(diào)(P

6、／E)細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)其凋亡。2．Sunitinib可能通過Stat3信號途徑介導(dǎo)細(xì)胞周期及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)而影響HaCaT／E細(xì)胞的增殖和凋亡。關(guān)鍵詞：受體酪氨酸激酶抑制劑，sunitinib，HaCaT細(xì)胞，增殖，凋亡。TheeffectandmechanismofsunitinibonproliferationandapoptosisinHaCatcellsinducedbyEGFABSTRACTPurposeToinvestigatetheinfluenceandinternalmechanismofreceptortyrosinekinaseinhibit

7、orsunitinibonproliferationandapoptosisinHaCaTcells(HaCaT／E)inducedbyEGF．Method1．TestedtheeffectsofproliferationofEGFinHaCaTcellbycellcount．2．TheinfluenceofproliferationofsunitinibinHaCaT／EcellswasdetectedbyMTTassay．3．TheinfluenceofthecellcycleofsunitinibinHaCaT／EcellswasdetectedbyFlo